蛋氨酸螯合锌对雏鸡的营养效果及内源锌排出量的测定

蛋氨酸螯合锌对雏鸡的营养效果及内源锌排出量的测定 为研究新型锌添加剂－蛋氨酸螯合锌对雏鸡的营养效果及探讨内源锌排出量的测定方法，进 行了两个试验：试验?，用卵黄囊充分吸收后的11日龄滨白鸡公雏为试验动物，个体饲养。 以玉米－大豆分离蛋白型的半纯合日粮为基础（含锌23.5mg/kg）。用4重复的4?4二因子设计研究了不同锌化合物－硫酸锌（ZnSO4）、蛋氨酸螯合锌（?）内络盐（ZnMet2）和络阳离子（ZnMet22+）、锌宝100（Zinpro100）及不同锌添加水平（0，15，30，60mg/kg）对锌在雏鸡体内的沉积利用及对雏鸡生长的影响。试验?，用Sibbald的鸡饲料真代谢能快速测定法（TME法）和数学外插法研究12周龄公鸡对锌的吸收和排泄情况。结果表明：锌 源对雏鸡采食量、体增重、增重/耗料、血液和肝脏中锌浓度、鸡体锌沉积量、食入锌沉积 率无显着影响（P>0.05），但均表现出ZnMet2和Zinpro100优于ZnMet22+和ZnSO4的趋势。锌源对胫骨和翼羽中锌浓度和血清碱性磷酸酶（AKP）活性影响显著（P<0.05）。如以ZnSO4组试鸡的胫骨中锌浓度为100%，则ZnMet2、ZnMet22+和Zinpro100 三种锌源组的相对值各为123%、109%和134%。不同锌源的雏鸡体内的锌沉积率与在胫骨中锌浓度的消长规律一致。 以ZnSO4组雏鸡的食入锌沉积率100%, 则ZnMet2为106%, ZnMet22+组为100%，Zinpro100组为112%。4种锌化合物的生物利用率按高低排序为Zinpro100 >ZnMet2> ZnMet22+ >ZnSO4。加与不加锌对雏鸡采食量、体增重有显著影响（p<0.01）。对于玉米－大豆分离蛋白型半纯 合日粮外加锌30mg/kg（总Zn53.5mg/kg）以上可满足本试验条件下雏鸡的正常生长。血液 中锌浓度相对比较稳定。翼羽、胫骨、肝脏中锌浓度，血清AKP活性和鸡体沉积量对进食锌 量的变化反应敏感，呈强正相关，而食入锌沉积率却随进食锌量的升高而明显下降 （r=-0.65**）。故可用翼羽中锌浓度作为评价雏鸡锌营养状况的活体诊断指标，亦可用血 清AKP活性作为此项评价的生化指标。本试验测得玉米－大豆分离蛋白半纯合型日粮中锌的 真利用率为20.40%。在此基础上得出的ZnSO4和ZnMet2的锌真利用率依内源锌排出量参数 的来源不同而不同。用饥饿排空法、同鸡自身排空法和无锌日粮法测得的各内源锌参数校正 时，分别得到ZnSO4的锌真利用率依次为26.33%、20.03%和48.84%；ZnMet2为63.33%、37.38%和86.77%。利用数学外插法得出ZnSO4的锌真利用率为37.01%，ZnMet2为99.07%。可见，由于内源锌排出量参数的差异，两种锌源的锌真利用率波动很大。因而短期快速的TME法用于微量元素利用率的研究是不可取的。所得数据也只能作为参考。但在鸡对锌源的利用方面， 蛋氨酸螯合锌明显优于硫酸锌这一点是可以肯定的。 关键词 雏鸡，锌，螯合物，蛋氨酸 锌（Zn）是迄今已经确认的畜禽营养必需的一种重要微量元素。自从1934年Todd首先证明锌是高等动物必需营养元素以来，世界各国学者对锌做了大量的研究工作，论证了锌在 动物营养中的重要地位，并随着对锌的生理功能、营养作用、生化代谢等方面的深入研究， 表明锌是动物体内功能最多的微量元素。机体对锌的吸收和利用受到许多因素的影响，因而 研制和开发具有较高生物学效价的锌添加剂一直受到人们的重视。 本试验选题的依据是： （1）锌是动物体内功能最多的微量元素。它作为多种酶的组成成分或辅助因子，广泛 参与机体内的碳水合物、脂肪、蛋白质、核酸等的代谢过程，参与机体的免疫作用，保护细 胞膜不受损伤。大量的理论研究和畜牧生产实践证明，如果供锌不足，就会造成缺锌症。日 粮中缺锌，会造成母畜性欲降低，停止发情，不育及死胎增加；公畜精子生成障碍。另外， 动物缺锌会造成不同程度的皮肤角化不全症，并影响氮平衡与硫平衡，猪鸡生长缓慢，产蛋 鸡的产蛋量下降、所产蛋的孵化率降低。鉴于锌对畜禽具有如此之多的重要作用，就必需保 证锌的有效供给，因此科学而又经济地开发和使用锌添加剂，对于充分发挥畜禽的生产潜力 是极为必要的。 （2）影响动物机体对锌吸收利用的因素很多，也很复杂。大量研究资料说明，饲料中 蛋白质的来源和水平、各种氨基酸、某些有机酸、维生素、激素、纤维成份、某些矿物元素、 螯合剂以及饲料中锌的来源和水平等都可影响锌的吸收和利用。Van Campan (1974) 和哈志 刚 (1987) 都用同位素示踪技术证明，在一定范围内日粮蛋白质水平的提高，大鼠、雏鸡对 锌的吸收能力增加。Mejborn Heddie (1987) 用小公貂试验也支持了上述论点，并指出肝中 锌浓度不受蛋白质水平的影响，只依赖于日粮中锌水平的高低，而股骨中锌浓度却随日粮中 蛋白质水平、锌水平的增加而增加。许多国外学者用离体肠段灌注法、饲养屠宰试验法研究 表明饲粮中添加蛋氨酸、谷氨酸、色氨酸、半胱氨酸、组氨酸均有利于肠粘膜对锌的吸收。 Hill(1986)报道 饲喂蛋氨酸使羊精子中锌含量增加。有研究表明，EDTA及其钠盐对锌的吸收有促进作用。Vohra和Kratzer (1964) 以火鸡为试验动物研究了13种有机螯合剂对锌吸收利用的影响，指出螯合物的化学稳定常数在13~17之间，锌的吸收利用最好。随着对锌吸 收机制的深入研究，对于以上现象可解释为：当蛋白质水平增加或者添加多量氨基酸时，使 得肠道中与锌结合的小分子有机配体（氨基酸、二肽、单肽等）的浓度增大，大大地增加了 锌与之结合成可吸收态螯合物的机会，从而利于肠粘膜细胞对锌的吸收，否则游离态锌离子 难以通过细胞膜随粪排出。那么，蛋氨酸螯合锌的饲喂效果和吸收利用情况怎样呢？据现有 文献报道亦有争议。根据美国珍宝公司资料介绍，锌宝（Zinpro）是由蛋氨酸、锌、硫酸氢 根以1：1：1比例生成的具有独特化学结构的有机物复合盐，其化学结构式为： 目前生产的锌宝产品有两种：Zinpro40和Zinpro100。Zinpro40的组成为：Zn4.0％， Met8.0%；Zinpro100中含Zn10.0％。许多国外研究报道蛋氨酸锌应用在牛、猪、羊、火鸡、 鱼、虾、貂等方面都取得了较理想的效果，可促进畜禽增重、提高饲料效率、改善胴体品质 （Henry等，1987；Baker，1987；Morris等，1980；虽然动物性饲料含有丰富的锌，但动 物性饲料在配合饲料中比例呈下降的趋势，特别在无鱼粉日粮和氨基酸添加剂的推广使用情 况下，使锌的供给问题更加突出。寻找能减少植酸类影响的锌添加剂也就显得尤为重要。近 年来，日本、德国、台湾也有许多类似的报道，中国刘长久的“动物营养液”也强调了这种 复合物的独特作用。然而Ｈill等（1986）用鼠、猪试验却表明硫酸锌和蛋氨酸锌具有相似 的生物学价值，并用体外离体肠段灌注法依靠同位素技术证明小鼠肠粘膜细胞对65ZnCl2、 65Zn-14C-Met和65Zn-３H-Lys中65Zn的吸收作用相同。在这种情况下，详细研究蛋氨酸 螯合锌对鸡营养效果，就可为这类添加剂的推广应用提供科学依据，对我国的家禽饲养业也 具有一定的指导意义。 （3）本试验能为研究锌的吸收利用机制做一些宏观探索。Cousins (1979) 分析指出，消化中的离子态锌几乎不能透过肠内膜细胞膜，而必须与有机分子如氨基酸、二肽和类似有 机物形成复合物才能迅速通过粘膜细胞膜类脂屏障，许多学者的研究也支持了这一理论 （Berzin，1986）。因此一般资料都强调蛋氨酸螯合锌吸收率高的主要原因是蛋氨酸与锌经 螯合作用而生成的螯合物具有独特的生理作用。由此我们想到，经一定方法制备出的、能证 明其确为真正螯合物的蛋氨酸螯合锌产品的吸收利用效果是否能更好呢？基于这种想法，在 东北农学院中心试验室滕冰老师的指导下，依配位化学原理，在一定的pH和温度条件下制备出了蛋氨酸螯合锌（?）内络盐（实测含锌18.20%，蛋氨酸82.47%），其结构式为： 蛋氨酸螯合锌（?）络阳离子（液态，含锌4.418mg/ml，蛋氨酸10.075mg/ml），其结 构式为： 动物经口摄入这些螯合物进入胃中，在pH约为2的酸性环境下能否被分解破坏却未见 报道。为进行初步探讨，我们将硫酸锌与蛋氨酸一起加入饲料中，比较其与单独加入饲料的 蛋氨酸螯合锌对鸡的营养效果上的差异，可能会为研究锌吸收利用的机制提供一点试验论 据。 在不屠宰动物的前提下研究不同锌化合物的真利用率对实际饲养业是极为有利和重要的。为 此，试将鸡饲料代谢能的快速测定法（即TME法）和数学上的外插法用于测定硫酸锌和蛋氨 酸螯合锌中的锌真利用率，借此研究这两种方法在微量元素利用率测定中应用的可行性。这 两种方法用于鸡饲料代谢能的测定中已被证明是可行的，而用于微量元素利用率的研究中在 理论上分析是成立的，实际应用效果如何未见报道。故本试验在此方面做一些摸索，以便为 微量元素利用率的研究寻找新的方法。 本试验研究的主要目的在于： （1）研究不同含锌化合物（硫酸锌、锌宝100、蛋氨酸螯合锌（?）内络盐、蛋氨酸 螯合锌（?）络阳离子）在不同锌添加水平时（0,15,30,60mg/kg）在雏鸡体内的沉积利用 情况，比较硫酸锌和蛋氨酸螯合锌的生物利用率。 （2）试用TME法测定硫酸锌、蛋氨酸螯合锌内络盐中锌的利用率，及数学外插法测锌 利用率的可行性。 （3）研究不同锌化合物、不同锌水平对试鸡采食量、体增重、增重／耗料的影响。 1 材料和方法 1.1 试验设计 试验?：研究在不同锌添加水平时，不同锌化合物中的锌在雏鸡体内的沉积情况。试验 采用4重复的4?4二因子交叉设计。见表１。 基础日粮组成为半纯合日粮，除供试锌源及加锌水平外，其余组分及营养指标保持完全一致。 其组成及营养成份见表2。 注：1）多种微量元素组成：每kg饲料中加FeSO4?7H2O 0.402g，CuSO4?5H2O 316mg， MnSO4?H2O 217mg，碘剂1.8mg，硒剂1.5mg，200目石粉做载体。2）此表中所有原料组成总和为96.18%，按试验#设计#添加锌化合物量和补齐蛋氨酸量（使试料中蛋氨酸总水平 达0.51%）后，由二氧化硅加至100%。3）此配方营养水平按中华人民共和国专业—鸡 的饲养标准（1986年版）配制。 试验?：借用鸡饲料代谢能测定方案中的TME法测定锌利用率，方案表3中的(14)、(15)； 外插法测锌利用率方案见表3中的（16）、(17)、（18）。 注：每处理均为4重复 试验程序为：预试期3天?饥饿32小时?强饲试验料（压锭1次经口投入）?收集32小 时排泄物?继续收集表3中处理（14）、（15）的32小时内源排泄物?恢复期。 1.2 试验动物及饲养管理 试?：于1991年7月８日从哈尔滨原种鸡场购入1日龄滨白4?2系公雏200只，每20只为1群在1育雏笼（自行安装，笼底铺有电热网）中按常规要求育雏，日粮与试验期 所用的基础日粮相同，外加锌40mg/kg（以ZnSO4?H2O形式）。待10日龄时（卵黄已基本吸收完全），于7月17日晚24:00时断料，供水，18日早6:00时称重，挑选健康状况良 好的鸡，每4只为1处理，保持各处理组之间鸡体重的一致性，进入试验期。并挑选与试鸡 相近体重范围的10只雏鸡，按样品采集制备法处理，做为试验零对照用。 试验?每一处理4只鸡，均单笼饲养，自由采食，采取少量多餐的方法避免剩料，自由 饮用无离子水。试验从11日龄至24日龄，至31日晚10:00时撤料，供水，次日早6:00 时称每只鸡末重，记录采食量，试?现场试验结束。 试?：将试?所剩公雏按常规饲养至12周龄时，挑选40只健康公鸡施行肛门缝带孔的 塑料瓶盖，恢复期6天，预试期3天，然后进入正试期，按试验?的设计程序进行试验。试 鸡单笼饲养，每一处理4只鸡，用塑料杯自由饮用无离子水。将塑料瓶拧在肛门处的瓶盖上 来收集排泄物。强饲的方法是：将试料压成直径φ＝12mm，长30~40mm 的园柱形饲料锭， 按设计方案中的喂料量准确称量，1次经口投入。 1.3 样品的采集和制备 1.3.1 试?样品的采集、制备 血样的制备：试验结束之日称完试鸡空腹重后，颈静脉放血，用5ml离心管接取血液4ml左右，离心制得血清保存于-4?C左右的冰箱中，备测AKP活性。剩余血放入已知重量的50ml 三角瓶，称量，待消化测锌用。 肝样的制备：试鸡放血后开膛，取出肝脏，去除胆囊，称重，放入50ml三角瓶中备消化测 锌。 胫骨样的制备：左右侧胫骨取出后称重，放入三角瓶中于105?C烘箱中烘至恒重，称绝干 胫骨重，备消化测锌用。 翼羽样的制备：取翼羽2克左右，用洗衣粉去污，并依次用自来水、蒸馏水和无离子水 冲洗，于65?C烘箱中驱水，然后室温放置回潮，称风干羽毛重，放三角瓶中备消化测锌。 鸡空体样的制备：取完上述所需样品后，清除消化道内容物，将鸡体放入编好号的塑料 袋中称重，于-20?C冰箱中保存。灰化时，将鸡体取出解冻，放入磁碗中于110?C烘箱中 24小时，然后剪碎于茂福炉中300?C条件下炭化，待冒完烟后将炉温调至550?C灰化三 小时，取出冷却，称取灰化物重量，研碎进筛，用样品瓶保存样品，供取样消化。 血液、肝、胫骨、翼羽均采用湿消化法，鸡空体样则采用烧灰干消化法。（血液、羽毛、 鸡空体灰为取样消化测定，肝、胫骨为全样消化。） 1.3.2 试?样品的采集、制备 排泄物收集于不锈钢盒中，将不锈钢盒于130?C烘箱中半小时（灭菌），然后转入65?C 烘干，取出室温放置回潮48小时以后用电子称称风干排泄物重，然后粉碎、装瓶，取样干 消化法测锌。 1.4 仪器及测定项目 1.4.1 仪器 试?样品经湿消化或灰化溶解后，用岛津AA-650原子吸收分光光度计测锌。血清碱性 磷酸酶活性用β-甘油磷酸法借助721分光光度计来测定。试?样品经灰化并溶解后用 Pekin—Elmer Iep－6500型等离子发射光谱仪测锌。 1.4.2 测定项目 试鸡始重、末重、采食量；饲料、血液、肝、胫骨、翼羽、鸡空体灰中锌浓度；血 清碱性磷酸酶活性；风干排泄物中锌浓度 1.4.3 计算方法 （1）增重／耗料＝体增重（g）／耗料量（g） （2）食入总锌量（mg）=饲料中锌浓度（mg／g）?采食量（g） （3）锌沉积量（mg）＝［肝Zn(mg)＋胫骨Zn(mg)＋翼羽Zn(mg)+血Zn(mg)＋鸡空体中 Zn(mg)］－［基础 ０对照鸡的肝＋胫骨＋血＋空体中Zn(mg)］ （4）食入锌沉积率（％）＝锌沉积量（mg）／食入总锌量（mg）?100 （5）锌的表观利用量（mg）＝食入锌量（mg）－排出锌量（mg） （6）锌的真利用量（mg）＝食入锌量（mg）－排出锌量（mg）＋内源锌量（mg） （7）锌的表观利用率（％）＝锌的表观利用量（mg）／食入总锌量（mg）?100 （8）锌的真利用率（％）＝锌的真利用量（mg）／食入总锌量（mg）?100 （9）TME法测锌利用率，即采用强饲方法准确喂给试鸡一定量的含锌日粮，完全收集 其32小时排泄物， 通过测排泄物中含锌量，据代谢平衡理论可算知锌的利用率。其 计算方法为公式5、6、7、8。 OD1－OD２ Ｖ1?Ｐ1 （10）血清碱性磷酸酶活性单位／100ml血清（鲍氏单位）＝ ? ?10OD V2 其中：OD1－欲测血清溶液的光密度；OD２－无机磷溶液的光密度；OD－磷标准液的光密度；V1－常数0.15ml，吸取磷标准液的体积；P1－0.1，１ml磷标 准液相当于0.1ml的无机磷；V２－0.15ml，吸取待测血清样品的体积。 1.5 统计分析方法 试验?采用二因子方差分析并多重比较；试验?采用单因子方差分析或T 检验。全部数据用PC－1500型袖珍计算机和IBM－PC电子计算机处理。 2 试验结果 2.1 不同锌化合物及不同锌添加水平的效应 2.1.1 生长性能 不同锌化合物对试鸡的采食量、增重、增重／耗料无显著影响。见表5。 注：横行比较，同行未标角码者、有相同角码者为差异不显著。 2.1.2 血液及组织中锌浓度 不同锌化合物在不同锌添加水平时与组织中锌浓度的关系见表7。随日粮中锌添加水平的增高，组织中锌浓度均呈上升的趋势。肝、胫骨、翼羽中锌浓度在 4个锌添加水平间均达显著水平。血液中锌浓度在添加0mg/kg和15mg/kg锌组 显著低于添加30和60mg/kg锌组（p<0.01）。见表8。 在同一锌添加水平时，不同锌化合物对血液、肝中的锌浓度无显著影响，对 胫骨、翼羽中锌浓度有显著影响。ZnSO4?7H2O组和ZnMet22+组间，ZnMet2组 和Zinpro100组间无显著差异，但ZnMet2组和Zinpro100组显著高于 ZnSO4?7H2O组和ZnMet22+组，3个锌添加水平时的综合结果见表9。 2.1.3 锌沉积总量和食入锌沉积率 不同锌化合物对食入锌量、锌沉积量、食入锌沉积率无显著影响，但 ZnSO4?7H2O组试鸡的体锌沉积量、食入锌沉积率均低于其它各螯合锌组，见表 10。 不同锌化合物在不同锌添加水平时的锌沉积量及食入锌沉积率有显著影响。 随日粮中锌添加水平的增加，机体锌沉积量显著升高，而食入锌沉积率却随雏鸡 采食锌水平的升高而显著下降。见表11。 表7 在不同锌添加水平时各锌源 与组织中锌浓度、整体锌沉积量、食入锌沉积率、AKP活性 ?SE N = 4 2.2 试?代谢试验结果 2.2.1 TME法测定硫酸锌和蛋氨酸螯合锌（?）内络盐中锌的利用率 由表14可见，在食入同样锌水平的情况下，12周龄公鸡排出总锌量差异较 大，从而导致锌的表观利用率相差悬殊，甚至出现负值。锌的真利用率受内源锌 测定收集方法的影响很大，以饥饿排空法和无锌日粮法所测得的内源锌排出量来 计算出的各锌源中锌真利用率在鸡个体间差异极大。而用各试鸡的自身内源锌排 出量来校正（本试验称此种收集内源锌方法为同鸡自身排空法）时，所得锌的真 利用率在试鸡个体间的差异仍较大，并无改善。 2.2.2 外插法在测定不同锌源中锌利用率上的应用 表14 TME法测硫酸锌和蛋氨酸螯合锌（?）内络盐中锌的利用率以及测定 内源锌排出量的方法不同对锌真利用率的影响 ?SE N=7 注：1) 基础日粮中锌的真利用率为20.04%；2) 强饲料中总锌水平为71.1mg/kg。基础日粮中锌占总锌量的比例为33.052%，外加锌占总锌量的比例 为66.948%。 注: 1) 基础日粮中锌的真利用率为20.04%；2) 强饲料中总锌水平为71.1mg/kg。基础日粮中锌占总锌量的比例为33.052%, 外加锌占总锌的比例为 66.948%。 据表15和图１可看出，试鸡在食入总锌量比较接近的情况下，排出总锌量 个体差异较大，依外插法得知ZnSO4的锌真利用率为37.01％，ZnMet2的锌真利 用率为99.07％。 3 讨论 3.1 生长性能 饲喂不同锌化合物，对滨白鸡公雏在11~24日龄期间内的采食量、体增重和 增重／耗料无显著影响。但硫酸锌组试鸡的采食量和体增重均比其它各组低，蛋 氨酸螯合锌内络盐组试鸡的体增重比硫酸锌组高5.66%，络阳离子组比硫酸锌组高6.99%，Zinpro100组比硫酸锌组高8.97％。而且硫酸锌组鸡的饲料效率（增 重／耗料）也均比其它3组低，以Zinpro100组最高。Hill等（1986）报道硫酸锌与蛋氨酸锌对猪鼠的生长影响无显著差异。然而Kincaid (1985)、Greene (1987) 和Waiber (1974) 分别用猪、牛、火鸡试验，结果表明蛋氨酸螯合锌的 增重效果和饲料效率都要比硫酸锌好。关于蛋氨酸螯合锌对雏鸡生长的影响，未 见前人公开报道，本试验表明3种形式的蛋氨酸螯合锌添加于饲粮中，雏鸡的生 长性能均表现出比硫酸锌组高的趋势，但统计差异不显著。Waiber (1974) 的以 火鸡试验表明蛋氨酸螯合锌显著好于硫酸锌。 日粮中锌添加水平对雏鸡生长性能的效应，除添加0mg/kg锌组试鸡的末重、体增重和采食量显著低于其它组外，添加15、30、60mg/kg锌各组间无显著差异，增重／耗料是添加0mg/kg锌组低于添加30和60mg/kg锌组，但差异不显著。说 明基础日粮（含锌23.5mg/kg）的低锌水平对饲料利用和生长有阻碍作用。杨琳 （1987）试验指出0~45日龄滨白雏鸡体增重受饲粮锌水平的影响，与本试验结 果一致。本试验表明，对于玉米－大豆分离蛋白型半纯合基础日粮锌添加水平为 15mg/kg时即可满足雏鸡为防止出现临床缺锌症状的需要，锌添加水平为 30mg/kg（总锌53.5mg/kg）以上就可达到本试验条件下的正常生长。而杨琳 （1987）、O'Dell等（1985）、Roberson和Schaible (1985)报导饲喂鸡大豆蛋白型日粮时，鸡对锌的总需要量为30~40mg/kg即可达到最大生长，比本试验建议值稍低，原因是他们使用纯合日粮，不含干扰锌利用的植酸盐、纤维类因素， 本试验采用的是半纯合日粮含少量干扰因素会影响锌的利用率，从而导致雏鸡对值得注意的是，本试验从侧面也支持了众多学者已经证明的采用植物性饲粮时鸡 锌的需要量增高。对锌的需要量增加。单安山（1988）建议采用玉米－豆饼型饲粮时，要使蛋鸡雏 发挥最大生长性能，锌的需要量是70mg/kg（即外加锌40mg/kg）。Tortuero和 Brennes (1976)、Roberson (1985)、Vohra和Kratzer (1976) 等均指出采用玉米－豆饼型全植物性饲料时动物对锌的需要量较高，Tortuero等认为要使鸡只发挥最大生长性能，鸡对日粮中锌需要量大于80mg/kg。显然这些建议值均高于 NRC标准和中国专业标准。 3.2 血液及组织中锌浓度 3.2.1 添加锌水平的影响 锌在血液和组织器官中的代谢动力学曲线表明，不同组织器官中锌的代谢强 度是不同的，有的很快（比如血浆、肝脏、胰脏），有的很慢（比如肌肉），因 而它们受饲粮中锌水平的影响也就差异很大。代谢快的组织受饲粮中锌水平的影 响就比较明显，代谢慢的组织就不明显。从沉积效应来看，代谢快的组织中沉积 锌量较少，代谢慢的组织沉积锌相对就较多，这反映了不同组织器官对锌的贮存 和利用特点以及机体对吸收锌再分配的调节机制。在锌营养的早期研究中，人们 以生长指标判断利用的标准。前人大量研究表明，肝脏、胫骨、肾脏中锌含量能 很好地反映饲粮中锌水平的高低。从本试验结果可以看出，随日粮中锌水平的升 高，组织中（血液、肝脏、胫骨、翼羽）锌浓度均有不同程度的升高。据表８的 显著性分析，血液中锌浓度受日粮锌水平影响的变化幅度较小，说明血液中锌浓 度在较长期的饲养过程中相对比较稳定，对日粮中锌水平变化的反应就不太敏 感，而胫骨、翼羽、肝脏中锌浓度随日粮锌水平的变化而变化的幅度较大，最能 敏感地反映进食锌水平的高低。利用一元线性回归分析，得到肝脏、绝干胫骨、 风干翼羽、血中锌浓度（Y：μg／g组织）与进食锌量（X：μg）之间的关系为： 血液：Y=21.88+4.42?10-4X (r=0.36* RSD=?10.85 N=52) 肝脏：Y=10.88+1.47?10-3X (r=0.61 * * RSD=?13.17 N=52) 绝干胫骨：Y=65.08+3.91?10-3X (r=0.63 * * RSD=?29.38 N=52) 风干翼羽： Y=37.44+3.95?10-3X (r=0.76 * * RSD=?25.12 N=52) 说明组织中锌浓度与进食锌量间的相关性极强，为强正相关。而且从回归方 程式的斜率来比较，各组织中锌浓度对进食锌量变化的敏感强度依次为：翼羽>胫骨>肝脏>血液。翼羽和胫骨中锌浓度最能反映进食锌量的变化，这与表８的分 析结果是一致的。Eltohamy (1979) 报道白来航公鸡在0~50日龄阶段，肝、胰、肾中锌浓度与饲粮锌水平呈正相关。Dewar等 (1984) 报道8~21日龄期间的肉鸡和火鸡，其肝脏、脱脂胫骨、血浆中锌浓度随饲粮锌水平的升高而显著升高。 王引 (1987) 亦得出同样结论。周明（1987）试验证明血清锌水平可作为鸡体锌 营养状态的标识。Bettger等(1981)亦提出相似论点。本试验表明翼羽锌浓度与 饲粮锌水平的相关性很高，只要注意翼羽取样部位和清洁处理，可以用翼羽锌浓 度 作为评价鸡体锌营养状况的活体诊断指标。 3.2.2 添加不同锌化合物的效应 本试验中，不同锌化合物对胫骨和翼羽中锌浓度有显著影响。若以ZnSO4组试鸡的胫骨锌浓度为100％，则ZnMet2为123％，ZnMet22+为109％，Zinpro100为134％。以胫骨中锌浓度为标准，得到4种锌化合物的生物利用效率依次为 Zinpro100>ZnMet2> ZnMet22+>ZnSO4，以翼羽中锌浓度为标准也有同样的规律， 说明4种锌化合物中锌在鸡体内的利用率是不同的，这从组织锌浓度指标也证实 了前面所述生长性状的结果。Горобец (1986) 以肉仔鸡肝脏、胫骨、翼 羽中锌浓度为指标，均表明氨基酸锌螯合物的利用率好于硫酸锌。Henry和Ammerman (1989) 以肉仔鸡胫骨和肾中锰浓度为判断指标时，也指出蛋氨酸锰中 锰的利用率高于硫酸锰。Hill等 (1986) 以生长指标表明蛋氨酸锌和硫酸锌对 猪具有相似的生物学价值。可能是以生长性能作为判断锌利用率的指标会降低检 验的灵敏度所致。 本试验证明，可用翼羽、胫骨中锌浓度作为评价雏鸡锌营养状况的敏感指标。 但Mills (1987) 认为用常规分析组织中锌浓度的方法难以判定鸡早期锌缺乏， 目前认为判定锌营养状况的敏感指标是机体中金属硫因的含量，有关金属硫因含 量这一生化指标能否作为判断锌营养状况的灵敏指标尚需进一步研究。 3.2.3 锌沉积量和食入锌沉积率 随雏鸡采食锌水平的增加，雏鸡体内锌沉积量显著升高，而食入锌沉积率却 随日粮锌水平的升高而显著下降 (P<0.01)。据一元线性回归分析，锌沉积量(Y： μg)和食入锌沉积率（Y：％）与食入锌总量（Ｘ：μg）的关系为： 锌沉积量： Y=1961.27+0.08X (r=0.53* * N=52) 食入锌沉积率：Y=33.78-6.93?10-4X (r=-0.65* * N=52) 它们之间的关系见图2和图3。 微量元素的这种沉积量随饲粮中锌水平的升高而增加，而沉积率却随日粮锌 水平的升高而降低的规律，已被众多学者研究所证实，已经得到定论。锌的沉积 量和食入锌沉积率2项指标在4种锌化合物间差异不显著。但从总体平均数来看， 以ZnSO4组食入锌沉积率为100％时，ZnMet2为106％，ZnMet22+为100％，Zinpro100为112％。与以胫骨和翼羽中锌浓度为判断指标时所得到的4种锌化合物的利用效率一致，即Zinpro100>ZnMet2>ZnMet22+>ZnSO4，直接地表明了胫 骨和翼羽中锌浓度可以代表鸡整体中锌的沉积利用情况。 3.2.4 血液生化指标－血清碱性磷酸酶 (AKP) 活性血清AKP活性随食入锌量升高而显著增加，AKP活性 (Y：鲍氏单位) 和食入总锌量（Ｘ：μg）的回归 关系为：Ｙ＝5.92+4.18?10-4X (r=0.76** RSD=?3.75 N=36)，而组织中锌浓 血液：Y=18.70+0.74X (r=0.41* RSD=?9.19 N=36) 度（Ｙ：μg／g组织）和AKP活性（Ｘ：鲍氏单位）的回归关系为： 肝脏：Y=2.07+2.49X (r=0.59* * RSD=?14.53 N=36) 绝干胫骨：Y=35.81+6.99X (r=0.69* * RSD=?13.34 N=36) 风干翼羽： Y=21.61+6.24X (r=0.68* * RSD=?19.56 N=36) 据此看出血清AKP活性和食入锌量、组织锌浓度之间存在着显著的正相关。 试鸡食入总锌量发生变化时，血清AKP活性就随之发生变化，血液、肝脏、胫骨、 翼羽中锌浓度也随之而变，从直线方程的斜率来看，依AKP活性的变化组织中锌 浓度发生相应变化的敏感器官依次为胫骨>翼羽>肝脏>血液。即胫骨、翼羽中锌 浓度同血清AKP活性相关最强。从而进一步证明了前述的胫骨、翼羽中锌浓度为 判断锌营养状况的敏感指标的论述。而且从相关性看出，可以采用血清AKP活性作为评价雏鸡锌营养状况的活体生化指标。单安山（1988）试验也表明，血清 AKP活性在蛋鸡的各个发育时期都随饲粮锌水平的升高而显著增加，而且与肝 脏、胫骨、胰脏中锌浓度的升高具有一致性。Berzin（1986）以肉仔鸡试验表明 血清AKP活性与肝脏中锌浓度（r=0.87, P<0.05）和胫骨中锌浓度（r=0.72, P<0.05）之间呈显著的直线正相关。本试验中血清AKP活性与肝脏、胫骨、翼羽 中锌浓度的相关性也都极显著，因此可以选择血清AKP活性作为检测鸡体锌营养 状况的活体生化指标。 不同锌化合物对血清AKP活性的影响差异显著。ZnMet2和Zinpro100组显著高于ZnSO4 组，也就是试鸡即使摄入相同水平的4种锌化合物，血清中AKP的活性却不同。以血清中AKP活性为判据，得到四种锌化合物的利用效率高低顺 序与以胫骨和翼羽中锌浓度为标准而得到的4种锌化合物的利用效率一致。 Горобец（1986）也证明饲喂氨基酸螯合锌的肉仔鸡血清中AKP活性显著高于硫酸锌组。前人众多体外模拟试验和饲养屠宰试验证明日粮中添加蛋氨酸、 半胱氨酸等氨基酸和蛋白质有利于动物肠粘膜对锌的吸收，可为上述结果作出理 论解释。 3.2.5 TME 法测定硫酸锌和蛋氨酸螯合锌内络盐中锌利用率的研究 本试验是选用体重比较接近、健康的12周龄公鸡作为试验动物，采用试料 压锭后1次强饲。试鸡进食料量无个体间差异，但风干排泄物含锌和排泄物总锌 量在试鸡个体间的差异却很大，从而导致每种锌化合物在鸡个体间的表观利用率 相差悬殊。ZnSO4组锌的表观利用率在-81.85％~47.82％之间，ZnMet2组在-43.52％~79.40％之间变动。造成这种情况的主要原因就是内源锌排出量的个体 差异较大所致。为考察试鸡个体间内源锌排出量的差异，收集完试鸡的排泄物后， 接着收集各试鸡自身的内源排泄物，用此同鸡自身内源锌量来计算锌的真利用 率，结果ZnSO4中锌真利用率为20.03％，ZnMet2为37.38％，所计算出的锌真利用率在鸡个体间差异仍然很大。而用饥饿排空法和无锌日粮法所测的内源锌量 来计算出的锌真利用率相应为ZnSO4 26.33％，ZnMet2 63.33％和ZnSO4 48.84％，ZnMet2为86.77％，也不能改善这种情况，并且3种测定内源锌参数的方法间的 锌真利用率波动也较大。可见，测定锌真利用率时，因所用内源锌参数不同，会 导致测算值相差甚远。由此可知，短期快速的TME法用于研究微量元素等物质的 代谢平衡试验具有很大局限性，杨琳 (1987) 也指出了这点。 3.2.6 数学外插法用于测定锌利用率的探讨数学外插法用于鸡饲料代谢能 的测定已被证明是可行的。而此法用于测定微量元素利用率，本试验证明有很大 局限性。因为即使用强饲法使鸡进食锌量一致，排泄物中排出总锌量却不规律， 本试验外插得ZnSO4的锌真利用率为37.01％，ZnMet2为99.07％。这种用锌源梯度水平不同按数学外插法测算出的锌真利用率，同TME 法一样，受内源锌排 出量等参数的影响而变异较大，所得数据也只能作为参考。 4 结论 （1）随雏鸡采食锌量的增加，雏鸡体内锌沉积量显著增大，而食入锌沉积 率却明显降低。 （2）日粮中锌水平对雏鸡采食量、体增重有显著影响。对于玉米－大豆分 离蛋白型半纯合日粮（含锌23.5mg/kg）外加锌30mg/kg (总Zn53.5mg/kg ) 以 上可满足雏鸡在本试验条件下的正常生长。 （3）血液、肝脏、胫骨、翼羽中锌浓度，血清碱性磷酸酶活性均随采食锌 量的升高而增加，并呈强正相关。因此，在育雏期，只要慎重处理、严格控制污 染，可以用翼羽中锌浓度作为评价雏鸡锌营养状况的活体检测指标，也可用血清 碱性磷酸酶活性作为此项评价的生化指标。 （4）硫酸锌、蛋氨酸螯合锌（?）内络盐和络阳离子、Zinpro100添加于饲粮中，未导致雏鸡生长、血液和肝中锌浓度、锌沉积量、食入锌沉积率的显著 差异，但所有这些指标均表现出ZnMet2 和Zinpro100优于ZnMet22+和ZnSO4 的趋势。以胫骨和翼羽中锌浓度、食入锌沉积率为判断指标时，则4种锌化合物的 利用效率高低顺序依次为Zinpro100> ZnMet2>ZnMet22+>ZnSO4。 （5）本试验测得玉米－大豆分离蛋白型半纯合日粮中锌的真利用率为 （6）TME法和数学外插法用于微量元素锌的代谢试验具有很大局限性。主 要是内源锌排出量参数的测定方法不同，会导致锌真利用率的测算值相差甚远， 20.40％。本试验用此两种方法所测得各锌源中锌真利用率的数据也只能作为参考。短期快 速的TME法用于元素利用率的研究是不可取的。但在鸡对锌源的利用方面，蛋氨 酸螯合锌明显优于硫酸锌这一点是可以肯定的。