结肠术后患者肠道通透性及炎症反应的观察

结肠术后患者肠道通透性及炎症反应的观察 KKME---专业医学搜索引擎 结肠术后患者肠道通透性及炎症反应的观察 作者:刘春安，冼沛中，康 旭,许庆文，李有柱 作者单位:广东医学院附属医院胃肠外科，广东湛江 524001 【摘要】 目的 观察结肠手术后患者肠道通透性及炎症反应，探讨肠黏膜通透性(乳果糖/甘露醇比值 L/M)、APCHE?评分、白介素 6(IL 6)、白细胞(WBC)计数与外周血中大肠杆菌DNA阳性率的关系。 2005年2月至2006年6月我科收治的结肠癌行手术患者48例，检测术前和术后第3天、第7天的L/M比值、APCHE?评分、IL 6、WBC数和外周血中大肠杆菌DNA，并根据外周血大肠杆菌DNA 的PCR阴、阳性分组行各指标的比较。结果 术后第3天的尿L/M比值、APACHE?评分、IL 6、WBC数均较术前和术后第7天为高，差异有统计学意义(P<0.01);术后第7天的尿L/M比值、IL 6、WBC数均高于术前，差异有统计学意义(P<0.01)。PCR阳性(例次)组的L/M比值、APACHE?评分、IL 6、WBC数高于与PCR阴性(例次)组，差异有统计学意义(P<0.01)。结论 结肠手术后第3天肠黏膜通透性增加，炎症反应明显;细菌易位与肠黏膜通透性和炎症反应有关。 【关键词】 结肠;通透性;大肠杆菌;炎症反应 基金项目:2005年湛江市科技攻关项目(湛科[2005]43号) Intestinal permeability and inflammatory response following colonic surgery KKME---专业医学搜索引擎 LIU Chun an, XIAN Pei zhong, KANG Xu, XU Qing wen, LI You zhu Department of Gastrointestinal Surgery, Affiliated Hospital of Guangdong Medical College, Zhanjiang 524001, China Abstract: Objective To observe the intestinal permeability and inflammatory response after colonic surgery, and to study the relationship of intestinal permeability, serum IL 6 level, APACHE II score and WBC count to the percentage of Escherichia coli (EC) DNA from peripheral blood.Methods Forty eight patients with colon carcinoma underwent colonic surgery from February 2005 to June 2006. The ratio of urinary lactulose to mannitol (L/M), serum IL 6 level, APACHE II score, WBC count and EC DNA from peripheral blood were determined before surgery and on the 3rd and 7th postoperative day (POD).Results L/M ratio, serum IL 6 level, APACHE II score, and WBC count on the 3rd POD were superior to those before surgery and on the 7th POD (P<0.01), and so did in EC DNA positive patients as compared with EC DNA negative subjects (P<0.01).Conclusion The intestinal permeability and inflammatory response are evident on the 3rd POD, which is related to the bacterial colonization. Key words: colon; permeability; Escherichia coli; inflammatory response 胃肠道是人体内最大的细菌库，随着胃肠道下行，细菌数量 KKME---专业医学搜索引擎 和种类逐步增加，结肠粪便内细菌数可高达108,1011/L，其中大肠杆菌是在人体肠道内寄居的正常和优势菌群，正常肠道功能的维持依赖肠道免疫屏障、化学屏障和机械屏障。结肠癌手术后，肠道的完整性及黏膜受到损伤，肠道的机械屏障和免疫屏障遭到损害，肠道的通透性发生改变、免疫力下降，肠道内的大肠杆菌可较容易的通过肠黏膜进入到淋巴和血循环系统，导致大肠杆菌易位。本文是对结肠癌手术后肠道通透性及炎症反应的观察。 1 资料与方法 1.1 一般资料 2005年2月至2006年6月我科收治的结肠癌手术行一期吻合的患者(剔除并发肠梗阻和严重的呼吸系统、泌尿系统疾病)48例(男35例，女13例，年龄35,78岁)，其中行右半结肠切除术12例，横结肠切除术8例，左半结肠切除术17例，乙状结肠癌根治术11例;均术中无输血和术后行常规治疗。 1.2 方法 1.2.1 观察时间 48例结肠癌患者入院后于肠道准备前和手术后第3天(肛门已排气)、第7天检测以下观察指标(外周血中大肠杆菌DNA只在术后第3天和第7天测定)。 1.2.2 观察指标 (1)PCR技术检测外周血中大肠杆菌DNA阳性率:按照树脂型TM质粒DNA小量提取试剂盒(北京赛百盛基因技术有限公司)提 KKME---专业医学搜索引擎 供的方法提取患者血中大肠杆菌DNA。引物1:采用文利平等[1]报道的碱基序列，扩增产物为标准大肠杆菌ATCC 25922的Β 半乳糖苷酶基因片段，长度为798bp，上游5' CTTTGCCTGGTTTCCGGCACCAG AA 3'，下游5' AACCACCGCACGATAGAGATTCG GG 3'。引物2:采用Primer 5.0软件设计，扩增产物为所有细菌所共有的16SrRNA 基因片段，长度为985bp，上游5' GGGATAACTACTGGAAACGG 3' (137)，下游5' CTGGCAACAAAGGATAAGG 3'(1121)。两引物的合成均由上海生工生物工程技术服务有限公司完成，PCR扩增根据宝生物工程(大连)有限公司试剂盒提供的方法配反应体系。在紫外灯下观察电泳结果，两对引物中有任一对扩出阳性结果即判定为阳性，并按此PCR阴性和阳性分为PCR阴性(例次)组和PCR阳性(例次)组。(2)尿乳果糖/甘露醇(L/M)值:按照刘放南等[2]的方法用高效液相色谱仪测定。(3) APACHE?评分:参照 Knaus等[3]的方法，计算APACHE?评分。(4)血清IL 6水平:按照ELISA试剂盒 (DIACLONE公司) 方法检测。(5)外周血白细胞计数。 1.3 统计学处理 数据用(x?s)表示，应用SPSS11.0软件系统进行统计分析。采用SNK q检验和t(t′)检验。 2 结果 2.1 术前、术后3d及术后7d尿L/M比值、APACHE?评分、IL 6、WBC数的比较 KKME---专业医学搜索引擎 术后第3天的尿L/M比值、APACHE?评分、IL 6、WBC数均较术前和术后第7天为高，差异有统计学意义(P<0.01);术后第7天的尿L/M比值、IL 6、WBC数均高于术前，差异有统计学意义(P<0.01)，见表1。表1 48例手术前和手术后第3天、第7天各项指标的比较(略) 2.2 PCR阴、阳性(例次)组L/M比值、APACHE?评分、IL 6 、WBC数的比较 PCR阳性(例次)组的L/M比值、APACHE?评分、IL 6、WBC数高于与PCR阴性(例次)组，差异有统计学意义(P<0.01)，见表2。表2 PCR阴、阳性(例次)组L/M比值、APACHE?评分、IL 6 、WBC数的比较 (略) 3 讨论 随着人们对肠黏膜屏障研究的深入，越来越感到外科感染不单纯来源于外源性感染，机体本身的内源性感染可能更重要，而内源性感染的关注重点多倾向于肠道，特别是结肠内含有大量细菌。结肠手术对机体的影响是多方面的，一方面，手术、麻醉创伤的刺激引起内脏血管痉挛，加上手术中的失血以及手术应激使肠道处于缺血缺氧状态，导致肠黏膜屏障障碍，引起肠黏膜通透性增高，甚至发生细菌移位;另一方面，手术、麻醉创伤导致的机体免疫下降、炎性介质作用、内毒素的吸收以及肠道菌群的紊乱，进一步加重了肠黏膜的损坏。 本文观察到术后第3天WBC数与术前比较有显著升高(P<0.01)，术后第7天WBC数比术后第3天有显著降低，但与术前 KKME---专业医学搜索引擎 比仍高，说明术后7d进行常规用药后还不能恢复到正常，与全竹富等[4]观察到腹部手术后第1天WBC均升高，超过12.0×109/L，常规用药患者需7d后恢复正常不同，这可能与我们术后用药的量有关。另外，本文还观察到IL 6术后第3天和第7天较术前有显著升高(P<0.01)，第7天与第3天比较有显著降低;APACHE?评分术后第3天均较术前和术后第7天显著升高(P<0.01)，且术后第7天与术前比较，差异无统计学意义(P>0.05)。这说明机体在逐渐恢复。因此作者认为手术和麻醉创伤会导致机体的应激反应，随着肠道功能的恢复和一般情况的改善，炎症反应可逐渐减轻，经积极治疗可缩短炎症反应时间。 唐朝晖等[5]对胃肠恶性肿瘤患者术后肠通透性的观察发现，术后肠通透性明显增高。本组术后第3天肠通透性已明显增高，术后第7天已接近正常。作者认为这可能因为L/M比值主要反映近端小肠对乳果糖、甘露醇的吸收情况，早期L/M比值增高可能与机体遭受手术创伤和机体免疫功能下降有关，但随着肠道功能的恢复和炎症反应的减轻，L/M比值是可以恢复正常的。 Kane等[6]将PCR技术应用于临床患者全血细菌DNA的检测，开创了临床肠道细菌易位研究的新局面。从理论上说，如果发生肠道细菌易位，只要血中存在微量细菌DNA，无论是活菌或已裂解的细菌碎片，应用PCR技术都可检测到。乔治等[7]报道急危重患者细菌的PCR阳性率为62.5%(10/16)。本组术后PCR阳性率为33.33%(32/96)，较乔治报道的低，而且PCR阳性(例次)组的L/M比 KKME---专业医学搜索引擎 值、APACHE?评分、IL 6、WBC计数明显高于PCR阴性(例次) 组，其因可能是本组患者虽然为结肠手术,但均为择期手术，经过了 充分的肠道准备，创伤、炎症反应较急危重患者相对较轻有关，当然 也不能排除与所选择的扩增引物不同有关。 因此，结肠手术后会导致机体的炎症反应和肠道通透性增 加，严重者可能会出现肠道细菌易位，故术后应早期采取积极以 减轻炎症反应，保护肠黏膜预防细菌易位。 【参考文献】 [1]文利平,唐伟松,蒋朱明,等.用三对引物检测血液中细菌 DNA的方法学[J].中国医学科学院学报,2000,22(6):592 594. [2]刘放南,谭力,罗楠. 高效液相色谱法检测尿乳果糖/甘露 醇排出比值及成人正常值[J]. 肠外与肠内营养,2004,11(4):237 238. [ [3]KNAUS W A, DRAPER E A, WAGNER D P, et al. APACHE?: a severity disease classification system[J]. Crit Care Med,1985,13(10):818 829. [4]全竹富,杨种,李宁,等.术后早期肠道通透性改变及其与全 身炎症反应的关系[J].肠外与肠内营养,2002,9(2):71 74. [5]唐朝晖,胡元龙.胃肠恶性肿瘤病人术后早期肠内营养支 持对肠粘膜通透性的影响[J].临床外科杂志,2001,9(4):244 245. [6]KANE T D,JOHNSON S R,ALEXANDER J W, et al. Detection of intestinal bacterial translocation using PCR [J].J Surg KKME---专业医学搜索引擎 Res,1996,63(1):59 63. [7]乔治,黎沾良,李基业,等.腹部外科手术后肠道细菌移位及肠道屏障的研究[J].中华急诊医学杂志,2004,13(10):664 666. 可以免费下载论文的浏览器---文献检索浏览器 www.wenxianjiansuo.com