红细胞的溶解

红细胞的溶解 红细胞的溶解——溶血作用 【目的要求】 1(学习引起红细胞溶解的各种实验方法。 2(观察红细胞的溶血现象。 【基本原理】 红细胞在高渗NaCl 溶液中，会失去水分发生皱缩;在低渗NaCl 溶液中，会因过多水分进入红细胞而膨胀，甚至破裂，使血红蛋白释出，称为红细胞溶解。红细胞对低渗溶液具有不同的抵抗力，即红细胞具有不同的脆性，对低渗溶液抵抗力小，示红细胞的脆性大，对低渗溶液抵抗力大，则表示红细胞的脆性小。各种有机溶剂、酸、碱等都会使红细胞的膜发生溶解，称为红细胞的化学性溶血。 一、渗透性溶血——红细胞渗透脆性的测定 【动物与器材】 兔、3%红细胞混悬液、离心机、2ml 注射器、5ml 试管10 支、5ml 吸管3支、试管 和2%NaCl 溶液。 架、滴管、洗耳球、3.8%柠檬酸钠、1% 【方法与步骤】 1.3%红细胞混悬液的制备取兔血2ml，加入盛有3.8%柠檬酸钠溶液0.2ml的离心管中，混合，放入离心机中，转速3000 转/min，离心5 分钟。取出后，弃去上清液，加入生理盐水混合后再离心，然后除去上清液。同法重复一次，即得洗涤之红细胞。用生理盐水配成3%混悬液备用。 2(取试管10 支，从1—10 分别标记后，排列在试管架上，按表3,1配制各种浓度的NaCl 溶液。表3,110 支试管中分别盛各种浓度的Nacl 溶液 试 液1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1%Nacl(ml) 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0 2.2 2.6 3.6 4.0 2%Nacl(ml) 4.0 蒸馏水(ml) 2.8 2.6 2.4 2.2 2.0 1.8 1.4 0.4 溶液浓度(%) 0.30 0.35 0.40 0.45 0.50 0.55 0.60 0.9 1.0 2.0 3(每支试管放入兔3%红细胞混悬液1—2 滴，摇匀，静置半小时后即可观察各试管之溶血现象。 4(管内液体变红而透明者，称完全溶血。记录开始完全溶血管之溶液浓度，这代表红细胞的最高抵抗力，即最小脆性，正常为0.35—0.30%NaCl 溶液，通常以这个数值表示红细胞的渗透脆性。 5(管内液体混浊，上层带红色者，称不完全溶血。记录开始不完全溶血管之溶液浓度，这代表红细胞的最低抵抗力，即最大脆性，正常约为0.45%NaCl 溶液。 6(管内液体分两层，上层浅黄色透明，下层红色不透明者，称不溶血。 二、化学性溶血 【动物与器材】 兔、3%红细胞混悬液、5ml 试管4 支、2ml 吸管5 支、0.9%NaCl、0.1mol/LHCl、0.1mol/LNaOH、乙醚或氯仿。 【方法与步骤】 1(取试管4 支，各盛兔3%红细胞混悬液2ml，分别加入下列溶液中，并观察红细胞在各试管中的溶解现象。 (1)0.9%NaCl1ml (2)乙醚或氯仿0.2ml (3)0.1mol/LHCl1ml (4)0.1mol/LNaOH1ml 2(半小时后、观察各试管之溶血情形，颜色、透明度。分别记录并解释产生溶血的机理。 【思考题】 1(为什么在科研实验或临床上需用各种浓度生理盐水, 2(产生渗透性溶血与化学性溶血的机理有什么不同, 3(根据溶血程度，找出家兔红细胞对低渗溶液的最大抵抗力与最小抵抗 力。 (谢申玲)