【doc】高效液相色谱法测定复方丹参片三七皂甙R1的含量

【doc】高效液相色谱法测定复方丹参片三七皂甙R1的含量 高效液相色谱法测定复方丹参片三七皂甙 R1的含量 复方丹参片为中国药舆收载品种.由丹参, 三七和冰片组成.其中三七为名贵中药材.其主 要有效成分为皂甙类,三七皂甙R.为其特有化 学成分.报道的含量测定方法为:薄层扫描法测 定三七中人参皂甙Rg和Rb..;高效掖相色 谱一紫外分光检测法测三七皂甙R--和Rg+,测 定波长203nm.实验条件要求严格.本文采用 高效液相一差示检测法i匣I定三七皂甙R.含量. 实验操作简便易行. 1实验部分 1.l仪器,药品与试剂 仪器高教液相色谱仪,差示检i疃I器,均日 本岛津产. 试剂甲醇,磷酸均为纯;中性氧化铝 1OO,200目;三七皂甙R,对照品,中国药品生 物制品检定所提供. 样品复方丹参片,市售. 1.2色谱分析条件 250ram);流动相 色谱柱C18(4.6ram× 54甲醇(磷酸调pH4);室温;流速lmUmin. 1.3实验条件考察 1.3.1线性范围麓曲线 精密量取三七皂甙对照品溶液 (o.4mg/m1)2,4.8.8,lO,注入高嫂液相色谱 仪.测定峰面积,绘制标准曲线.结果在0.8, 4,,Jg范围内呈良好线性关系.其回归方程Y= 一 9.8+141.7X.r一0.9999. 1.3.2精密度'测定 精密量取样品溶液.连续测定5次.求得 RSD为1.94. 1.3.3回收率试验 精密体取已知含量的样品0.9g.7t.锥形瓶 中.精密加入三七皂甙R.对照品溶液,按佯品 ?672-? 溶液制备方法制备.I剥定.回收率为97.7. RSD=1.3,n:5. 1.3.4空白试验 按处方比例配不含三七的空自制剂,按 样品溶液制备方法制备并渊定.结果空白溶液 无干扰 1.4佯品禽址删定 取样品10片.除去糖衣,研细,精密称取 0.9g.性锥形瓶中,精密加入甲醇25m1.休定重 量.回流提取lh.放冷,补足重量.滤过.精密量 取续滤液15ml,中性氧化铝柱(4g.内径 0.9cm)上,加甲醇10m[洗盯莞,弃去洗盯豇液.再 加4O甲醇60mi洗睨.收集洗脱液.蒸干.残 渣加50甲醇使溶解并定容干5ml量瓶.精密 吸取对照晶溶液及样品溶液各10,ul,注入高教 液相色谱仪.测定计并,即得色谱圈见图1. 2.测定结果见附表 I七lR. 对雕品HPl谱嘲 J2卅努" HPI.C辞 2小结与讨论 2.1在测定的9家产品中.一个未俭出三七皂 甙R.,7个样品的含量高于0.14m~g/片.二-个低 于0.08mg/片.含量}相差较大. 2.2本品三七以原粉入药因此控制原药材的 质量对保证成品质量具有实际意义 巾阐?I?药杂199621替翦'?卿 . T 附h磐JI七皂lR.jmE,J2.3本丈采用中性氧化铝拄法净化样品.以适 『豫批『采枇 187『ll2tF.I746')2044)7I)137 291[1303{).2j2 391l{)I1】{).1.1tF8I)引6 593031睦出 求.保证检验的精确度和准确 中人参皂甙Rb的含量 旦黼兹宜1蝻64雌4000漱)学 生咏注射液由参,麦冬,北五睬子提取制 成.具有.回阳救逆"的功效.临床用于抗休克, 升血压,改善微循环.主治冠心病,心肌炎等症. 有关生咏注射液质量研究.已有比色法测定人 参总皂甙,五昧子醇甲等.而未见HPI法 il!I定其中人参皂甙Rb.的报道.人参皂甙,Rb. 是红参中含量最高的单体皂甙.虽然有文献" 认为在腑煮进程中人参皂甙Rb..Rg..Re发生 水解结构改变.但生脉注射液中的人参是采用 乙醇进行回流提取,避免了人参皂甙Rb.等的 ? 损失.故人参皂甙Rb.和Rg.一样.具有含量稳 定且有代表性.近期有人对生脉散粉剂中的人 参皂甙Rg.的含量作了HPIci奥I定,但人参 皂甙Rg.的保留时闻在近30rain处.使一次分 析的整个时间延迟很长.我们将人参皂甙Rb. 作为生脉注射液质量控制指标成分.并经优化 试验选择HPIc分离条件.在l5rfiin内较好地 分离测定了人参皂甙Rb..方法操作简单,快 速,准确.可作为生咏注射液质量控嗣的常规分 析方法. . 1实验部分, . 1.1仪器与试药 LC一6A高赦液相色谱仪.CTO-6A柱温 箱.C—R3A数据处理机.SPD一6AV紫外检测器 嗵I1I药占1996l挪2.1眷11I 27收描 ? 孵 610075)R;j/L\/ (均日本岛津). I.D601大L吸附树脂(成都有机硅研究中 心). 人参皂甙Rb.对照品(中国药晶生物制品 检定所);生脉注射液(四川宜宾制药厂.批号为 930601.930610.930615.940608). 流动相乙腈,甲醇为色谱纯;色谱分析坩水 为超纯水其余试剂均为分析纯. 1.2方法与结果 1.2.i色谱_分离条件 色谱柱Spherisorb—NH(4mmXl50mm). 流动相为乙睛一甲醇一水(255:744:11).用磷 酸调pH至3.0.柱温30('.流速为0.8ml/min. 检测波长205nm量程0.02AUFS. 1.2.2对照品溶液与供试品溶液的制备 1.2.2.1对照品溶液的制备精密称取干燥 至恒重的凡参皂甙Rb对照品适量.用甲醇配 制成tn~/nil溶液,作为对照品溶税. 1.2.2.2供试品溶液的制备参照文献方 法….精密吸取生脉注射液lml于已处理好的 大孔吸附树脂柱中.依次用蒸馏水3ora1.10 乙醇30m1.70乙醇30ml洗脱.收集70%乙醇 洗脱液.水浴挥干.残采物用甲醇分次转入2ml 容量瓶中,Hj甲醇稀释至刻度.备用. ?673?