[doc] 新老复方甘草口服液的药效学等效性实验研究

[doc] 新老复方甘草口服液的药效学等效性实验研究 新老复方甘草口服液的药效学等效性实验 研究 医药导报2007年1O月第26卷第10期 纤维化形成的促进作用而抑制纤维化的发展. [参考文献] [1]FORGIONEMA,CAPA,LIAOR,eta1.Heterozygouscellulargl- utathioneperoxidasedeficiencyinthemouse:abnormalitiesinvascular andcardiacfunctionandstructure[J].Circulation,2002,106(9): l154. [2]ANTONIADESHN,BROVOMA,AVILARE,eta1.Plateletde- rivedgrowthfactorinidiopathicpulmonaryfibrosis[J].JClinInvest, 1990,86:1055—1064. [3]LAVNIKOVAN,PRODHOROVAS,HELYARL,eta1.Isolation andpartialcharacterizationofsubpulationsofalveolarmacrophages, granulocytes,andhighlyenrichedinterstitialmacrophagesfromrat lung[J].AmJRespirCellMolBiol,1993,8:384—391. [4]高春芳,陆论根.纤维化疾病的基础和临床[M].上海:上海科学 技术出版社,2004:439—446. [5]吕长俊.肺巨噬细胞亚群:肺泡巨噬细胞和问质巨噬细胞[J].国 外医学呼吸系统分册,1995,15(4):193—196. [6]BARTRAMU,SPEERCP.Theroleoftransforminggrowthfactor betainlungdevelopmentanddisease[J].Chest,2004,125(3): 754—765. [7]KHALILN,BEREZAYO,SPORNM,eta1.Macmphageproduction oftransforminggrowthfactorp1andcollagensynthesisinchronic pulmonaryinflammation[J].JExpMed,1989,170:723. 新老复方甘草口服液的药效学等效性实验研究 李丹,陈金和 (武汉大学基础医学院药理学系,430071) [摘要]目的观察老复方甘草13,服液改为新复方甘草13,服液后的药 效学变化.方法采用氨水所致小鼠咳 嗽,枸橼酸所致豚鼠咳嗽观察其镇咳作用;小鼠呼吸道酚红排痰量法 观察其祛痰作用.结果新复方甘草13,服液能显着 减少小鼠因氨水所致的咳嗽次数及枸橼酸所致豚鼠的咳嗽次数 (P<0.05),同时延长咳嗽潜伏期;明显增加小鼠气管酚 红排出量(P<0,05);与老复方甘草13,服液比较,相同剂量组的作用 差异无显着性,但能明显镇咳祛痰的最小剂量小于 老复方甘草13,服液.结论新复方甘草口服液具有很好的镇咳,祛痰作 用,且优于老复方甘草13,服液. [关键词]甘草13,服液,复方;镇咳;祛痰 [中图分类号]R285[文献标识码]A 复方甘草口服液是呼吸系统疾病常用镇咳药,老处方主要 由甘草流浸膏,复方樟脑酊,酒石酸锑钾等成分组成.酒石酸锑 钾主要用于祛痰,近年被发现毒性很大,影响人体健康,世界各国 医药管理部门对其取消药用资格.因此,复方甘草口服液进行了 改方,选用新成分愈创甘油醚替代酒石酸锑钾.笔者对更改后的 复方甘草口服液镇咳,祛痰药效等效性进行研究,现报道如下. 1材料 1.1药物新复方甘草口服液(由武汉马应龙药业集团股份 有限公司提供,批号:000310,含生药量126.98mg?mL,,临床 用量10,30mL?d”;老复方甘草口服液,由武汉马应龙药业集 团股份有限公司生产,批号000310,含生药量121.56 mg?mL,.临床用量10,30mL?d一. 1.2试剂氨水(上海试剂一厂综合经营公司提供);枸橼酸 (中国医药集团上海化学试剂公司生产);苯酚红(北京市朝阳 区旭东化工厂生产). 1.3仪器紫外可见分光光度计UV265(日本制造);WH-96 超声波雾化器(汕头市粤华医疗器械厂). 1.4动物昆明种小鼠,体重18—22g,雌雄各半,由湖北省实 验动物中fl,提供,动物合格证号:SCXK(鄂)2003-0005.豚鼠, [收稿日期]2007-02-03 [作者简介】李丹(1979一),女,河南南阳人,在读硕士,主要从 事新药药理学研究.电话:027—67126932,E?mail:autusheep@hotmail. [文章编号]1004-0781(2007)10.1141-03 体重200—250g,雌雄各半,由湖北省实验动物中心提供,动物 合格证号:SCXK(鄂)2003-0005. 2方法与结果 2.1镇咳作用 2.1.1小鼠氨水引咳实验参照文献….取体重18,22g的 昆明种小鼠84只,雌雄各半,按体重随机分成7组,每组12只, 即:空白对照组,新复方甘草口服液大,中,小剂量组,老复方甘 草口服液大,中,小剂量组.空白对照组灌胃给予0.9%氯化钠 溶液;新复方甘草口服液大,中,小剂量组分别灌胃给予10.0, 5.0.2.5mL?kg,?d(折合生药量为1.27,0.63,0.31 g?kg,?d..)的新复方甘草口服液;老复方甘草口服液大,中, 小剂量组分别灌胃给予10.0,5.0,2.5mL?kg,?d..(折合生 药量为1.22,0.61,0.30g?kg,?d..)的老复方甘草口服液. 给药容量0.2mL?(10g),,qd,连续3d.末次给药60rain后, 将动物置于喷雾装置内,将浓氨水以1kg?(cm)匀速喷入5 s弓I咳,然后观察小鼠咳嗽的潜伏期及2min内的咳嗽次 数,以喷雾开始到第一次咳嗽的时间为潜伏期.结果见表1. 新复方甘草口服液大,中剂量组与老复方甘草口服液大,中剂 量组均能显着减少小鼠2min内的咳嗽次数,与空白对照组比 较差异有极显着性(P<0.O1),但各组对小鼠咳嗽的潜伏期均 无明显影响.新复方甘草口服液小剂量组也能明显抑制小鼠 咳嗽次数,与空白对照组比较差异有显着性(P<0.05),老处方 小剂量组则无明显抑制小鼠咳嗽次数的作用.两处方相同剂 ? 1142?HeraldofMedicineVo1.26No.10October2007 量组间对小鼠咳嗽次数抑制作用比较,新处方咳嗽次数少于老 处方,但组间比较差异无显着性.实验表明新复方甘草口服液 的镇咳作用要优于老复方甘草口服液. 表1各组小鼠因氨水所致咳嗽的次数和潜伏期? 与空白对照组比较,”P<0.O1,P<O.05 2.1.2豚鼠枸橼酸致咳实验参照文献[2].取体重200, 250g的豚鼠84只,雌雄兼用,按体重随机分成7组,每组12 只,即:空白对照组,新复方甘草口服液大,中,小剂量组,老复 方甘草口服液大,中,小剂量组.空白对照组灌胃给予0.9%氯 化钠溶液;新复方甘草口服液大,中,小剂量组分别灌胃给予 10.0,5.0,2.5mL?kg一?d(折合生药量为1.27,0.63,0.31 g?kg一?d.)的新复方甘草口服液;老复方甘草口服液大,中, 小剂量组分别灌胃给予10.0,5.0,2.5mL?kg一?d(折合生 药量为1.22,0.61,0.30g?kg一?d.)的老复方甘草口服液. 给药容量1.0mL?(100g)一,给药1次,给药60min后,动物置 于喷雾装置内,将17.5%枸橼酸以中等压力匀速喷入30s,记 录豚鼠咳嗽的潜伏期及5min内的咳嗽次数,以喷雾开始到第1 次咳嗽的时间为潜伏期.结果见表2.新复方甘草口服液大, 中剂量组与老复方甘草口服液大,中剂量组均能减少豚鼠5 min内的咳嗽次数,与空白对照组比较差异有极显着性(P< 0.01),且新复方甘草口服液小剂量组也能明显减少豚鼠咳嗽 次数,与空白对照组比较差异有显着性(P<0.05).相同剂量 新复方甘草口服液组咳嗽次数少于老复方甘草口服液组,但差 异无显着性.对咳嗽潜伏期的影响,新处方中剂量组就能明显 延长咳嗽潜伏期,与空白对照组比较差异有极显着性(P< 0.01),老处方仅在大剂量组能延长潜伏期,与空白对照组比较 差异有显着性(P<0.01).表明新复方甘草口服液的镇咳作用 要优于老处方复方甘草口服液. 2.2祛痰作用参照文献[3].取体重18—22g的小鼠7O 只,雌雄各半,按体重随机分成7组,每组10只,分组方法与给 药剂量同上述”2.1.1”中小鼠氨水引咳实验.给药容量0.2 mL?(10g)一,qd,连续给药3d.末次给药后30min,每只腹腔 注射0.25%酚红溶液0.7mL,注射酚红溶液后30min,拉颈处 死小鼠,分离气管,插入针头,以5%碳酸氢钠溶液冲洗3次(每 次0.4mL),冲洗液合并,用分光光度计测吸光度(A)值,波长 546nrn,用酚红溶液作一曲线,根据标准曲线计算酚红含 量(Ixg?mL.).结果见表3.除老复方甘草口服液小剂量组 外,其他5个给药组,小鼠气管对酚红的排出量均明显增加,与 空白对照组比较差异有极显着性(P<0.01).两种药液相同 剂量组间对小鼠酚红排出量的作用比较,差异均无显着性.新 复方甘草口服液在小剂量组就明显增加酚红排出量,而老复方 甘草口服液能明显增加酚红排出的最小剂量为中剂量组.这 表明,新复方甘草口服液在祛痰方面,要优于老复方甘草口服 液. 表2各组豚鼠因枸橼酸所致咳嗽的次数和潜伏期x? 与空白对照组比较,P<0.01.P<0.05 表3各组小鼠气管酚红排痰?检测值? 与空白对照组比较,”P<0.0l,P<0.05 3讨论 复方甘草口服液是呼吸系统疾病常用镇咳祛痰药,由阿片 酊,甘草流浸膏,八角茴香油,樟脑等成分配置而来.老处方尚 含祛痰成分酒石酸锑钾,它的毒性很大,可导致室性心动过速, 期前收缩,甚至发生急性心源性脑缺血综合征.该药还可使转 氨酶升高,导致肝肿大,出现黄疸,并发展成中毒性肝炎.酒石 酸锑钾的质量标准已取消,且生产厂家较少,原料来源困难. 复方甘草口服液为经典处方,且疗效肯定,价格合理,因此,为 确保药物的治疗作用,在复方甘草口服液处方中采用新的具有 祛痰作用的成分愈创甘油醚.愈创甘油醚主要用于治疗慢性 支气管炎,慢性化脓性气管炎和肺脓肿等引起的多痰咳嗽,并 作为止咳药物与其他有效成份配合使用,副作用小J. 本实验结果证实,新复方甘草口服液与老复方甘草口服液 镇咳祛痰方面药效学基本相似,且新处方能明显祛痰镇咳作用 的最sl,N量小于老处方,新复方甘草口服液的镇咳祛痰作 用要优于老复方甘草口服液,从而证实了新处方复方甘草口服 液的有效治疗作用.同时新处方复方甘草口服液配方中不含 毒性成分酒石酸锑钾,用药更加安全,为临床合理用药提供了 实验依据. [参考文献] [1]徐叔云,苄如濂,陈修.药理实验方法学[M].2版.北京:人民卫 医药导报2007年l0月第26卷第10期?1143? 生出版社,2002:1420.140. [2]李仪奎.中药药理实验方法学[M].上海:上海科学技术出版社,[4]胡熙明,张立平.中国药物大全(西药卷)[M].北京:人民卫生出 1991:423.版社,1991:207. [3]陈奇.中药药理研究方法学[M].北京:人民卫生出版社,1994: 无粉五角叶粉背蕨中化学成分的初步研究 张悦,阮汉利,张勇慧,皮慧芳,吴继洲,孙汉董 (1.华中科技大学同济医学院药学院,武汉430030;2.中国科学院昆明植物研究所,650204) [摘要]目的提取,分离和鉴定无粉五角叶粉背蕨中化学成分.方法采用硅胶柱色谱法分离,光谱分析法 鉴定化学成分.结果从无粉五角叶粉背蕨中得到4个成分:三十二烷醇(dotriacontano1),软脂酸(hexadecanoicacid), 13.谷甾醇(13.sitostero1)和Alepterolicacid.结论这4个化舍物均为首次从该植物中得到. [关键词]无粉五角叶粉背蕨;Alepterolicacid;化学成分 [中图分类号]R284.1[文献标识码]A[文章编号]1004-0781(2007)10?1143-02 无粉五角叶粉背蕨(Aleuritopterisargenteavat.obscura)是 中国蕨科Sinopteridaceae粉背蕨属Aleuritopteris植物,药用其全 草.因其茎黄棕色,光滑,形如铜丝状,故又名”铜丝还阳”.该 植物为多年生草本,分布于神农架地区的新华,阳日,松柏,盘 龙等地,生长于海拔<1000m的山坡林下,沟边或岩石上.无 粉五角叶粉背蕨具有清热解毒,祛风湿的功效,民间用于痈肿 疮毒,无名肿毒,烧烫伤,风湿疼痛等….有关其化学成分笔者 未见研究报道.为了寻找无粉五角叶粉背蕨抗风湿药效学物 质基础,笔者对产于湖北省神农架地区的该植物进行了初步的 化学成分研究,报道如下. 1仪器与材料 磁共振谱由RX一500型磁共振仪测定(.H—NMR:500MHz; “C—NMR:125MHz);四甲基硅烷(TMS)为内标;E1.MS谱用美 国FinniganDSQ四极杆质谱仪测定;薄层层析硅胶,柱层析硅 胶(200.300目)均为青岛海洋化工厂生产. 实验用无粉五角叶粉背蕨药材于2003年7月购自湖北神 农架地区,由神农架药检所石世贵主任药师鉴定,植物标本保 存于药学院天然药物化学教研室. 2提取与分离 无粉五角叶粉背蕨全草575g,粉碎,以95%乙醇回流提取 5次,合并提取液浓缩得浸膏55.4g,以甲醇溶解,硅胶拌样,湿 法上400g硅胶柱,以石油醚一醋酸乙酯一甲醇进行梯度洗脱.石 油醚洗脱流分再经硅胶柱层析得化合物I(12mg),化合物? (10.5mg);石油醚一醋酸乙酯(9:1)洗脱流分经重结晶得化合 物?(54mg);醋酸乙酯冼脱流分(1:1)经重结晶得化合物? (112mg). [收稿日期]2007-01-23 [作者简介]张悦(1980一),女,湖北武汉人,在读硕士,主要从 事天然药物化学研究工作.电话:027—83657870,E—mail:pxpxzyzy@ gmail.corn. [通讯作者]阮汉利,女,副教授.电话:027—83657870,E—mail: ruanhl@mails.tjmu.edu.an. 3结构鉴定 3.1化合物I白色粉末(EtOAc),熔点(mp)77,78?.IR (KBr):3420(OH),2918,2850,1464,1059,721am...El— MSm/z(%):448(M—H2O),281,167,125,97,69,57 (100),43oIH?NMR(CDC13)8:3.62(2H,t,?CH2OH),1.55 (2H,t,CH2—2),1.23[mH,s,(?CH2)29],0.86(3H,t, CH,).鉴定该化合物为正三十二烷醇. 3.2化合物?白色颗粒状结晶(EtOAc),mp51,53?. EI—MS:256M.IR(KBr):3400,2500,1700,720am,;’H. NMR(CDC13)8:2.52(2H,t,2?H),1.78(2H,m,3-H),1. 38(2H,m,4一H),1.24(22H,m,5—15一rt),0.85(3H,t,16一 H).结合”C?NMR(CDC1)谱推测为软脂酸,与标准品软脂酸 在多种溶剂系统共薄层,R值一致,混合熔点不下降,鉴定该化 合物为软脂酸. 3.3化合物?无色针状结晶(EtOAc),mp136—137?. H—NMR(CDC13)8:5.45(1H,m,6一H),4.89(1H,s,OH), 3.27(1H,m,3-H),1.34(3H,s,19一H),1.06(3H,s,18一 rt),0.93(6H,d,26,27一H),0.91(3H,t,29一H).”C—NMR (CDC1)8:140.5(C一5),121.9(C-2),71.5(C?3),56.7(C一14), 56.5(C?17),50.5(C一9),46.6(C-24),42.5(C?13),42.0(C4), 39.6(C?12),37.5(C一10),37.1(C一1),36.5(C-20),34.0(C一 22),32.0(C一7),31.8(C一8),31.7(C一2),30.9(C-25),26.5(C一 23),26.4(C一15),23.2(C-28),21.0(C-26,27),19.6(C?19), 19.5(C一21),12.1(C-29),11.9(C一18).推测该化合物为B?谷 甾醇.与p一谷甾醇标准品在多种溶剂系统共薄层分离,R值一 致,混合熔点不下降,鉴定为B.谷甾醇. 3.4化合物?白色针状结晶(EtOAc).FAB—MS:303(M+ 1一H2O).H—NMR(CDC13)和”C—NMR(CDC13)数据通过2D— NMR进行归属(见表1),与文献报道的Alepterolicacid完全一 致,鉴定为Alepterolicacid[3-Hydroxy.8(17),13E.1abdadien. 15?oicacid].结构图见图1.