蛭龙活血通淤胶囊对小鼠的急性毒性实验

蛭龙活血通淤胶囊对小鼠的急性毒性实验 蛭龙活血通淤胶囊对小鼠的急性毒性实验 usHIzHENMEDIcINEANDMATERIAMEDIcAREsEARcH2009v0L.20N0.7时珍国医国药2009年第20卷第7期 蛭龙活血通淤胶囊对小鼠的急性毒性实验 罗萌,杨思进,宋志宙,白雪,李庆之 (1.四川中医药高等专科学校,四川绵阳621000;2.泸州医学院附属中医医院,四川泸州64600O; 3.山西大同市第三人民医院,山西大同0370O0) 摘要:目的观察小鼠口服蛭龙活血通淤胶囊的急性毒性作用.以最大给药量法对小鼠进行灌胃给药测定药物的 急性毒性.结果以最大给药量法24h内灌胃给药3次,连续观察2周无1只小鼠死亡,亦未见明显毒性反应;测得小鼠 的最大给药量为81.6g/kg.结论在本实验条件下,蛭龙活血通淤胶囊对受试动物未见明显的急性毒性作用,表明该药 具有良好的安全性. 关键词:蛭龙活血通淤胶囊;急性毒性 中图分类号:R289.5文献标识码:A文章编号:1008.()805(2009)07—1639-()1 AcuteT0xicOlOgicalStudyOfZhi—l0ngHuOxueTOngyuCapsule Lu0Meng,YANGsi—iin,s0NGzhi—zh0u,BAIxue,LIQing-zhi (1..s"nnC0Zed,0凡0fC凡esedc,,0,,g621O0O,cn0;2.Dq口,ne凡Q厂口gy, e&cond4把d印Zdc口zffe,0"646000,C砌n;3.叩舶f0厂 D0,0凡gCy,D,0n037000,Cn) Abstract:objec6veTostudytheacutet0xicity0fzhi—longHuoxueTongyLlCapsule.MethodsThemaximumenduranced0se wasdeterrnined.Inordertoobservetheacutetoxicity,thedmgwascontinuouslygivenbygaV age.ResultsMaximumendurance dosewas81.6g/(kg?d)andtherewasnoobviousacutetoxiceflfectingeneralc0ndition.C0ncl usionzhi—longHuoxueTongyu Capsulehasn0obviousacutet0xicefct. KeywOrds:HuoxueTongyuCapsules;Acutetoxicity 蛭龙活血通淤胶囊是以"重用补气,辅以化痰通络,佐以祛 风"为立法指导组成的纯中药复方,主要由黄芪,人参,水蛭,大 血藤,桂枝等药组成.经临床实验证实…其能减轻患者肢体麻 木,活动不利等症状,促进患肢功能恢复,能提高肌力I级,缩短 住院时间;动物实验证明其能明显改善微循环障碍,促进血管 再通和侧支循环建立,对抗肾上腺素缩血管效应,缩短血管痉挛 恢复时间及具有显着的体外抗血栓形成作用.为给临床用药提 供安全的实验依据,本实验对蛭龙活血通淤胶囊进行了急性毒理 学研究. 1与仪器 1.1受试药物蛭龙活血通淤胶囊:内容物形状为棕褐色色粉 末,O.4粒,3粒/次,3次/d,每粒含原药材2.625g.由泸州医 学院附属中医药制剂室提供.批号:2oo707120.实验前用蒸馏 水配制成不同浓度的混悬液灌胃使用. 1.2动物及饲养条件KM小鼠2O只,体重(2O?2)g,雌雄各 半,由泸州医学院实验动物中心提供,合格证号:川实动证 070923号.动物实验室环境:室温20,25?,相对湿度40% , 70%. 1.3仪器法国Bayer公司ADVIA60型全自动血球分析仪;日本 Tokv0B0eklMedicalsystem公司TMs—l024全自动生化分析仪; LIBR0RAEG一220电子分析天平. 2方法?] 2.1预试验在进行正式实验之前,首先做了预试验,以便为 正式试验提供依据.将12只小鼠随机分为两组,雌雄各半,灌胃 收稿日期:2008-o5;修订日期:2o08一l2-3O 基金项目:四川省中医药管理局资助项目(N0.2OO643[2OO6]60号) 作者简介:罗萌(198O一),女(汉族),四川绵阳人,现为泸州医学院2oo6 级在读硕士研究生,主要从事医学教学工作. 通讯作者简介:杨思进(1962-),男(汉族),四川盐亭人,现任泸州医学 院附属中医医院主任医师,硕士生导师,硕士学位,主要从事心脑血管内 科研究工作. 前禁食不禁水16h.给药组:以可供灌胃的最大浓度(0.68 m1),小鼠灌胃可承受的最大体积(每10g体重0.4m1)1次灌给 蛭龙活血通淤胶囊.给药后常规饲养,观察3d.空白组:灌胃等 量蒸馏水,方法同给药组.结果小鼠全部存活,因此,无法测出该 复方制剂的LD提示该中药复方制剂药毒性很低,是较安全 的,故测定本药对小鼠的最大耐受量. 2.2最大耐受量测定KM小鼠20只,体重(2O?2)g,雌雄 各半.常规饲养观察5d后进行实验,实验前动物禁食12h, 不禁水.在预试验的基础上,以灌胃针能抽取的药物最大浓 度(0.68g/m1)和动物能耐受的最大容积(0.8ml/2Og)在24 h内给予药物混悬液灌胃给药3次,间隔5h,以摄食,皮毛, 粪便,分泌物,四肢活动,动物死亡为指标,连续2周观察药物 的急性毒性. 2.3统计学处理数据以?s表示,各组均数间比较采用检 验,采用sPss13.0统计软件进行分析. 3结果 3.1毒性反应情况蛭龙活血通瘀胶囊灌胃给药后即刻及连续 14d观察,全部小鼠的精神,食欲,活动等情况均未见异常,无一 只小鼠死亡,亦未见明显毒性反应.经计算,小鼠在24h内累计 给药量达81.6g?kg,?d(折合原药材535.5g?kg,? d),相当于临床成人每日用量(O.08g?,?d)的 1020倍. 3.2给药前后体重变化情况空白组与药物组小鼠体重增长比 较无统计学意义(P>0.05),动物均增重.提示蛭龙活血通淤胶 囊对小鼠的急性毒性反应不明显. 3.3内脏结构观察第l5天称重后逐只处死并解剖,肉眼观察 心,肝,脾,肺,肾,肾上腺,胸腺,卵巢,子宫,精囊,前列腺,睾丸, 胃,肠及胸腔,腹腔,各器官均无异常. 4讨论 脑梗塞是临床常见病,多发病,其发病率,死亡率和致残率均 较高j,因而其治疗受到国内外医药界广泛关注,中药对于本病 的治疗作用是多靶点的.前期试验证明其能改善血流变学, ? 1639? 时珍国医国药2009年第20卷第7期 LIsHlzHENMEDIcINEANDMATERIAMEDIcAREsEARcH2009V0L.20N0.7 降低血脂,明显抑制血小板,红细胞聚集,改善脑循环,改善血管 内皮分泌功能,所以其治疗脑梗塞值得深入研究并大力推广于临 床.本实验表明以蛭龙活血通淤胶囊最大浓度和动物能耐受最 大容积24h内给小鼠灌胃给药3次,灌胃后14d观察未引起任 何急性毒性反应,其最大耐受量(MTD)为:81.6g?,?d (折合原生药材535.5g?kg一?d),相当于成人日常用量的 lo20倍,表明该药品安全范围大,临床使用安全系数高. 参考文献: [1]白雪,王丽萍,王明杰,等.祛风药与活血药对实验性脑缺血大鼠 血液流变学的影响[J].中西医结合心脑血管病杂志,20H06,4 (5):416. [2]王丽萍,白雪,杨思进.祛风药治疗缺血性中风的研究进展[J]. 中西医结合心脑血管病杂志,2oo6,4(2):146. [3]李仪奎.中药药理实验方法学[M].上海:上海科学技术出版杜, 1991:528. [4]中华人民共和国卫生部药政管理局.中药新药毒理学研究 [s]. [5]赵建国.脑梗死[M].北京:人民卫生出版社,2oo6:1. [6]尹思源,肖顺汉,杨思进,等.瘀血证模型相关指标变化及血脉宁 颗粒对其影响的研究[J].河北中医,2003,25(6):478. 黄芩苷对抗结核药物肝损伤保护作用的实验研究 王新华,金东岭,何红梅,张延霞,时志民,赵如同 (河北大学医学院,河北邯郸056002) 摘要:目的探讨黄芩苷对抗结核药物肝损伤的保护作用机制.方法将60只小鼠完全随机分为6组,即正常对照组,肝 损伤(异烟肼+利福霉素钠)组,联苯双酯组及黄芩苷高,中,低剂量组.给药8d后,分别用光镜和电镜观察肝脏组织 细胞病理学的改变情况,用免疫组织化学染色技术分析肿瘤坏死因子一d(TNF一)的表达情况.结果黄芩苷能明显减 轻肝细胞变性和坏死,炎症活动程度明显减轻(P<0.05或P<0.01);TNF—d蛋白在黄芩苷组小鼠肝脏组织内为弱阳 性表达(P<O.05或P<0.01);黄芩苷3个剂量组间小鼠肝脏病理形态学及肝脏组织内TNF一蛋白的表达均无显着性 差异(P>0.o5).结论黄芩苷对抗结核药物肝损伤的保护作用可能与抑制TNF—蛋白表达有关. 关键词:黄芩苷;抗结核药物;肝损伤;肿瘤坏死因子一o【;免疫组织化学 中图分类号:R285.5文献标识码:A文章编号:1008-()805(2009)07-l640-I)2 AnExperimentalStudy0nProtectiVeEffectsofBaicalinonHepaticInjuryInducedby AntituberculOsisDrugs WANGXin—hua,JIND0ng—ling,HEHong-mei,ZHANGYan-xia,SHIZhi-min,ZHA0Ru—t0ng (d口Zc0Zfege,Engre,nd,056O02,n口) Abstract:objectiveToinvestigatethepr0tectiveeflfectsofbaicalinonthehepaticiI1juryindu cedbyantitubeI?ulosisdrugsin mice.Metht'dsSixtymiceweredividedrandonllyinto6gmups:nom1alc0ntmlgr0up,liverin juryisoniaZidandrifl帅ycinsodi— umgmup,positivecontmlgmup,baicalingmups(high,middleandl0wdoses).Thedmgswer eadministeredtomice0ncedai1y f0r8days."ghtmicr0scopeandelectmnicmicmscopewereusedrespectivelyto0bservethehi stopathologicalchanges0fthehe- paticcells.Theexpression0ftum叫necr0sisfactor—(INF—)wasdetectedbyimmunohistochemistry.ReSllltsBaicalina?e— viatedthedegenerationandnecmsisinducedbyantituberculosisdnlgsobviously.Thelevel0 finnammatoryactivitywasrelieved significantly(P<0.05,P<0.01).TheimmunoreactivityofTNF一pr0teininlivercellswasslightlystainedinbaicalingr0ups (P<0.05,P<0.01).Therewerenos唔nificantdiflferencesab0utthepath0morphology,theirmammat0ryactivityandtlleex— pressofTNF—pr0teinamongbaicalingr0ups(P>0.05).ConcIusionrhepmtectiveeffects0fbaicalinonh epaIjcinjuryin— ducedbyaIltituberculosisdmgsm.dyberelatedtoinhibitTNF—dpr0teinexpression. Keywords:Baicalin;Antituberculosisdmgs;Hepaticinjury;TumorNecr(】sisFactor一;Immunohistochemistry 结核病患者在化疗过程中遇到的最棘手问之一是应用的抗 结核药物对肝脏的损害,它可导致化疗中止,甚至危及患者的 生命.本实验前期研究已证实黄芩苷对异烟肼和利福霉素钠所致 肝损伤具有较好的保护作用,但是这种保护作用机制还不清楚. 本实验试图通过免疫组织化学技术及病理形态学超微结构观察探 究黄芩苷对抗结核药物致小鼠肝损伤的保护作用机制. 1材料 1.1药物与试剂黄芩苷(承德颈复康药业集团雾灵药业有限 收稿日期:2008一D9.29;修订日期:2【x】8-12-30 基金项目:河北省中医药管理局基金课题(N0.2oo404O) 作者简介:王新华(1958-),女(汉族),河北馆陶人,现任河北工程大学医 学院教授,学士学位,主要从事药理学教学与研究工作. 责任公司,批号:050920);异烟肼注射液(天津金耀氨基酸有限 公司,批号:0505101);利福霉素钠注射液(沈阳双鼎制药有限公 司,批号:0508O802);联苯双酯滴丸(德州德药制药有限公司,批 号:05O501);兔抗小鼠TNF一0【单克隆抗体和即用型sABc试剂 盒(武汉博士德生物工程有限公司,编号:SA2041). 1.2动物健康清洁级KM小鼠60只,早6兼用,体重18—22 g,由河北医科大学实验动物中心提供. 2方法 2.1动物分组及处理将60只小鼠完全随机分为6组,每组10 只,即正常对照组,肝损伤(利福霉素钠+异烟肼)组,联苯双酯 组和黄芩苷高,中,低3个剂量组.正常对照组灌胃给予0.9% 氯化钠注射液0.2ml?(10g),?d,,共8d;肝损伤组腹腔注 身寸0.25%利福霉素钠O.2ml?(1Og)-.?dI1和灌胃给予O.3%