磷酸化细胞外信号调节激酶，猪磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)ELISA测定试剂盒

磷酸化细胞外信号调节激酶，猪磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)ELISA测定试剂盒 磷酸化细胞外信号调节激酶,猪磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)ELISA测定试剂盒 性状:试剂盒kit(含试剂+酶联板+覆膜等)。 elisa试剂盒回收率是反应待测物在样品分析过程中的损失的程度，损失越少，回收率越高，如果作标液1PPM，就是1毫克/升，而作出标准数据为0.99毫克/升，就是说你的回收率是99%，这个与真实成分有密切的关系，说明方法的准确度 磷酸化细胞外信号调节激酶,猪磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)ELISA测定试剂盒 ELISA试剂盒说明: 1.检测原理:采用双抗体夹心ABC-ELISA法 2.试剂盒保存:-20?(较长时间不用时);2-8?(频繁使用时)。 3.浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。 4.中、英文说明可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。 5.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。 预期应用 ELISA法定量测定猪血清、血浆、细胞培养物上清或其它相关液体中磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中p-ERK水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入p-ERK、生物素化的抗猪p-ERK抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的p-ERK呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，计算样品浓 度。 试剂盒组成及试剂配制 1. 酶联板:一块(96孔) 磷酸化细胞外信号调节激酶 2. 标准品(冻干品):2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为10 ng/ml，做系列倍比稀释后，分别稀释成10 ng/ml， 5 ng/ml，2.5 ng/ml，1.25 ng/ml，0.625 ng/ml，0.312 ng/ml，0.156 ng/ml，其原液直接作为最高标准浓度，样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml，临用前15分钟内配制。 如配制5ng/ml标准品:取0.5ml 10 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。 3. 样品稀释液:1×20ml/瓶。 4. 检测稀释液A:1×10ml/瓶。 5. 检测稀释液B:1×10ml/瓶。 6. 检测溶液A:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100ul)，实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如1ul检测溶液A加99ul检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。 7. 检测溶液B:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。 8. 底物溶液:1×10ml/瓶。 磷酸化细胞外信号调节激酶 9. 浓洗涤液:1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。 标本的采集及保存 1(细胞培养物上清:请离心后收集上清，并将标本保存于-20?，且应避免反复冻融。 2(血清:标本请于室温放置2小时或4?过夜后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20?保存，但应避免反复冻融。 3(血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8? C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20?保存，但应避免反复冻融。