小白蛋白阳性细胞在大鼠红核内的分布

小白蛋白阳性细胞在大鼠红核内的分布 韩东日 李光昭 崔尚允 延边大学医学院局部解剖学教研室 ( ) 提要 用卵白素生物素复合物法 avidin2biotin co mplex met hod ,ABC观察了小白蛋白阳性细胞在 大鼠红核内的分布状态. 小白蛋白阳性细胞在红核内分布按部位有一定的差异 ,如吻侧小白蛋白 阳性细胞所占比例最多 ,约占细胞总数的 92 % ,中间吻侧和中间尾侧分别占细胞总数的 88 %和 71 % ,尾侧则相对较少 ,约占 73 %. 根据细胞的大小及微细结构的特点 ,红核的细胞可分为大 、中 、 小 3 种细胞. 中 、小细胞多数为小白蛋白阳性细胞 ,散在性地分布在红核的全区 ,而大细胞主要分 布于尾侧 ,小白蛋白阳性细胞相对较少. 关键词 红核 ; 小白蛋白 ;大鼠 中图法分类号 Q512 . 1 Distribution of parval buminergic neurons in the rat red nucleus Han Dongri ,L i Guangzhao , Cui Shangyun Depa rt ment of Topog rap hic A n atom y , Y anbi an U ni versi t y Col lege of M edici ne ABSTRACT We investigated t he dist ributio n of parvalbuminergic neuro ns in t he red nucleus of t he rat using avidin2 biotin co mplex met hod. Out of t he rubral neuro ns ,t he incidences of parvalbuminergic neuros were about 92 % ,88 % , 71 % and 73 % in t he rost ral , midrost ral , midcaudal and caudal portio ns of t he red nucleus respectively. These par2 valbuminergic neuro ns could be subdivided into t hree types , large , medium2sized and small neuro ns o n t he bases of t he size of so mata and t heir ult rast ruct ural feat ures. The small and medium2sized parvalbuminergic nucleus were dis2 t ributed in t he entire extent of t he red nucleus , where as t he large parvalbuminergic neuro ns were mainly p resent in t he caudal portio n of t he nucleus. Key words red nucleus ;parvalbumins ; rat s 钙在细胞的正常生理活动中起重要的作1 材料和方法 用 ,它可将细胞一些信息传导到细胞内 ,从而 实验用动物为 Wistar 大鼠 7 只 , 体重1 起第二信使的作用, 然而 , 这种作用一般 230 , 250g 左 右 , 雌 雄 不 拘. 戊 巴 比 妥 钠 需要钙结合蛋白质的参与. 在神经系统中目 ) (40 mg/ kg溶液腹腔注射麻醉 , 经升主动脉 前已发 现 的 钙 结 合 蛋 白 有 小 白 蛋 白 、Cal2 依次灌注生理盐水 100 ml ,含 40g/ L 多聚甲 bindin2D28 K , Calpains 及 S2100 等 一 些 蛋 醛 ,灌注毕 , 取中脑后固定 3 h , 置于 300g/ L ) (蔗糖溶液中 16 h 4 ?,用冰冻切片机连续冠 1 ,2 白μ 状切片 , 片厚 30m. 将切片分为吻侧 、中间 . 这些多种钙结合蛋白中小白蛋白在 吻侧 、中间尾侧及尾侧 4 个部分 ,每部分中选 神经系统内只存在于少数神经元内. 小白蛋 3 片 ,用卵白素生物素复合物法进行免疫组 白是某些特定神经元的特异性蛋白质 ,它在 织化学反应. 其步骤如下 : 先用马血清预处 这些特定神经元内的机能意义越来越受到人 ( )理 ,一抗用鼠抗小白蛋白单克隆血清 Sigma 们的重视. 目前关于含小白蛋白神经元的研 ) ( 1?3000 , 孵育 24 h 4 ?, 二抗为生物素标记 究起步较晚 ,对其机能意义以及中枢神经系 ) ( ) ( 的马抗鼠 Ig GVicto r1?50 ,孵育 2 h 室温, 统内的分布了解还较少. 本文用卵白素生物 素复合物法观察了小白蛋白阳性细胞在红核 4 h . 每次程序间均用0 . 1 mol/ L 磷酸盐缓冲溶可分为大 、中 、小 3 种细胞. 从吻侧至尾侧 4 液洗涤 3 次 , 每次 15 min , 最后在含 0 . 5g/ L个部位上小白蛋白阳性细胞分布有一定差异 () 图 1,3. 中 、小细胞多数为小白蛋白阳性 3 ,3′2二氨基联苯胺和 0 . 05g/ L 双氧水的磷 细胞 ,呈卵圆形 、梭形或长梭形 ,在红核的吻 酸盐缓冲溶液中呈色 5,10 min . 切片裱于载 侧至尾侧分布比较广泛 ;大细胞多呈多角形 , 玻片 ,在室温中干燥 ,梯度酒精脱水. 用光镜 从红核中部到尾侧逐渐增多 ,但尾侧的大细 观察 ,并统计细胞数. () 2 结果胞多数为小白蛋白阴性细胞 图 4.统计结 红核内细胞多数为小白蛋白阳性细胞 , 图 1 红核尾侧部冠状切片上小白蛋白阳性细胞图 2 中间尾侧部小白蛋白阳性细胞×45 ×45 的 80 % , 吻侧 62 . 2 ?9 . 0 个细胞中有 57 . 4重复快速放电能力 ,调节递质释放等作用机?1 . 5 个小白蛋白阳性细胞 , 约占细胞总数 理来协调完成锥体外系通路上各种机能活 的 92 % , 中间吻侧和中间尾侧部细胞数较 动. 参 考 文 献多 ,分别为 13 2 . 7 ?22 . 4 个和 157 . 4 ?19 . 5 1 Baimbridge KG , Celio M R , Roger J H. Calcium2 个 ,其中 88 %和 71 %是小白蛋白阳性细胞 , binding p roteins in nervous system. T I N S ,1992 ; 而尾侧 92 . 3 ?25 . 7 个细胞中小白蛋白阳性 15 :303 细胞相对比其它部位较少 ,约占 73 %. Cellio M R. Calbindin D228 K and parvalbumin in 2 3 讨论t he rat nervous system. N eu roscience , 1990 ; 35 : 375 红核的大细胞部分又称旧红核 ,随动物Vuillo n2Cacciut tolo G ,Bosler O , Nieoullo n A. GA2 3 的进化此部逐渐移至红核的尾侧. 小细胞部 BA neuro ns in t he cat red nucleus : A biochemical 分形成核的主体 ,也称为新红核 ,其发育程度 and immuno histochemical demo nst ratio n. N eu2 同小脑中央核 ,特别是齿状核的发展相一致. rosci L et t ,1984 ; 52 :129 Andre D G , Vuillo n2Cacciut tolo G , Bosler O. GA2 4 本实验结果 ,约 80 %的细胞属于小白蛋白阳 BA nerve endings in t he red nucleus , co mbined 性细胞 ,它在红核内的分布从吻侧至尾侧有 detectio n wit h seroto nin terminals using dual im2 一定差异. 如吻侧部密集分布 , 而尾侧较稀 munocytochemist ry. N eu roscience , 1987 ; 23 : 疏 ,多数大细胞是小白蛋白阴性细胞 ,说明新 1095 红核是以小白蛋白阳性细胞为主体. 许多文 γ5 Colio M R. Parvalbumin in most 2aminobutyricγ献报道 , 红核内有2氨基丁酸能 、胆碱能及 acid2co ntaining neuro ns of t he rat cerebral cortex. γ谷氨酸能神经元 ,其中2氨基丁酸能神经元 S cience ,1986 ; 231 :995 是小细胞 ,主要分布在红核的吻侧 ,尾侧则稀 Kosaka T , Kat sumaru H , Hama K , Wu J2y , Heiz2 6 3 ,4 少. 这与本实验中小白蛋白阳性细胞的mann CW. GABA ergic neuro ns co ntaining t he 5 2 + 分布状态基本相 似. 然 而 大 脑 皮 质、海Cabinding p rotein parvalbumin in t he rat hip2 67 pocamp us and dentate gyrus. B rai n Res , 1987 ; γ马 、小脑等结构的部分神经元内2氨基 419 :119 丁酸和小白蛋白共存. 由此可以推测红核细 Colio M R , Heizmann CW. Calcium2binding p rotein 7 γ胞内的小白蛋白也可能与2氨基丁酸有共 parvalbumin as a neuro nal mar ker . N at u re ,1981 ; 存关系 ,对此有必要进一步探讨. 293 :300 目前一般认为小白蛋白不是神经递质 ,( 颜焱华 , 郑德枢. 钙结合蛋白 parvalbumin 小白 8 而是一种特异性神经元内蛋白质 ,其作用机 ) 蛋白及其在中枢神经系统中的分布. 神经解 () 剖学杂志 ,1992 ; 8 1:17 理的一个推测是防止游离钙离子增多 ,小白 8 蛋白结合钙离子同时可以释放出镁离子.( ) 1997 - 07 - 21 收稿