巴西蘑菇母种组织分离方法

巴西蘑菇母种组织分离 巴西蘑菇母种组织分离方法 食用苗EDIBLEFUNGI2002(4) 巴西蘑菇母种组织分离方法 梁丽琨倪新江初洋 (山东省烟台大学生化系,264005) 常规组织分离方法,多者认为挑取菌柄和菌盖交界 处组织最好,因为此处组织厚,易操作.但笔者在实际应用中 发现,对于不同食用菌,最佳组织分离部位有不同的.本试验 对巴西蘑菇子实体不同部位组织进行分离,以确定最佳组织 分离部位. 1与方法 本实验室保存菌 1.1供试菌株巴西蘑菇1号和4号菌株, 种.培养基为发酵棉子壳1OOg.葡萄糖20g.MgSOO.1g.琼脂 20g.DW1,OOOmL.分装于20mm×150mm试管.装量1/3. 1.2分离方法取新鲜未开伞的子实体,削去菌柄基部和菌 柄外表皮,用75乙醇进行子实体表面消毒后,移人超净工 作台,紫外灯照射20min.将解剖刀在酒精灯火焰上灼烧后放 人无菌水中降温.确保解剖刀温度不会损伤子实体组织.将子 实体一分为二,分别在菌柄内(柄中),菌柄与菌盖交界处(交 界),菌盖和菌褶处切割表皮内组织,黄豆大小的小块,切割时 用无菌镊子接人试管斜面,每种组 不能切透子实体表面组织. 织各接1O支,25'C暗培养.每天定时观测菌丝生长情况. 2结果与讨论 1号菌株子实体较小,单体重量轻,菌盖薄,菌柄较细,整 个子实体组织结构较4号菌株疏松易碎.1号菌株子实体不 同部位组织菌丝生长情况见表1. 表11号菌株子实体不同部位组织萌发菌丝生长比较 表1显示,1号菌株子实体的柄中和交界组织菌丝萌发 时间早,但柄中组织的菌丝生长速度远远大于交界组织.并且 菌丝生长密度比交界组织大;菌盖和菌褶组织2天后才开始 萌发,且菌丝生长很慢;菌盖组织菌丝萌发后停止生长.菌丝 萎缩.菌褶组织菌丝长势很弱.因此对于1号菌株来说,子实 体最佳组织分离部位是柄中组织.菌盖,交界组织和菌褶组织 可能由于子实体个体小,组织薄且脆,操作时组织损伤较大而 导致菌丝长势弱甚至停止生长. 4号菌株子实体个体大,单体重量大,整个子实体组织结 构致密,不易碎.子实体不同部位组织菌丝生长情况见表2. 表2显示,4号菌株子实体4个部位组织菌丝萌发均较快.但 菌丝长势不同,柄中组织菌丝生长快,菌丝浓密.洁白;菌盖和 交界组织虽菌丝生长速度不如柄中组织,但长势仍较好,菌丝 浓密;菌褶组织菌丝生长较弱.因此,在4号菌株子实体组织 熟化牛粪作双孢蘑菇覆土材料 试验* * 凌霞芬郭倩贺冬梅 (上海市农业科学院食用菌研究所;农业部食用菌遗传育种重点 开放实验室;上海市农业遗传育种重点实验室,2oil06) 摘要本试验利用经增温剂发酵熟化的牛粪与土的混合物作 为双孢蘑菇的覆土材料,结果显示:熟化牛粪中的粪草粉部分与 土以1:1.5的比例混合,能比对照细泥垄糠土增产5左右,而 牛粪中的粪粉部分对产量有负面影响. 关键词增温剂牛粪处理双孢蘑菇覆土 文章编号1ooo一8357(2002)O4—0ol9一ol 国内外的研究表明,目前双孢蘑菇覆土材料首选是草炭 土.草炭土具有疏松,持水量高的特性,特别是淋水,干燥后能 保持其原有的物理结构.在我国能作为双孢蘑菇覆土材料的 草炭土都蕴藏在东北原始森林中,从采购,运输到制作,价格 较高.许多研究者试图利用当地现有的资源和材料仿制"草炭 土"以达到提高双孢蘑菇产量的目标.本研究用增温剂对牛粪 进行熟化后,应用粉碎的粪草及粪肥作为覆土的组合材料,效 果良好.现将试验结果报道如下: 1材料与方法 1.1试验材料?培养料配方(1OOm):稻草2,OOOkg,硫氨 25kg.尿素7.5kg,石灰65kg,CaCO320kg.过磷酸钙60kg,干 牛粪400g,豆饼粉32kg,米糠60kg,增温发酵剂lkg.?菌种: U3麦粒菌种;?覆土材料:经增温剂发酵熟化后的干牛粪,粉 碎过筛,收集筛上部分为粪草粉,筛下部分为粪粉,分别作为 覆土材料待用. 1.2试验方法常规二次发酵法堆制培养料.菌种4/5混 播,1/5在表面撤播.播种量为培养料湿重的1,培养料用量 为湿料60kg/m.菇房管理为常规方法. 1.2.1粪草粉试验配方A.纯粪草粉;B.粗细土;C.垄糠 以下同);E. 细泥土;D.粪草粉:沙壤土为1:1.5(体积比, 粪草粉:沙壤土为1:1.2;F.粪草粉:沙壤土为1:1.1. 表24号菌株子实体不同分离组织萌发菌丝生长比较 分离时选用柄中,交界和菌盖组织均较好,但由于柄中组织挑 取方便,操作简单,不易污染,所以选取柄中组织进行组织分 离比较理想.与1号菌株相比可能由于子实体组织厚实,四个 不同部位组织菌丝萌发情况和菌丝长势均比1号菌株的相同 部位好,且菌丝生长较浓密. 总之,对于巴西蘑菇来说,虽然不同菌株子实体在大小上 有差异,但柄中组织都是最佳组织分离部位. 一一 ]9一