【doc】我国首次发现暗孢节菱孢所致皮肤真菌病一株新的条件致病性真菌

【doc】我国首次发现暗孢节菱孢所致皮肤真菌病一株新的条件致病性真菌 我国首次发现暗孢节菱孢所致皮肤真菌病 一株新的条件致病性真菌 真菌9(3):232235,1990 Acta~iycologlcaSinlca 我国首次发现暗孢节菱孢所致皮肤真菌病 一 株新的条件致病性真菌 赵玉明邓成儒陈凌刘明礼 (言韩省透化市卫生学技通化市) 陈世平王茁 (解放军总医莸基础医学研究所,北京) 孙鹤龄 (北豪癌研究所,北京1 摘要本文暗孢节菱孢(又名球形阜孢霉)所致皮秩真菌病此菌是我国首次发现的条件 致病真菌.患者头部发生多处皮下结节及萎缩性秃发.皮损活检可见毛囊和皮脂腺严重破 坏.肉芽肿内有福色孢子和分隔菌丝,尤以皮下脂肪浸搁明显.多次从皮损外皮屑内检出圆 形的厚壁孢子.在沙氏琼脂培养基上,37?培养生长良好.菌落初呈淡黄色,渐变为橙色.小 培养镜检时(放大400倍),可见菌丝分枝有隔(1—2m).单细胞性小分生孢子呈球形,晶体 形等,光滑发亮呈褐色.有的孢子中央有一黑色纵条带扫描电镜下发现球形威卵形分生孢 予:将暗孢节菱孢制成的菌璇凄种于实验动物皮肤,2周后出现斑块,小结节,小敬肿和脱毛 等症状,与患者临床症状相同.对照组动物正常.动物皮损活检所见病理损害与患者皮损病 理损害相同.证实了此菌的致病性. 关键词睹孢节菱孢:皮眭真菌病 暗孢节菱孢Arthriniumphaeospermum(Corda)Ellis广泛分布于全世界.从土 壤,空气和植物果实均可分离出该菌,但由它引起的人皮肤真菌病,尚未见报道.我们于 1986年在吉林通化地区多次从一皮肤病人的头部结节的厦屑和结节的活检标本检出和 培养出暗孢节菱孢,并进行了临床,病理,真菌学观察和动物毒理实验.现将结果报告如 下: 材料及方法 (一)病例报告 患者女性,41岁,吉稀籍,家务,于1986年4月15日就诊,主诉头顶发生皮下结节及秃发已有5 年.患者于1981年3月,头项长出指头大的硬结节,自觉局部发胀及灼热感.2—3周后增至核桃 大,逐渐变软.结节中央徽红.其后呈暗红色,表皮萎缩变薄拔亮,似玻璃纸样.外观明显凹陷,头发 脱落.曾踩中草药,激素软膏等均未见有效. 皮挟科检查发现额顶部有4×5cm6×8c加,i0×5cm及3.×5Gm凹陷性萎缩斑,其上头发 1989—02—12收稿. 吉省浑江中葑学校.本科研战果星国家科委邀请龙振华,王端礼,吕乃群等教授给予鉴定并莸通过,由国 象忤委i砥发鉴定证书.文稿经王墒礼,劫教授修改,特此致谢. 3朔趑玉明等:我国首次发现暗孢节菱孢所致皮跌真篚府一一株新的条件致病性 真菌233 脱落,表皮变薄发亮.右额顶发际有2×{cm,3×5c.m萎缩疆,头顶部前发际正中央有5x5cm皮下结 节,与皮下组织不粘莲,明显隆起.结节顶呈暗红色,已趋软化.稍有触痛.颅顶矢状缝有6x8cm皮 色硬结节触之硬感,与皮下不粘连,有触痛c左藏上方发际有3×{cm萎缩斑.后枕骨上方有{×5咀 萎缩斑.矢状缝左侧有4×5cm皮下硬结节.实验室检查,血,尿便常规正常,血沉3ram,ba肝功能及 心电图正常. (二)皮肤活检 取陈1日及新损害组织用切片作HE染色.光镜下检查 (兰)真菌学检查 刮取皮损皮屑直接镜检和取材接种于沙氏琼脂(sDs),马铃薯琼脂(PDs),蔡氏琼脂及牛心脑 裎液血琼脂培养基上,置于25?,32?,js?,j7?及{5?条件下培养.一局后,用显救镜透射电子显 撒镜和扫描电子显撒镜下碗察培养物的形态和结掏a (四)动物接种 将培养的菌株用10%葡萄糖溶液制成混浊菌液,用表皮直接涂抹法,划破表皮涂抹法,皮下注射法 和腹腔注射法接种于兔,豚鼠及小鼠(LACA).同法设对照组取发病动物的皮损组织,脏器接种 8DS,蔡氏琼脂及PDS上,置37?培养,分离真菌.皮损组织切片作HE染色,观察病理变化. 结果 (一)病人皮肤活捡 光镜下所见:角层毛孔有一堆孢子,角质层内也有孢子.表皮高度萎缩,在其中亦可 见孢子和菌丝.真皮网状浅层小血管扩张充血,可见小灶状浸润.皮脂腺周围,真皮 网状 深屡至皮下脂肪组织广泛性侵润.汗腺毛囊和皮脂腺严重破坏.由组织细胞,嗜中性粒 细胞,嗜酸性粒细胞,淋巴细胞及浆细胞等构成肉芽肿.但浸润灶内多核巨噬细胞较少 见.乳头层,毛囊和毛根部都可见褐色孢子o (二)菌落形态特征 病人皮损组织接种于SDA,PDS,蔡氏琼脂和牛心脑浸液血琼脂培养基上经37~C 培养1周后,均长出同样菌落.初为白色,2周后变成淡黄色.菌落背面呈橙色.4周变 成黑褐色,培养3天菌落直径为1.6cm,l周为3.2—3.6cm.本菌在25~C,32~C:,35~C: 及 45~C均可生长,其中以37~3,生长良好. (三)分生孢子藿生状态 在显微镜下观察孢子着生情况,可见分生孢子生长在长短不等的孢子梗上;单生,双 生和簇生(图1-i). (四)分生孢子形态 1.显微镜所见:分生孢子褐色,光滑.孢子呈球形,晶体形等,直径5—25m.在孢 子的中央处有一透明纵条带.菌墼分枝有隔. 2.透射电子显微镜下所见:可清楚地看到孢子壁的轮廓;孢子壁分内.中,外三层(图 卜2),厚度为o.1—0.5m.孢子内有大小不等的颗粒物质,直径O.5--1.0m.可见菌丝 分隔,并看到纵切的孢子壁上有一黑色纵条带,宽o.1—0.5m(图I一3) 3.扫描电子显微镜下所见:孢子呈双凸镜形的棱,有的孢子中央处有一突起纵条带, 这与光学显微镜,透射电子显微镜所见一致. 真菌9卷 (五)动物实验感染 用表皮直接涂抹法接种,4周未见皮损.用划破表皮涂抹法及皮下注射法接种2周 后,动物的皮肤都出现浸润性斑块小绪节,皮下脓肿及脱毛,而对照组动物正常.再 用腹 腔注射接种;际鼠每日注射1ml,连注3日混浊菌液;小鼠每日注射05ml混浊菌液,连注 3日,小鼠2餍后死亡.尸解肉眼所见,隍膜,肠系膜,腹壁,胃及肝出现散在灰白色小脓' 胂.豚鼠2周后仍存活.活杀剖取内脏所见与小鼠病理改变相同.取动物皮损处皮屑, 皮损活检组织,脓肿组织,脓液及尸解的脏器接种于SDS,蔡氏琼脂及PDS上37?培 养,均长出典型球形阜孢霉菌. 动物皮损切片HE染色,可见毛囊及皮脂腺破坏严重.病理改变与患者的皮肤病变 相同,亦可见其中有与患者同样的菌丝和孢子. 取小鼠腹膜,肠系膜,胃及肝组织作切片,用PAS染色,在胃的浆膜下至肌层有局限 性脓肿.肝小脓肿不仅见于被膜下,病变深达汇管区小叶间及肝细胞.肝脏及肺脏可见 广泛性浸润,其中有大量的大小不等的褐色孢子(图4).豚鼠接种后2周仍存活,活杀解 剖,脏器变化与小鼠相同,证明该菌有致痔性. 讨论 暗孢节菱孢又名球形阜孢霉(Papulariasphaerosperma(Pers.)HShn.该菌系半知 菌亚门,丝孢纲,丝孢目,暗色孢科,阜孢属的球形阜孢霉.届来有人又作了系统的描述 Ellis,1965).该菌过去一直被认为是腐生菌.关于其致病性,遍查国内外文献均未见报 道.此菌株是作者等首次从患者皮损处皮屑及活检组织中分离出来的.接种于家兔,豚 鼠身上,2周后,动物皮肤出现浸润性斑块,小节结,脓肿及脱毛.这些症状与患者的临床 表现相同.实验感染动物的病理改变,发现浸润广泛并深达真皮深层及脂肪层,毛 囊及皮 脂腺也受到严重破坏.经PAS染色,浸润灶还可看到有隔膜的菌丝体及单细胞性孢子. 另外,取实验动物标本接种上述培养基,均长出与患者相同的菌株. 所培养的菌株的菌落呈淡黄色,背面橙色,菌丝有隔膜,孢子呈圆形,棱形及晶体形, 光滑发亮,褐色,生长于长短不等的孢子梗上,单生,双生及簇生.典型孢子中央有一条黑 色的纵条带,这些特征和前人(Ellis,1965)所述的球形阜孢霉相符合. 动物实验感染的病理改变也与患者皮损的改变相一致,但实验动物有脓肿,肉芽肿内 可见多棱巨噬细胞.这点在病人皮肤病理改变中则未看到.另外,在动物内脏器宫均可 见孢子浸润,而患者内脏均未发现异常.该菌是否能引起人体内脏的播散感染,尚有待继 续观察. 参考文献 [1]Elli~MB(1965]DemafJaceousHyphomycetesV1.MycdPap10:1—{0 3期赵玉明等:我国首次发现暗孢节菱孢所致皮肤真菌病——一株新的条件致病性真菌235 A尺r月J?JUMP月0.PE尺^札f^fCAUSINGDERMATOMY. C0SIS.ANEWREC0RD0FCHINA ZstAoYu—MINGDENcCHENcRUCHENXI (HeallhSchooloiTonghu~,dilinProvince.Tonghu~clry)一 CHENSHI-PIN@WANBZHuo' eInttitut~.|^MedlcatSdence,Chi.esePLy4GeneralHospiBeiii.~, SONHE~LIN (BeiitgnInsdtuteio,cResearch.州in ABSTRACTAcaseofdermatorn'qcoslscausedbvArrhrinlumphaeosperraum;sreported. ItisanopportunisticpathogenicfungusfoundforthefirsttimeinChina.Multiplesubcuta— neousnodulesandatrophicalopeciadeveloped0nheadofthepatizi~tHairlolliclesandse— baeousglandswereseverelydestroyedinbiopsywithskinlesion.Sporeswerebrownordrab— coloredandseptatehyphaewel-efoundingxanulomaespeciallyinthesubcutaneousfattylayer. SphericalsporeswererepeatedlydetectedfromthedandriffsoutsidetheskinlesionItgrew wellat37.CinSabouraudmedium.Coloniesinearlystagearelightyellowincolorfh? turnedgraduallyintoorange.Hyphaewithsepta(1—2m)wereseenincultureUndermicros — cope.Conidiavariesinsizeandarespherical,elliptical,andovalinshape.Thefunguswas testedbybiochemistryassay.ThesuspensionspreparedfromA.phaeospermumwereinoculated intradermallyinanimaltoxicityexperiment.Erythemousmasses,smallnodules,abacess,and alopeclaaresimilartothoseseeninpatient'ssymptomsandsignsdeveloped2weeksafteri.n— oculation.Thepathologicalchangesofanimalskinlesioninbiopsyarealsosimitartothose foundinthepatient.Twelveanti— fungusdrugsand15traditionalmedicinalherbsweretested forthesensitivityofA.flhaeospermum 'KEYWORDSArthriniump口rm;B1acklongitudlna1band0fsp0r 图版说明 l一孢子形态2一孢子壁的结构3一孢子壁上的黑色纵条带4.动物痛理切片所见 璃子形森 1?Morphologyofspore;2一Thestructureofsporewalls;3. Ablacklongitudinal Centerofspores;4一MorphoIogy.fsporesineection.ftheexperimental~nlmMs