穿心莲内酯的提取分离及鉴定

穿心莲内酯的提取分离及鉴定 穿心莲内酯的提取 分离及鉴定 2011级16班 摘要:穿心莲为解毒消炎类临床常用药，穿心莲内酯是中药穿心莲的主要有效成分，分子式CHO，白色方形或长方形结晶，味极苦，难溶于水易溶于乙醇、甲醇等。利用乙醇提取方20305 法、超声、回流、旋转蒸发浓缩方法对穿心莲内酯进行提取分离以及纯化，使用TLC法对其鉴别，可得到纯度较高的穿心莲内酯。 关键词:穿心莲、穿心莲内酯、超声提取法、乙醇提取法、TLC鉴别 Isolation & Identification of Andrographolide ABSTRACT: Clinical commonly used medicines, creat for detoxification counter Andrographolide is the main effective component, Traditional Chinese medicine (TCM) andrographis formula CHO, white square or rectangle crystal, taste bitter, 20305 Using the ethanol extract method, soluble in water, soluble in ethanol，methanol, etc. ultrasound, reflux, rotary evaporation enrichment method to extraction separation and purification of Andrographolide, using TLC method for the identification, can get high purity Andrographolide. KEY WORDS: Andrographis paniculata;Ultrasonic extraction;Andrographolide;alcohol extraction;Thin layer chromatography (TLC) 穿心莲为常用中药，来源于爵床科植物穿心莲Andrographis paniculata(Burm. f.)Nees.的干燥地上部分。收载于《中国药典》2000 年版一部。具有清热解毒，凉血，消肿的功能，临床用于感冒发热、咽喉肿痛、口舌生疮、顿咳劳嗽、泄泻痢疾、热淋涩痛、痈肿疮疡、毒蛇咬伤等。其主要活性成分为穿心莲内酯(andrographoiide)、新穿心莲内酯 [4](neoandrographoiide)脱水穿心莲内酯(dehydroandrographoiide)。 穿心莲内酯为天然植物穿心莲的主要有效成份，具有祛热解毒，消炎止痛之功效，对细菌性与病毒性上呼吸道感染及痢疾有特殊疗效，被誉为天然抗生素药物。本品为二萜类内酯化合物，均难溶于水，通常仅能口服给药。主要药理作用:抗菌作用、抗病毒作用、利胆保 肝作用、抗心脑血管疾病作用、抗肿瘤作用。 穿心莲内酯(andrographolide)又称穿心莲乙素。分子式CHO，分子量350.44。无色20305 方形或长方形结晶，味极苦。mp.230,231?，易溶于甲醇、乙醇、丙酮、吡啶中，微溶于氯仿、乙醚、难溶于水、石油醚、苯。 1、 1(1实验仪器和试剂 仪器:烧杯，玻璃棒，铁架台，球形冷凝管，研钵，药勺，恒温水浴锅，超声仪，减压抽滤器，滤纸，薄层板，旋转蒸发仪，布氏漏斗，冰箱，毛细管，吹风机，烘箱， 试剂:95%乙醇，活性炭，乙酸乙酯，单质碘，CMC-Na溶液,硅胶粉， 1(2实验材料 实验室提供的穿心莲粉末 2、方法和结果 2(1提取和分离 穿心莲内酯粗品的提取:取50g穿心莲粉末于烧杯中，加入适量的95%乙醇溶液，搅拌，静置10min,于50?恒温水浴锅中超声提取40min,提取时应注意防止乙醇的挥发用保鲜膜封住烧杯口，然后过滤，滤渣再加入10倍量95%乙醇再超声提取40min过滤，提取两次后合并提取液(深绿色液体，含有叶绿素及其他杂质)，在提取液中加入6g活性炭，于75?(温 度不能高于80?，否则易发生水解)恒温水浴锅中水浴加热30min脱色，趁热抽滤，滤液再加入5g活性炭于75?恒温水浴锅中水浴加热30min脱色，趁热抽滤，加热浓缩，滤液浓缩至15ml(呈微黄色液体，稍微浑浊)，自然冷却，静置48小时析晶，若无晶体析出或是析出晶体较少，可继续静置析晶，过滤取晶体(淡黄色，有较多杂质)，得到穿心莲内酯粗 [5]、[7]品(淡黄色晶体)。 抽滤液点板结果 浓缩液点板结果 浓缩液中粗品的析出 抽滤得到的粗品(淡黄色) 取少量晶体溶于乙醇中，取少量溶液点板，以乙酸乙酯-95%乙醇(7.5:2)为展开剂，鉴别检查粗品。 穿心莲内酯粗品的精制:取粗品晶体，称量得1.38g,加入约40mL乙酸乙酯溶解，于75? 恒温水浴锅中回流30min,过滤取滤液，再于75?恒温水浴锅中回流30min，过滤取滤液，自然冷却，于冰箱中静置48小时析晶(析出白色晶体)，过滤得到白色晶体，称量得到精制穿心莲内酯0.34g。 2.2穿心莲内酯的鉴定 取少量晶体溶于适量乙醇中，使用硅胶:G-CMC-Na(1:3)的薄层板(事先铺好，经过活化好的薄层板)用毛细管取吸对照溶液和样品液点板，以乙酸乙酯-95%乙醇(7.5:2)为展开剂，在展开槽中展开完毕立即吹干，用碘单质熏板使显示两个黄色的点，以大致鉴别检查最后得到的穿心莲内酯的纯度。点板显示得到的穿心莲内酯纯度较高。 穿心莲内酯粗品点板结果 精制穿心莲内酯TLC鉴别(左:对照点，右:样品点) 穿心莲内酯精品(0.34g) 实验产率(%):0.34/50×100%=0.68% 3、讨论 ? 据文献报道，穿心莲主要有效成分为二萜内酯类成分，具有解热、抗炎、镇静等作用。其中以穿心莲内酯含量较高，以醇提工艺穿心莲内酯含量较高。因为穿心莲内酯易水解提取时应注意温度(实验中控制温度不得大于80?)与溶液pH(穿心莲内酯在碱性坏境中容易水解)，以防止穿心莲内酯在提取过程中水解而对产率影响较大。经过与同实验室其他小组提取方法比较，超声波的介入显著缩短了浸提时间，明显加快了溶出效率，同时也保证了其稳定性。超声波提取具有高效、节能、降低工艺成本，且安全性大的特点。 ? 本次实验产品纯度较好但产率较低，可能原因是穿心莲内酯类化合物为二萜类内酯，性质极不稳定，易氧化、聚合。可也能是在提取时，如用热乙醇加热回流提取穿心莲总内酯，能同时提出大量穿心莲中的叶绿素、树脂以及无机盐等杂质，使析晶和精制较为困难，产率较低。 ? 穿心莲内酯类化合物为二萜类内酯，性质极不稳定，易氧化、聚合而树脂化。因此所提取的穿心莲应是当年产的新药材，并且要未受潮变质的茎叶部分，否则内酯含量明显下降至极低，难以提取得到。 ? 水提取一般可将多糖等多种水溶性杂质提取出来，水提取出膏率较高，但穿心莲内酯水溶性较低，不适合穿心莲的提取。 ? 穿心莲内酯的析晶宜在含乙醇量稍高的情况下进行，此时晶形与结晶的纯度都较好。当 溶液的含水量较高，或粘稠度太大时，往往不易析出结晶，实验时使用的是95%乙醇。 ? 在活性炭脱色的过程中，要注意控制活性炭的量，加入过多在吸附杂质的同时也是产品损失较大，降低产品产率。 ? 本实验由于考虑到穿心莲内酯热不稳定性，活性炭脱色时采用75?水浴加热30min脱色 ?水浴加热30min(两次)，控制温度小于80?，使穿心莲内(两次)，精制回流是也是75 酯不被破坏水解。 4、参考文献 [1]徐靓，穿心莲内酯的提取及纯化工艺研究，成都理工大学硕士学位论文[J](20070501( [2]赵玉江，李勇，吴修红，孟祥才，不同提取方法对穿心莲内酯含量的影响[J](黑龙江医药2006，3(19)( [3]聂凌云，罗兴平，穿心莲提取工艺的研究及热稳定性考察[J](解放军药学学报，第 2l 卷 第 l 期( [4]李曙光，叶再元，穿心莲内酯的药理活性作用[J](2 0 08年5月，第26卷第5期( [5]刘蕾，许笑笑，韩光，均匀法优化穿心莲的提取工艺[J](河南大学学报(医学版)，2006 年 11 月，第 25 卷 第 4 期( [6]张建强，张玲，王欢，孙英法，穿心莲提取工艺研究[J](食品与药品，中华中医药学刊，2 0 08年5月，第26卷第5期( [7]卓菊，汪小根，正交设计研究穿心莲中脱水穿心莲内酯提取工艺[J](中南药学 ，2005年6月第3卷第3期(