血清总胆固醇、甘油三酯与高密度脂蛋白胆固醇比值同高密度脂蛋白亚类组成关系的研究

血清总胆固醇、甘油三酯与高密度脂蛋白胆固醇比值同高密度脂蛋白亚类组成关系的研究 血清总胆固醇、甘油三酯与高密度脂蛋白胆固醇比值同高密度脂蛋白亚类组成关系的 研究 中国病理生理杂志ChineseJournalofPathophysiology2006,22(1):75二 [文章编号]1000—4718{2006)01—0075—05 ? 75? 血清总胆固醇,甘油三酯与高密度脂蛋白胆固醇比值 同高密度脂蛋白亚类组成关系的研究* 贾连群,勾蓝图,傅明德,徐燕华,杨鲁川 (四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室,四川成都610041; 华神集团博士后研究工作站,四川成都610000) [摘要]目的:探讨血清总胆固醇/高密度脂蛋白胆固醇(1?/HDL—c),甘油三酯/高密度脂蛋白胆固醇(TG/ HDL—C)比值与高密度脂蛋白(HDL)亚类组成及含量关系.方法:采用双向电泳一免疫印迹法分析了292例受 试者血清HDL亚类的组成及含量.结果:随血清TC/HDL—C比值增大,prel31一HDL,HDL3含量升高,HDL2b,HDL2含 量降低.prel31一HDL(P<0.01,高比值组及中间组),I4DL~(P<0.05,高比值组)含量显着高于低比值组,而HDL2b(P <0.01,高比值组及中间组),HD(P<0.01,高比值组)含量显着低于低比值组;此外,高比值组prel3l—HDL,HDL3 含量显着高于中间组(P<0.01,P<0.05),而HDL2,HDL2b含量显着低于中间组(P<0.01,P<0.01).随血清riG/ HDL—C比值增大,p邶l—HDL,HDL3含量升高,HDL2b,HDL2含量降低.preL3l —HDL,HDL3(P<0.01,P<0.05,高比 值组)含量显着高于低比值组,而HDL2?HDI(P<0.01,P<0.01,高比值组及中 间组)含量显着低于低比值组;此 外,高比值组prel3l—HDL,HDL3含量显着高于中间组(P<0.01,P<0.05),而 HDL2HDL2b含量显着低于中间组(P< 0.01,P<0.01).相关分析发现,血清TC,rlG,TC/HDL—C,TG/HDL—C与小颗粒一 HDL含量呈显着正相关(P< 0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01),与大颗粒HDL2b含量呈显着负相关 (P<0.05,P<0.01,P<0.01,P<0.01);HDL — C与小颗粒prel3l—HDL含量呈显着负相关(P<0.05),与大颗粒HDL2b含量呈 显着正相关(P<0.01).结论:血清 TC/HDL—C>5或TG/HDL—C>2.2时,小颗粒HDL含量明显增加而大颗粒 HDL含量明显减少,表明HDL成熟代谢 过程受阻,胆固醇逆向转运作用减弱. [关键词]胆固醇;甘油三酯类;脂蛋白类,HDL [中图分类号]R344.6[文献标识码]A RelationshipbetweenHDLsubclassesandTC/HDL—C.TG/HDL一.Cratio JLian—qun,G0ULan—tu,FUMing—de,XUYan—hua2,YANGLu—chuan (BiochemistryandMo~cularBiologyl~boratory,WestChinaSchoolofPreclinicalandFore nsicMedicine,SwhuanUniversity, Chengdu610041.China;HoistGroupPostdoctoralWorkStation,Chengdu610000,Ch/na) [ABSTRACT]AIM:TostudytherelationshipbetweenHDLsubclassesandTC/HDL— C,TG/HDL—Cratioinserum. METHODS:Apolipoprotein(apo)A— IcontentsofserumHDLsubclassesin292subjectsweredeterminedbytwo—dimensional gelelectrophoresisassociatedwithimmunodectionme~od.RESUL'IS:Comparedwithlow TC/HDL—Cratiosubgroup,apoA—I contentsofp郫1一 HDL(P<0.01,inmid&eorhighsubgroup)andHDL3(P<0.05,inhighsubgroup) weresignificantlyhigh? er,butthoseofHDL2t,(P<0.01,inmid&eorhighsubgroup)andHDL2a(P<0.01,inhighsubgroup)weresignificantlylower. Comparedwithmid&eTC/HDL—Cratiosubgroup,apoA—Icontentsofpr邙1一 HDL,HDL3weresignificantlyhigher(P' 0.01,P<0.05),butthoseofrtDI~andHDL2bweresignificantlylower(P<0.01,P<0.01)inhighsubgroup.comdwith lowTG/HDL—Cratiosubgroup,apoA—Icontentsofpr邙1一 HDL,HDL3weresignificantlyhigher(P<0.01,P<0.05,in highsubgroup),butthoseofHDL2andHDL2bweresignificantlylower(P<0.01,inmid&eorhighsubgroup).Compwith mid&eTG/HDL—Cratiosubgroup,apoA—Icontentsofpr邙1一 HDL,HDL3weresignificantlyhigher(P<0.01,P<0.05), butthoseofHDL2andHDL2bweresignificantlylower(P<0.01).Inaddition,TC,TG,TC/HDL—CratioandTG/HDL—Cra- tioshowedapositivecorrelationwithapoA—Icontentsofsmall—sizedpret31一 HDLandanegativecorrelationwiththoseoflarge — sizedHDL2h,butitwasreversedforHDL—C.CONCLUSION:WhenTC/HDL— C>5orTG/HDL—C>2.2inserunl,the [收稿日期]2004—06—02[修回日期]2004—07—13 *[基金项目]纽约中华医学基金资助(No.CMB82—412) ?通讯作者E—mail:fumd@wcuins.edu.cn particlesizeofHDLshinedtowardssmallersizes.whichindicatesthatl~vei'fiecholesteroltransportmightbeweakenedandHDL maturationml'ghtbeabnorma1. ? [1=Yw0RDs]Cholesterol;Tfiglycefides;Lipoproteins,HDL 高密度脂蛋白(highdensitylipoprotein,}?)L)是颗 粒大小,密度,组成及功能极不均一的一类脂蛋白, 可分为前pl—HDL,前一HDL,nDL3c,HDL3b, HDL3HDL2.,HDL2b等亚类,通过前B—HDL—HDL3 一HD的递变代谢过程而逐渐成熟.HDL亚类的 代谢紊乱可导致细胞胆固醇流出,酯化,转运及清除 障碍,促使动脉粥样硬化(atheroselerosis,AS)和冠心 病(coronaryheartdisease,CHD)的发生【1j.近年发现 血清总胆固醇/高密度脂蛋白胆固醇(TC/HDL—C), 甘油~fll/高密度脂蛋白胆固醇(TG/HDL—C)比值 与AS和CHD高度相关【2,3J,但是不同血清TC/HDL — C,TG/HDL—C比值对HDL亚类组成及含量影响 的研究尚未见报道.本研究对成都地区292例受试 者,按血清TC/HDL—C,TG/HDL—C比值分别分为 低,中,高3组,分析血清TC/HDL—C,TG/HDL—C 比值与HDL亚类组成之间的内在联系和变化规律, 为阐明HDL亚类组成与AS发生机制提供重要依据. 材料和方法 1对象 所有对象均为我室作血脂及载脂蛋白含量测试 的本校及四川师范大学的教职工.受试者血清样品 以2001年5月美国国家胆固醇教育(NCEP)成 人治疗专家组(ATP)颁布的第3版文件(ATP一?)为 【,按血清TC/HDL—C,TG/HDL—C比值进行 分层. 血清TC/HDL—C:低比值组(rrC/HDL—C?3.3) 42例,中间组(3.3<TC/HDL—C?5)133例,高比值 组(TC/HDL—C>5)117例. 血清TG/HDL—C:低比值组(HDL—C?1.1) 102例,中间组(1.1<TG/HDL—C?2.2)81例,高比 值组(TG/HDL—C>2.2)109例. 2方法 2.1血清样品全部受试者空腹l2—14h,取血, 分离血清,并将血清样品分为两份,1份用于血脂及 载脂蛋白含量的测定,另1份一70?冻存,用于HDL 亚类的检测. 2.2血脂及载脂蛋白含量的测定血清甘油三酯 (TG),总胆固醇(TC),HDL—C以及血清TG?4.52 mmol/L受试者的低密度脂蛋白胆固醇(LDL—C)含 量采用酶法试剂盒(北京中生生物工程高技术公司) 测定;血清LDL—C含量按Friedewald公式计算(TG <4.52mmol/L者)[;血清载脂蛋白(apo)AI, B100,CII,C?及E含量均采用本室研制的单向免疫 扩散试剂盒测定. 2.3HDL亚类免疫印迹试验按本室建立的人血 清HDL亚类免疫印迹检测法进行测定_6_6. 3统计学处理 用软件SPSS进行统计学处理,数据用均数-I-标 准差(牙?s)表示.用方差分析(ANOVA)检验3组间 总差异的显着性,两组间差异比较采用口检验. 结果 1受试人群按血清TC/?)L—C及TG/?)L—C 比值分层的血脂及载脂蛋白含量 由表1可见,随血清TC/HDL—C或TG/HDL—C 比值增大,BMI,TG,LDL—C,TC/HDL—C,TG/HDL— C,apoBl00,apoC?,apoC?,apoE水平均显着升高. 相反,HDL—C,apoAI水平均显着降低.1?水平虽 然随TC/HDL—C比值增大而显着升高,但不随TG/ HDL—C比值增大而有明显变化. 2受试人群按血清TC/?)L—C及TG/HDL—C 比值分层的HDL亚类含量 由表2可见,随血清TC/HDL—C比值增大,pl — HDL,HDL3含量升高,HDL2b,HDL2.含量降低. prepl一}{I)L(高比值组及中间组),I-IDL3.(高比值组) 含量显着高于低比值组,而HDL2b(高比值组及中间 组),HDL2(高比值组)含量显着低于低比值组;此 外,高比值组pl—HDL,HDL3.含量显着高于中间 组,而HDL2,HDL2b含量显着低于中间组. 随血清TG/HDL—C比值增大,pl—HDL, HDL3含量升高,HDL2b,HDL2.含量降低.p邸l— HDL,HDL3.(高比值组)含量显着高于低比值组,而 HDL2b,HDL2.(高比值组及中间组)含量显着低于低 比值组;此外,高比值组pl—HDL,HDL3.含量显着 高于中间组,而HDL2}玎)含量显着低于中间组. 3受试人群血脂,TC/HDL—C及TG/HDL—C比 值与血清HDL亚类含量的相关性 由表3可见,TC,TG,TC/HDL—C,TG/HDL—C 与pl—HDL含量呈显着正相关,与HDL2b,HDL2.含 量呈显着负相关(TC与HDL2.除外);相反,HDL—C 与pl—HDL含量呈显着负相关,与HDL2b,}玎)含 表1受试人群按血清TC/HDL—C和TG/HDL—C比值分层的血脂及载脂蛋白含 量 ? 77? Tab1ContentsofserunllipidsandapolipoproteinsaccordingtoserumTC/HDL—CandTG/HDL—Cratioinsubjects(贾?s) P<O.05,"P<O.O1lowsunupwithinthesamegoup;P<O.05,?P<O.O1middlesubg~withinthesaITIe脚 表2受试人群按血清TC/HDL—C和TG/HDL—C比值分层的HDL亚类含量 Tab2Theapolipoprotein(apo)A—Ic.ntents.fHDLsubelassesaccordingtoserunlTC/HDL —CandTG/HDL—Cmti.insubjects (元?s) P<O.05,"P<O.O1lowsubgroupwithinthesafTle刚p;P<O. 05,?P<O.O1middlesubg~withinthesaITIe脚 表3受试人群血脂,TC/~L—C及TG/?)L—C比值与血清HDL亚类含量的相关性分析 P<0.05.P<0.01. ? 78? 量呈显着正相关. 讨论 ATP一?文件是2001年5月由美国国家胆固醇 教育计划(NcEP)成人治疗专家组(ATP)根据大量的 流行病学调查并结合临床资料分析,所制订的一套 旨在防治As性心血管疾病的建设性和. NCEP—ATP?把血清TC划分为合适水平(<5.17 mmol/L),临界水平(5.17—6.21mmol/L),高水平(? 6.21retool/L)3组,把血清TG划分为合适水平(< 1.69mmol/L),临界水平(1.69—2.27retool/L),高水 平(2.27—5.65mmol/L),极高水平(?5.65retool/L)4 组,把血清HDL—C划分为低水平(<1.03mmol/L) 和高水平(?1.55mmol/L)两组4』.本研究中我们以 合适TC与高HDL—C的比值(?3.3)确定为TC/ HDL—C低比值组;鉴于近来国内外许多研究资料证 实TC/HDL—C>5时,AS及CHD的发病风险显着升 高【,因此我们把TC/HDL—C>5确定为高比值组; 二者之间为中间组(3.3<TC/HDL—C?5).在确定 TG/HDL—C的分组时,我们以合适TG与高HDL—C 的比值(?1.1)以及高TG与低HDL—C的比值(> 2.2)分别作为TG/HDL—C低,高比值组,这种分组 方式与近年TG/HDL—C比值与CHD发病关系的研 究结果十分一致_8j. 血清TC/HDL—C和TG/HDL—C比值与HDL亚 类组成关系的结果发现,随TC/HDL—C和TG/HDL — C比值增大,小颗粒的pl—HDL,HDL3.含量逐渐 增加,而大颗粒的nDb2,HDb2b含量逐渐减少,表明 HDL成熟代谢过程受阻.HDL亚类出现的这些变化 可能与血清中调节脂质代谢的酶有关.本研究发 现,apoA工含量随TC/HDL—C和TG/HDL—C比值 增大而明显减少,而apoA工是卵磷脂一胆固醇脂酰 转移酶(LCAT)的激活剂,LCAT的主要作用是催化 HDL的游离胆固醇酯化,使HDL经p一HDL— HDL3一HD的递变代谢过程而逐渐成熟,LCAT活 性降低,必将导致小颗粒的pret3l—HDL,HOL3.含量 明显增加,大颗粒的HDb2含量明显减少_9j.此外, TC和TG随TC/HDL—C比值增大而明显升高,TG随 TG/HDL—C比值增大也明显升高.Lee等_loj研究发 现,当血清TC,TG水平升高时,胆固醇酯转运蛋白 (CETP)的活性明显加强.由于CETP可将HDb2中 的CE转移至乳糜微粒(CM),极低密度脂蛋白 (VLDL)和低密度脂蛋白(LDL),并将VLDL和LDL 中的甘油三酯(To)转运至HD,与此同时HDL2中 的TG被肝脂酶(HL)和内皮细胞脂酶(EL)水解并释 放出apoA工和磷脂,HDL便由大颗粒的HDb2转变为 颗粒较小的ImL3,造成HDb2含量减少,而HDL3则 堆积.从HDb2释放出的apoA工,磷脂与血浆中的游 离胆固醇结合而形成新生的pl—HDL,因此pl — HDL的含量也有所增加_l... 对于血清TC/HDL—C和TG/HDL—C高比值人 群,其HDL亚类的分布特点是小颗粒HDL亚类明显 增多,而大颗粒HDL亚类明显减少,表明前口一HDL —HD—HD的成熟代谢过程受阻,这就必将造成 HDL胆固醇逆向转运作用的减弱,血管内皮细胞过 剩胆固醇堆积,加速泡沫细胞的形成,最终导致AS 性心血管疾病的发病风险增大.在按血清TG/HDL — C分层时,我们发现,随TG/HDL—C比值增大,虽 然受试者TC水平没有明显改变,但小颗粒HDL含量 增加及大颗粒HDL含量减少趋势已经显现,这表明 血清TG升高的受试者,尽管其TC水平可能正常,但 HDL亚类成熟代谢已表现出很明显的障碍,Rcr作 用已经减弱. 此外,HDL亚类与血脂含量相关性分析的结果 表明,小颗粒的pl—HDL和大颗粒的HDL2b与血 清TC,TG,HDL—C,TC/HDL—C,TG/HDL—C均显示 出较明显的相关性(P<0.O1或P<0.05),表明 pl—HDL和HDb2b是受血脂影响较为敏感的两个 亚类,这也进一步印证了Atger把p邮l—HDL,HDL2b 含量变化作为As早期危险因素的结论_l2j. 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