高效液相色谱法测定快胃舒肝丸中厚朴的含量

高效液相色谱法测定快胃舒肝丸中厚朴的含量 高效液相色谱法测定快胃舒肝丸中厚朴的 含量 可北中医2010年12月第32卷第12期HebeiJTCM,December2010,Vol32,No.12 高效液相色谱法测定快胃舒肝丸中厚朴的含量 轩凤国宋志勇 (北京同仁堂天然药物(唐山)有限公司质量保证部,河北唐山064100) 【关键词】色谱法,高压液相;质量控制;评价标准;厚朴;剂型 【中图分类号】R943.3;R282.710.3;R283.622【文献标识码】A【文章编号】11302—2619(2010)12—1863—03 快胃舒肝丸由柴胡,厚朴,当归,白芍药,香附等28味 中药组成,具有健胃止呕,疏郁定痛的作用,临床上主要用 于治疗肝郁食滞,两胁胀痛,胃脘刺痛,嗳气吞酸,呕吐恶 心,饮食无味,身体倦怠.厚朴为主药,根据快胃舒肝丸处 方及制法的特点,采用高效液相色谱法(HPLC)测定快胃 舒肝丸中厚朴的和厚朴酚,厚朴酚的含量,方法简便,结果 准确. 1材料与方法 1.1仪器与试药 1.1.1仪器ThermoFinnigan(SPECTRASYSTEMP1000, SpectraSERIESUV100);N2000色谱工作站. 1.1.2药材与药品和厚朴酚,厚朴酚对照品(中国药品 生物制品检定所);快胃舒肝丸[北京同仁堂天然药物(唐 山)有限公司,国药准字Z20026684,批号:9080002];实验 中所用的化学试剂均为分析纯和色谱纯. 1.2方法 1.2.1色谱条件色谱柱:大连ODS柱,200×4.6mm, 填料粒径5Ixm,柱效按厚朴酚峰计算,理论板数不得低于 2000.流动相:甲醇一水(70:30).测定波长:294nm. 柱温为室温. 1.2.2含量测定 1.2.2.1线性范围考察精密称取和厚朴酚对照品 10.12mg,厚朴酚对照品15.35mg,置50mL容量瓶内,加 1河北省玉田县中医医院制剂科,河北玉田064100 作者简介:轩凤国(1972一),女,工程师,学士.从事药品质量保 证工作. ??-?.?-?-?-?.?.?-?-?-?_?. 照薄层色谱法…试验,吸取上述2种溶液各2IXL,分别点 于同一硅胶薄层板上,以石油醚(30—60?)一甲酸乙 酯一甲酸(15:5:1)上层溶液为展开剂,展开,取出,晾干, 置紫外光灯(254nm)下检视.供试品色谱中,在与对照 品色谱相应的位置上显相同颜色的斑点(图4,见封3). 4讨论 当归主要成分为阿魏酸,为芳香族有机酸,是亲脂性 很强的高分子化合物,易溶于亲脂性有机溶剂,用乙醚振 摇提取后,可得到清晰的TCL谱图.化橘红祛痰止咳,主 要成分为黄酮类如柚皮苷,采用水提取,乙酸乙酯纯化分 1863 甲醇使溶解,并加甲醇稀释至刻度,摇匀,作为储备液.分 别精密吸取此储备液1,2,3,5,10,15mL,置50mL量瓶 内,加甲醇稀释至刻度,得和厚朴酚的浓度分别为:4.048, 8.096,12.144,20.24,40.48,60.72Ixg/mL;厚朴酚的浓度 分别为:6.14,12.28,18.42,30.7,61.4,92.1g/mL,分别 精密吸取上述溶液10,注入液相色谱仪,以峰面积为横 坐标,浓度(g/mL)为纵坐标进行回归.图1,见加页3. 1.2.2.2对照品精密度考察精密吸取对照品溶液(含 和厚朴酚20.24g/mL,厚朴酚30.7g/mL)10IxL重复 进样6次.图2,见加页3. 1.2.2.3对照品溶液稳定性考察以新配制的对照品溶 液为标准,测定放置数小时后对照品溶液的峰面积. 1.2.2.4提取时间考察超声处理的时问分别为l5,2O, 30,40min,测定样品中和厚朴酚,厚朴酚的总量. 1.2.2.5阴性对照按快胃舒肝丸的制法制取厚朴阴性 对照,按样品所述方法检测.图3,见加页3. 1.2.2.6样品重复性试验取本品,除去包衣,研细,取 约1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25mL, 称定质量,超声处理30min,放冷,用甲醇补足减失的质 量,摇匀,即得.取滤液l0,注入液相色谱仪,测定,即 得.图4.见加页3. 1.2.2.7供试品溶液稳定性考察对同一供试品溶液分 别间隔一定时间测定1次,共考察12h. 1.2.2.8回收率试验精密称定已知含量(和厚朴酚含 量0.0407%,厚朴酚含量0.108%)的样品,精密加入一定 量的和厚朴酚对照品,厚朴酚对照品,按样品所述方法测 定,回收率=(测出和厚朴酚的量一样品中含和厚朴酚的 ?_?一?-.-?-?_?-"4"----.一--~p-."b---"e'---.-.-?一?? 离后,可得到清晰的TCL谱图.麻黄温肺平喘,其主要成 分为麻黄碱,为有机胺类生物碱,样品经碱化后使生物碱 游离,便于被三氯甲烷充分提取.五味子其主要成分为五 昧子甲素,为木脂素类成分,亲脂性很强,用文中的2种溶 剂提取后,得到清晰的TCL谱图.以上鉴别方法简便,可 行,可以较好地控制药品质量. 参考文献 [1]国家药典委员会.中华人民共和国药典2005年版:一部 [M].北京:化学工业出版社,2005:附录VIB. (收稿日期:2010—07—05) 1864阿北中医2010年12月第32卷第12期 HebeiJTCM.December2010.Vol32.No.12 量)/添加和厚朴酚的量×100%. 2结果 2.1线性范围考察经回归得和厚朴酚的方程为Y= 6.81×10—6X+0.0682,r=0.9999;厚朴酚的方程为Y = 8.04×10—6X+0.103,r=0.9999.由此可知,和厚朴 酚在4.048—60.7.2g/mL,厚朴酚在6.14—92.1g/mL 范围内呈良好的线性关系,且该直线基本通过原点,可用 一 点法进行含量测定.见1. 表1线性关系考察 2.2精密度考察和厚朴酚对照品溶液峰面积的RSD: 0.79%,厚朴酚对照品溶液峰面积的RSD=0.70%,测定 结果表明精密度良好.见表2. 表2对照品精密度考察 2.3对照品溶液稳定性考察对照品溶液置于5?左右 存放24h,和厚朴酚,厚朴酚的峰面积的RSD均<2%,表 明对照品溶液24h内基本稳定.见表3. 表3对照品溶液稳定性考察 2.4提取时间考察根据以下实验数据,表明30min内 基本提取完全,故实验时间选为超声处理30min.见 表4. 表4提取时间考察 2.5阴性对照阴性图谱中在与对照品图谱相应的位置 上无色谱峰,阴性无干扰. ,得和 2.6样品重复性试验对本批样品,重复试验6次厚朴酚含量0.0407%,RSD:0.84%,<2%;厚朴酚含量 0.108%,RSD=1.17%,<2%.见表5. 表5样品重复性测定结果 2.7供试品溶液稳定性考察供试品溶液稳定性考察结 果表明供试品溶液至少在12h内稳定.见表6. 表6供试品溶液稳定性考察 2.8回收率试验和厚朴酚的线性范围4.048— 60.72g/mL,平均回收率98.03%,RSD=0.62%(n= 9);厚朴酚的线性范围6.14,92.1g/mL,平均回收率 99.02%,RSD=0.72%(n=9).见表7,8. 3讨论 由样品色谱图可以看出,在本色谱条件下,其他组分 对和厚朴酚,厚朴酚无干扰,可以做为快胃舒肝丸中厚朴 的含量测定方法用以控制快胃舒肝丸产品的质量. 我们随机从市场上采购了1O种厚朴药材,结果厚朴 酚(C.H80),和厚朴酚(C,8H.0:)的含量平均在2.2% 左右,符合《中华人民共和国药典》规定的2.0%的要求, 按照上述方法研究的结果,我们做了10批样品,分别测定 了样品中厚朴酚,和厚朴酚的含量.按照厚朴含量2.O% 核算到快胃舒肝丸成品中,每1g含厚朴以厚朴酚(C..H 02),和厚朴酚(C.8H802)的总量计,应不得少于0.80mg. 河北中医2010年12月第32卷第12期HebeiJTCM,December2010,Vol32,No.12 表7和厚朴酚回收率测定结果 1865 参考文献 [1]国家药典委员会.中华人民共和国药典2005年版:一部 ?-?_?一???_.-?一 [M].北京:化学工业出版社,2005:176. (收稿日期:2010—04—28) ?-?--o-.?-?-.-?-?'?一?一??-?-?-?-?_._ ? 合理用药与不良反应? 山豆根过量服用引起中毒1例 钟成 (广州医学院第二附属医院中药房,广东广州510160) 【关键词】山豆根;中毒 【中图分类号】11282.710.5【文献标识码】A【文章编号】1002—2619(2010)12 —1865—01 山豆根又名北豆根,云豆根,土豆根,性味苦寒,归肺 经,功能清热解毒,散肿止痛,利咽,临床上为治疗咽喉肿 痛的首选药.笔者曾遇见过量服用山豆根引起中毒1 例,现介绍如下. 唐某,男,5O岁.2010—07—19就诊.因咽喉干痛, 声音嘶哑一次煎服北豆根80g,30min后突然上腹部疼 痛,头晕,大汗淋漓,乏力,心悸,烦躁,呼吸急促,继则恶 心呕吐,不能言语和行走,双眼斜视,上翻,口角歪斜,吐 白沫,随即送我院急诊就诊.查:体温36.5?,心率108 ~/min,呼吸24/min,血压13,3/10.6kpa(100/ 80mmHg),神志昏迷,脉细弱,颈软,双侧瞳孔对光反射 灵敏,心律齐,心音低,肺(一),上腹部压痛(+),右下肢 作者简介:钟成(1974一),男,主管中药师.从事中药临床及研究 工作. 巴彬斯基征(+),克氏征(+).诊断:北豆根中毒.入院 后多次呕吐咖啡色物,先后用止血,镇痛等药物经治疗1 周后康复出院. 按:山豆根所含的苦参碱一甲基金雀花碱有较强的 毒性,过量服用后可导致中枢神经系统和胆碱能自主神 经系统功能紊乱,出现头痛,恶心,呕吐,腹痛,多汗,血压 下降,呼吸困难,烦躁,谵妄等症状,重则出现呼吸衰竭而 死亡.因其在体内有蓄积作用,故临床使用时宜间歇使 用,应严格控制剂量,不得超过10g,由于山豆根煎煮时间 越长,其毒性愈大,故水煎时宜后下,以减轻毒性. 中毒后解救措施:头痛,眩晕,烦躁不安者,予安定 10mg肌肉注射,或予10%水合氯醛灌肠.出现多汗,流 涎,心律缓慢等副交感神经兴奋性增强时可给阿托品1— 2mg皮下注射,每1,2h重复1次,至出现口干,颜面潮 红,心律加快等表现为止.也可用甘草30g煎汤频服. (收稿日期:2010—09—02)