碱性橙染料的测定

碱性橙染料的测定 食品中禁用物质的检测 碱性橙染料的方法验证 实验方法引用:GB/T23496-2009 实验方法:称取20g(准确至0.01)粉碎混匀样品至三角瓶中，加入适量无水硫酸钠，25mL的无水乙醇超声提取30min，收集上层提取清液于圆底烧瓶中，重复提取3-4次，合并提取液于40?减压浓缩至近干，氮气吹干后用定容液溶解并定容至5mL，以12000r/min高速离心10min，上清液过0.45um滤膜，滤液供测试。 1.色谱条件 色 谱 柱: Ecosil (5μm，4.6×250 mm); 流 动 相: 0.02mol/L乙酸铵溶液+甲醇=31+69; 波 长: 碱性橙2，449nm;碱性橙21、碱性橙22，485nm; 流 速: 1.0mL/min; 柱 温: 室温; 进 样 量: 20uL。 2.线性关系和检测限 2.1 线性关系 将标准混合储备液稀释成浓度分别为2.0 mg/L、5.0 mg/L、10.0mg/L、15.0mg/L、20.0mg/L的标准工作液，依次进样20uL，浓度和峰面积之间的关系绘成标准曲线见附录。 2.2检测限 按信噪比S/N=3计算，本方法的最低检测限碱性橙2为 0.1ug/mL，碱性橙21为 0.1ug/mL，碱性橙22为 0.1ug/mL。 3.重现性和回收率 3.1. 重现性 以某加标自制黄鱼(试样中每种碱性染料的含量为2 mg/Kg)为试验样品，按GB/T23496-2009方法，重复测定6次，测定结果如下: 相对标 1 2 3 4 5 6 平均值 准偏差 (%) 取样量 18.75 21.35 20.55 20.46 20.78 20.62 - - (g) 碱性7.189 7.762 7.586 7.803 7.769 7.548 - - 橙2 进样 碱性浓度 7.694 8.198 7.904 7.829 7.877 7.790 - - 橙21 (ug/mL) 碱性7.741 8.248 7.828 7.867 7.826 7.789 - - 橙22 碱性橙2含量 1.82 1.82 1.85 1.91 1.87 1.86 1.85 1.84 (mg/Kg) 碱性橙21含量 1.95 1.92 1.92 1.91 1.90 1.92 1.92 0.87 (mg/Kg) 碱性橙22含量 1.96 1.93 1.90 1.92 1.88 1.92 1.92 1.41 (mg/Kg) 上的结果说明:该方法重现性好，精密度高。 3.2 回收率的测定 根据回收率公式计算出加标回收率，结果见下表: 加标量 实验测 回收率 回收率 实验次数 理论值 定含量 范围 (%) (mg/Kg) (mg/Kg) (%) 1 2.0 1.82 91.0 2 2.0 1.82 90.9 3 2.0 1.85 92.3 91.0-95.3 4 2.0 1.91 95.3 碱性橙2 5 2.0 1.87 93.5 6 2.0 1.86 92.9 1 2.0 1.95 97.4 2 2.0 1.92 96.0 3 2.0 1.92 96.2 94.8-97.4 4 2.0 1.91 95.7 碱性橙21 5 2.0 1.90 94.8 6 2.0 1.92 95.8 1 2.0 1.96 98.0 2 2.0 1.93 96.6 3 2.0 1.90 95.2 94.2-98.0 4 2.0 1.92 96.1 碱性橙22 5 2.0 1.88 94.2 6 2.0 1.92 95.8 上表的结果说明:本方法的总回收率在91.0-98.0%之间，方法的准确性高。 4.结论 测定结果表明，该方法简单易行，结果准确，灵敏度高。