【doc】鲎试剂法用于脑活素针剂细菌内毒素的检测

【doc】鲎试剂法用于脑活素针剂细菌内毒素的检测 鲎试剂法用于脑活素针剂细菌内毒素的检 测 国生化药物杂志ChineJo!l.f璺堡型!!!堕璺塑生蔓鲞蔓! TheScavengingActiontoOH'andoFofGy.Glucoside ZhangErxian,YuLijun,XiaoXiang 砷Bioto~,,Sl~ntc,u(细515063) 牛7) Ai06tractGy.wasresearchedforscavengingactiveoxygenradicalinthispaper.Theresultssh owed thatallthesetotalGlueosideCapsule,Glucesidetabellol,andJiaogulanjianmeitabloidcould scavenge OH'andO7.Theamountofthemforscavenging50OH'werefoundtobe1.328mg,7.939mg and66.055mg. Keyword~Naturalproducts;Activeoxygen;Chemiluminescence;Ggaostemma~enta池m(曲.) Makbzo;Saponin 7一?c 鲎试剂法用于脑活素针剂细菌内毒素的检测 . 墨塑竖兰旦 广东省药品检验所(广州510180)R王7.7 摘要本文采用增强或抑制试验,对进口的瞄活紊针剂进行了细菌内毒素检测考察据三批 实验结果表明,脑活素针剂80倍稀释液对灵敏度为O.125Eu/ml的鲎试剂无增强或抑制作用,故本 品适用于鲎试剂作内毒素检查 关键词鲎试剂;细菌内毒素;脑活素 众所周知,鲎试剂能与细菌内毒素发生 非常灵敏的特异性反应.但是,鲎试剂与内毒 素的反应是一个十分复杂的酶促反应,易受 到样品中某些成分的干扰而出现假阳性或假 阴性结果.我们按中国药典"细菌内毒素检查 法""规定,并参照美国药典2l版的"细菌内 毒素检查法"中的增强或抑制试验的基本原 理,对进口的脑活素针剂中的内毒素进行 检测考察. 材料与方法 一 ,材料 1.细菌内毒素国家品,中国药品生 收稿日期1994—02—04修回日期1994,05—16 物制品检定所提供;批号:936;1000Eu/支 2.鲎试剂:厦门鲎试剂广出品;灵敏度 0.125Eu/ml;批号:920728;无热原水,批号: 920705. 3.器皿:带塞磨口刻度小试管;注射器; 恒温水浴等. 4.样品:脑活素针,奥地刹依比威大药 厂出品.批号:303049;302937}303950. :,弓=法 鲎试剂法,按中国药典"细菌内毒素检查 法"操作,采用鲎试剂与细菌内毒素的凝集反 应,以180度翻转凝集物不流动为阳性(+), 流动为阴性(一). ? 27? 中国生化药物杂志ChineseJournalofBiochemicalPharmaceufics1994年第l5卷第期 结果与讨论 一 ,脑活素针剂的细菌内毒素限量计算 参考厂方提供的脑活素针剂热原试验的 家兔法剂量为1.5ml/kg(M)和我国细菌内毒 素标准品的致热阈10Eu/kgCK);计算出脑活 素针剂理论限值(E). e一一K M一15ml=e.sum一 ./….…… =,增强抑制试验 用合格的鲎试剂对脑活素进行有无增强 或抑制鲎试剂对内毒素凝集的试验,求出了 其最大有效稀释(MVD)?. 1.用无热原水把参考标准内毒素稀释 成一系列2倍稀释度的内毒素溶液,然后与 鲎试剂反应(置37C水沿中60土20min). 2.设所用鲎试剂标示的灵敏度:一 0.125Eu/ml,脑活素的最大有效稀释如下: MVD—E-P 一 倍 E:脑活索针剂理论限值Eu/ml,P:暗活素针剂 家免法剂量ml/ml;^:鲎试剂标示灵敏度Eu/ml 3.样品稀释:用Rx表示脑活素稀释液 的内毒素浓度;下标x表示内毒素浓度;脑 活素针剂(c6). 0-5m1C~+4?5ml(水)一i.0C0……c; 1?0mlC~+3-0mj(水)一4.0co……c3 1_0mlCo2+7?0ml(水)一丽it…'c.(MVD) l?0lRtol?0mlC~一R.18.0co……cJ 1.0mlC,+l-0.一j/i1…c2 1-Om1c+1.Om1c口—R./~6co……ca 1?0c1?0mlCo~R?,,丽it…'c 用k--0.125Eu/ml鲎试剂与上述两个系 列稀释液反应,每一稀释液作4支重复反应 管,结果如下表: 4.从上表结果表明,一0.5^,c5一. c5—2,样品稀释80倍时对灵敏度 0.125Eu/ml的鲎试剂反应没有增强抑制作 ? 248? 用,可用鲎试剂法作内毒素检查 5.本实验所用鲎试剂的灵敏度值一 0.125Eu/ml,样品的MVD与鲎试剂的反应