[doc] 脂必妥胶囊的质量标准研究

[doc] 脂必妥胶囊的质量研究 脂必妥胶囊的质量标准研究 四JIl医学20(Yo年5】第27巷(第5期)S~huan,MedicalJour,ml,2006.;o1.27.No5?45I? 脂必妥胶囊的质量标准研究 王野,高向军 (四川I省药品检验所,四川I成都610036) 【摘要】目的建立脂必妥胶囊的质量标准.方法采用TLC和HPLC.结果TLC鉴别脂必妥胶囊中的红曲; HPLC测定洛伐他汀的含量,洛伐他汀在0.14,2.28g范围内.线性关系良好(r=0.9998).平均回收率为100.4%.RSD =0,76%.结论薄层鉴别重复性好,专属性强,含量测定方法专属,简便,准确. 【关键词】脂必妥胶囊;薄层色谱法;高效液相色谱法;洛伐他汀 【中图分类号】R927.1【文献标识码】A【文章编号】1004.0501(20o6)05-0451-02 脂必妥胶囊在《国家中成药标准汇编?内科心系分 册》第138页脂必妥片质量标准(中华人民共和国国家 药品监督管理局标准(试行)WS一11524(ZD.1524).2002) 基础上,改剂制成胶囊剂,具有活血化瘀,健脾消食功 效.用于高脂血症,动脉粥样硬化及由此引起的头晕, 头痛,胸痛,肢体麻木,舌质紫暗或有斑点等症.在本 次研究过程中,对红曲中含有的洛伐他汀,油酸进行了 薄层色谱鉴别,对其中主要活性成分洛伐他汀进行了 含量测定及相关方法学研究,质量标准可控性强.同 时分别按处方,制法制备药味的阴性对照,结果阴性无 干扰. 1材料和方法 1.1材料:实验中所用对照品洛伐他汀,油酸均来源 于中国药品生物制品检定所.试剂均为分析纯.脂必 妥胶囊样品批号为050601,050602,050603. 1.2方法 1.2.1薄层鉴别方法.2]:?洛伐他汀:洛伐他汀是红 曲中主要的降脂活性成分,取本品约0.5g,研细,加 75%乙醇3ml,超声处理20rain,离心,取上清液作为供 试品溶液.另取洛伐他汀对照品加甲醇制成ln~ml 的对照品溶液.吸取上述两种溶液各4扯l,分别点于同 a一氰基丙稀酸酯医用胶用于粘合兔面神经而未有神经 坏死和面部行为异常.医用生物蛋白胶则未见有损伤 的报道,可用于神经吻合口.在本研究中a.氰基丙稀 酸酯医用胶涂抹于大鼠坐骨神经后,观察到机械触诱 发痛和温度触诱发痛阈值降低.推测a.氰基丙稀酸酯 医用胶涂抹于坐骨神经后,使部分神经纤维损伤,激活 Schwann细胞,肥大细胞,巨嗜细胞,释放TNFa,NGF, IL.1口等炎症介质,残余完好的神经纤维在炎症细胞和 介质的浸泡下发生一系列改变,C纤维中的P物质增 加,P物质可致痛;NGF调控对热伤害感受器和耐河豚 毒素钠通道的表达,NGF升高使热伤害感受器耐河豚 毒素钠通道增多,导致疼痛阈值降低,TNFa和IL—l8也 参与疼痛的过程,使残余正常的神经纤维对疼痛敏化; 外周神经损伤的炎症可刺激脊髓后角神经元释放兴奋 性氨基酸,P物质,前列腺素,磷酸化NMDA受体,使脊 髓后角发生可塑性变化,产生慢性疼痛J.a.氰基丙 稀酸酯医用胶作为外源性物质可使T淋巴细胞,肥大 细胞,巨嗜细胞等聚集,G.MoalemIsJ等证明T淋巴细胞 参与神经病理性疼痛的过程.故在本试验,术后1— 21d,观察到a.氰基丙稀酸酯医用胶组大鼠的机械触诱 发痛和温度触诱发痛阈值降低.医用生物蛋白胶为生 物制品,对神经无损伤,未观察到类似现象.我们认为 对于神经纤维丰富的创面和神经吻合口,应使用医用 生物蛋白胶,慎用a.氰基丙稀酸酯医用胶. 表23组大鼠术前及术后不同时点术侧机械触 诱发痛的比较(g.n=10..4-$) 组别术前——————— l357 Agl B组446. . 2 4 Cgl454. . 2 l 注:与术前比较,?P(0.05,与c组比较,?P(0.05 参考文献: [1]TomDowdall.I?Robinson,TheoFMeert.Comparisonoffivedifferentrat modelsofperipheralnerveinjury[J].Pharmacology.BiochemistryandBe. havior,2005.8O:93,108 [2]StephenBMeMahon.WilliamBJCafferty,FabienMarehand.Immuneand 湖cellfactorsa,9painmediatorsandmodulators[J].ExperimentalNeu. rology,2005,192:444,462 【3]GMoalem,KXu.LYu.Tlymphocytesplaysaroleinneuropathienfol? lowingperipheralnerveinjuryinrats[J].Neuroscience,2004,129:767, 777 (收稿日期:2006-03.16) 2?5?5 ?0??? ?65 勰潍”弧54 ?0?? 66 ?0?? 76 m75 扯? ?63 ? 452?U川}2006年5』J第27巷(第5 期)Sichltan’l~edicalJourna1.2006,tol27,No.5 一 硅胶G薄层板上,以氯仿一丙酮(5:1)为展开剂,展 开,取出,晾干,喷以5%香草醛硫酸溶液,在105oC烘 至斑点显色清晰.?油酸:红曲中主要含有21种脂肪 酸,在脂肪酸中以Cl8油酸,亚油酸,亚麻酸为绝对多 量,取本品1.0g,加乙酸乙酯5ml,超声处理20min,滤 过,取续滤液作为供试品溶液,另取油酸对照品加甲醇 制成2mg/ml的对照品溶液.吸取上述两种溶液各 4l,分别点于同一硅胶G薄层板上,以苯一甲醇冰醋 酸(9:0.8:0.8)为展开剂,展开,取出,晾干,置碘蒸气 熏至斑点显色清晰. 1.2.2含量测定方法 1.2.2.1仪器:ShimadzuLC一10ATvp;SPD一10Avp紫外 可见检测器;N2010色谱工作站. 1.2.2.2色谱条件l0l4J:Shim.packvp.ODS(4.6× 150mm,5,serialNo.2062092);流动相为乙腈一甲醇一 0.1%磷酸溶液(60:5:35);检测波长为238nm.柱温: 35?;流速:1.0ml/min. 1.2.2.3对照品溶液及标准曲线的制备:精密称取洛 伐他汀对照品适量,用75%乙醇分别配制成0.01425, 0.0285,0.057,0.114,0.228mg/~的对照品溶液.精密 量取上述对照品溶液各l0l,按1.2.2.2的色谱条件 测定.以对照品的进样浓度为横坐标,以对应进样量 的峰面积为纵坐标,得出峰面积与进样量的线性回归 关系,回归方程为Area=2.7766×l0s×Amount+ 9.6044×10,r=0.9998.结果洛伐他汀进样量在 0.14,2.28vg范围内与峰面积呈很好的线性关系. 1.2.2.4精密度试验:精密吸取对照品溶液(57t,g/ m1)10td,按1.2.2.2的色谱条件测定,连续进样5次, 峰面积积分值的RSD=0.38%. 1.2.2.5重复性试验:取同一批号样品6份,按样品 测定项下的方法制备供试品溶液,按1.2.2.2的色谱 条件测定,RSD=1.71%. 1.2.2.6加样回收试验:精密量取已知含量的样品6 份,各5ml,精密加入一定量的对照品,按样品测定项 下的方法制备供试品溶液,按1.2.2.2的色谱条件测 定. 1.2.2.7样品测定:取本品20粒内容物,精密称定, 研细,取0.45g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入 75%乙醇50ml,密塞,称定重量,超声处理30min(功率 250W,频率50kHz),放冷,再称定重量,用70%乙醇补 足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,作为供试品溶 液.按1.2.2.2的色谱条件测定. 2结果 2.1薄层鉴别:供试品色谱中,在与洛伐他汀对照品 色谱相应的位置上,显相同的紫红色斑点;在与油酸对 注:1对照品;2.样品;3.空白对照 2.2含量测定:洛伐他汀含量测定方法的平均回收率 为100.4%,RSD=0.76%.三批样品的含量测定结果 分别为1.97ms/粒,2.02mg/粒,2.16ms/粒. 3讨论 3.1脂必妥胶囊由单味药红曲制成,洛伐他汀为红曲 中的降脂活性成分,此外,红曲中主要含有21种脂肪 酸,其中C14,C16,C18,C20脂肪酸占总脂肪酸97%以 上,不饱和脂肪酸占64%,77%,多烯不饱和脂肪酸 占16%,27%,各地红曲中脂肪酸组成较一致.在脂 肪酸中以C18油酸,亚油酸,亚麻酸为绝对多量.因 此,此次研究选用洛伐他汀及C18的油酸为对照,用薄 层色谱法鉴别了红曲中洛伐他汀及游离脂肪酸,方法 简单,易行,检验成本低,很适合日常质量控制. 3.2洛伐他汀易溶于乙醇,甲醇,氯仿,乙酸乙酯,样 品采用75%乙醇超声处理进行提取,尽量减少了有机 溶剂的使用量,提取方法简单,易行,可操作性强. 3.3采用HPLC法对红曲中的降脂活性成分洛伐他 汀进行了含量测定,在1.2.2.2的色谱条件,洛伐他汀 的出峰时间在5.3min,辅料空白对照无干扰,样品峰与 杂质峰均能达到完全分离,峰形最好,理论板数按洛伐 他汀峰计算在40OO左右. 综上所述,通过以上研究,建立了脂必妥胶囊的质 量标准,标准中所建立的检测方法专属,简便,可行,检 测结果准确可靠. 参考文献: [1]邢旺兴,陈士景,宓鹤鸣,等.中药红曲的薄层色谱鉴别[J].药学 实践杂志,2000,18(2):9395 [2]宋洪涛,郭涛,张跃新.中药红曲的生药学及质量控制标准的研 究[J].中国中药杂志,1999,(5):262264 [3]宋洪涛,宓鹤呜,郭涛,等.HP1C法对不同来源红曲巾洛伐他汀的 定量分析[J].中草药,1999,3o(2):100101 [4]王春娜.HPLC法检测功能红曲中的洛伐他汀[J].北京农学院学 报,2000,l5(2):48—51 (收稿日期:2006-02—24)