嗜碱性颗粒白血球：体

嗜碱性颗粒白血球：体 嗜碱性颗粒白血球:体积略小于嗜酸性白血球，细胞质中有大小不等被染成紫色颗粒，颗粒数目较嗜酸性白血球的颗粒少，核为1-2叶染成淡兰色。直径10-11微米。 (C) 无颗粒白血球 淋巴细胞:涂片中可观察到中、小型两种。小淋巴细胞与红血球大小相似，圆形。其中含致密的核，染成深紫色。周围仅有一薄层嗜硷性染成淡蓝的细胞质。中淋巴细胞较大，有较宽层的细胞，核圆形。6-8微米。 单核细胞:体积最大，细胞圆形。胞质染成灰蓝色。核呈肾形或马蹄形，染色略浅于淋巴细胞的核。直径14-20微米。 二(肥大细胞的观察(示教) 胞体较大，呈卵圆形，胞质内充满粗大均等的嗜硷性颗粒。其中含肝素、组织胺等物质。常成群地分布于血管的周围。 三(浆细胞的观察(示教) 细胞呈圆形或卵圆形，胞质丰富，呈嗜硷性。核圆形，着色深，多偏于细胞的一侧，染色质核膜呈车轮分布。正常组织浆细胞少，慢性炎症时增多。浆细胞合成和分泌抗体，对免疫有重要意义。 四(巨噬细胞:又称组织细胞，细胞形态不规则。常伸出短而钝突起，有很强的吞噬能力。 附: 瑞特氏染色: 1(染色液配置 称取瑞特氏染料0.1克溶于60ml甲醇中，过滤。贮褐色瓶中备用。(配置时，要先将瑞特氏染料置研钵体内边研边滴加甲醇，使染料溶液得更好。) 2(瑞特氏染色法: 取小鼠骨动脉血，涂制玻片。干后用玻璃笔在涂处之两侧划线(限制染液流掉)。于划线内部滴加染液3-4滴，经3-5分钟后，再滴加等量的蒸馏水，轻轻晃动混合。经5分钟后，用蒸馏水洗净，待干后用油镜检查。 实验二 沉淀反应 可溶性抗原与相应的抗体混合，在电解质存在的条件下，两者比例适合，即可有沉淀物出现，叫沉淀反应(Precipitation).由于沉淀反应抗原多系胶体溶液。沉淀物主要是由抗体蛋白所组成。 为了求得抗原与抗体的适宜比例，保证有足够的抗体，而且抗原分子小，具有较大的反应面积，因此操作上通常是稀释抗原，不稀释抗体。 沉淀反应的种类有环状沉淀、絮状沉淀、荚膜膨胀、琼脂扩散及免疫电泳等。此外还有放射性同位素标记、酶标记等测定法。 (一)环状沉淀反应 当抗原与相应抗体形成一个接触面时，如二者比例适当，接触面上可形成一个乳白色的环状物即为阳性沉淀反应。 材料: 1. 免疫血清:免疫兔抗人血清 2. 抗原:人血清 3. 小沉淀管、毛细吸管、橡皮头、生理盐水。 方法: 1. 取小沉淀管2只，以毛细吸管吸取抗人血清约0.2毫升，加入第一管，加时注意不能有气泡。 2. 以毛细吸管吸取生理盐水0.2毫升加入第二管。 3. 用毛细吸管吸入血稀释0.2毫升加入各管，加时应注意使抗原溶液缓缓由管壁流下，轻浮于血清面上，使成一明显界面，切勿使之相混。 4. 置室温中10-20分钟，观察液面有无乳白色沉淀环，若有则为阳性。 (二).琼脂扩散试验 琼脂扩散是抗原抗体在凝胶中所呈现的一种沉淀反应。 抗体在含有电解质的琼脂凝胶中相遇时，便出现可见的白色沉淀线。这种沉淀线是一组抗原抗体的特异性复合物。如果凝胶中有多种不同抗原抗体存在时，便依各自扩散速度的差异，在适当部位形成独立的沉淀线，因此广泛地用于抗原成分的分析。琼脂扩散试验可根据抗原抗体反应的方式和特性分为单向免疫扩散、双向免疫扩散、免疫电泳、对流免疫电泳、单向及双向火箭电泳试验。 (1) 单向琼脂扩散试验 材料: 1(诊断血清(抗体:抗人IgG或IgA免疫血清) 2(待检血清(抗原):人血清 3(参考血清:全国统一人血清免疫球蛋白参考血清(批号不同，免疫球蛋白含量不同)。 4(其它:生理盐水、琼脂粉、微量进样器、打孔器、玻璃板、湿盒等。 方法: 1(将适当稀释(事先滴定)的诊断血清与予溶化的2%琼脂在60?水浴预热数分钟后等量混合均匀制成免疫琼脂板。 2(在免疫琼脂板上按一定距离(1.2-1.5厘米)打孔，见图1。 图1单向琼脂扩散试验抗原孔位置示意图 1-5孔加参考血清，6-7孔加待检血清 3(向孔内滴加1:2，1:4，1:8，1:16，1:32稀释的参考血清及1:10稀释的待检血清，每孔10微升，此时加入的抗原液面应与琼脂板一平，不得外溢。