蒡芩慢咽滴丸中黄芩苷的含量测定-药学论文

蒡芩慢咽滴丸中黄芩苷的含量测定-药学 作者:汪旭，金向群，岳峻威，于翠翠 【摘要】 目的建立高效液相色谱法测定蒡芩慢咽滴丸中黄芩苷含量的方法。方法采用十八烷基键合硅胶色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)，以甲醇-0.2%磷酸溶液(45?55)为流动相,流速为1.0ml?min-1,检测波长为280nm。结果黄芩苷的线性范围为0.23,1.14μg(r=0.9995)，平均回收率(n=6)为100.05%(RSD=0.84%)。结论该方法简单、迅速、可靠。 【关键词】高效液相色谱蒡芩慢咽滴丸黄芩苷 蒡芩慢咽滴丸是由蟾酥、黄芩、牛蒡子等3味药组成，其中蟾酥为蟾蜍科动物中华大蟾蜍的干燥分泌物，含华蟾酥毒基和脂蟾毒配基。蒡芩慢咽滴丸具有解毒、止痛、开窍醒神之功效，用于痈疽疔疮、咽喉肿痛、中暑神昏、腹痛吐泻。黄芩为方中君药，黄芩苷是黄芩中主要成分，因此本实验采用高效液相色谱法对该制剂中黄芩苷进行含量测定，为其建立质量标准提供了依据。 1仪器与试药 岛津SPD-10A高效液相色谱仪;LC-10AT紫外检测器;KQ-250D数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。 对照品黄芩苷(批号:0736-200117)购于中国药品生物制品检定所(供含量测定用)，甲醇为色谱纯,其它试剂均为纯。 2方法与结果,1, 2.1色谱条件 以迪马公司钻石C18(4.6mm×250mm,5μm)柱为色谱柱;甲醇-0.2%磷酸溶液(45:55)为流动相，检测波长为280nm;柱温为40?。理论板数按黄芩苷(C21H18O11)峰计算应不低于2500。 2.2对照品溶液的制备 精密称取经五氧化二磷减压干燥器中干燥36h的黄芩苷对照品适量，用甲醇制成每毫升含57μg的溶液，摇匀，即得。 2.3供试品溶液的制备 滴丸研碎，取约20mg，精密称定，置25ml量瓶中，精密加入甲醇20ml，超声处理30min，放冷，用甲醇定容至刻度，摇匀，精密移取1ml于10ml容量瓶中，甲醇定容至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液，即得。 2.4阴性对照溶液的制备 按照蒡芩慢咽滴丸的制备工艺制备不含黄芩的药粉,按供试品溶液的制备方法制成阴性对照品溶液。 2.5阴性干扰实验 将配置好的对照品、供试品及阴性对照溶液按上述色谱条件分别进样10μl，结果明，阴性样品在与黄芩苷对照品相应的位置上(约43min)无干扰峰出现,说明处方中其它药味对测定结果无影响。以上3种溶液的色谱图见图1,3。 2.6线性关系的考察 精密称取黄芩苷对照品适量，用甲醇制成每毫升含57μg的溶液，分别精密吸取黄芩苷对照品溶液4，8，12，16，20μl，分别注 入液相色谱仪，测定。以进样量为横坐标，以峰面积值为纵坐标绘制标准曲线，其回归方程为Y=3994585.53X-13868，r=0.9995，结果表明，黄芩苷进样量在0.23,1.14μg范围内，进样量与峰面积呈良好的线性关系。 2.7精密度考察 取同一供试品溶液,重复进样5次,每次10μl，计算相对标准偏差,RSD为1.14%,表明精密度良好。 2.8稳定性实验 分别取放置4，8，12，16，24h的供试品溶液，测定黄芩苷的含量，以考察其稳定性。RSD为2.40%，表明供试品溶液至少在24h内稳定。 2.9重复性实验 取批号为20040205的蒡芩慢咽滴丸，研碎，取适量，6份，精密称定，依法制备供试品溶液，进行测定,计算黄芩苷的平均含量为100.15mg?g-1，RSD为1.06%，结果表明重复性良好。 2.10加样回收率实验 精密称取黄芩苷对照品适量，加入到已测知黄芩苷含量滴丸样品(批号:20040205，黄芩苷含量为100.15mg?g-1，详见重现性实验)中，按供试品溶液制备方法操作，制备供试品溶液，测定黄芩苷的含量，计算回收率，测定结果见表1。结果表明，本法准确可靠。表1黄芩苷回收率实验结果(略) 2.11样品含量测定 分别精密吸取对照品溶液及供试品溶液各10μl注入液相色谱仪中，测定了3批样品中黄芩苷的含量分别为100.20，99.96，100.09mg?g-1。 3讨论 本实验曾考察以甲醇-水(1?1.1)、乙腈-0.5%磷酸二氢钾溶液(用磷酸调pH值为3.2)(32?68)为流动相，但是黄芩苷色谱峰与本制剂中其它药味的色谱峰的分离效果较差，最终选择了《中国药典》中测定黄芩苷的含量的流动相甲醇-0.2%磷酸溶液(45?55)，使制剂中各成分与黄芩苷分离。 黄芩为蒡芩慢咽滴丸的君药，且黄芩中黄芩苷的含量较高，以其作为含量测定指标，能够反应该制剂的质量。因此本品以黄芩苷的含量作为含量测定的指标是合理的。 【参考文献】 ,1,国家药典委员会.中国药典，?部,S,.北京:化学工业出版社，2005:48，211，265.