盐酸苯达莫司汀的合成

盐酸苯达莫司汀的合成 Chinese Journal of New D rugs 2007 Vol 16 No. 23 . 中国新药杂志 2007 年第 16 卷 第 23 期 盐酸苯达莫司汀的合成 高丽梅 汪燕翔 宋丹青 中国医学科学院中国 协和医科大学医药生物技术研究所 北京 100050 摘要 目的 : 合成盐酸 苯达莫司汀 。方法 : 以 2 4 2 硝基氯苯为起始原料 经取代 、 二 酰化 、 还原 、 还原 、 环合 、 水解 、 取代 、 核磁共振氢谱 、 成盐等 9 步反应制得目标化 合物 。结果 : 目标化合物的质谱 、 红外光谱均与文献报道相 吻合 总收率为 33. 5 。结论 : 本路线操作简单 成本较低 适合工业化生产 。 关键词 盐酸苯达莫 司汀 抗肿瘤 药物合成 中图分类号 R979. 1 R73 文献标识码 B 文章编号 1003 - 3734 2007 23 - 1960 - 03 Syn thesis of bendam ustin e GAO L i2 ei WANG Yan 2xiang SONG Dan 2qing m Institu te of M ed icina l B iotechnology Ch ina A cadem y of M ed ica l S cience and Pek ing U n ion M ed ica l College B eijing 100050 Ch ina Abstract O bjective: To synthesize bendam ustine. M ethods: The target compound was synthe2 sized from 2 4 2dinitro 2chlorobenzen as a starting material via nine step s including substitution reduction acylation cyclization reduction substitution hydrolization and salification. Results: The structure of the target compound was confir ed by M S H 2 1 m . NMR IR analysis The total yield of bendam ustine was 33. 5. Conclusion : This cost2saving and simp lified m ethod can be used in the industrial manufacture. Key words bendamustine antitumor synthesis 盐酸苯达莫司汀 bendam ustine hydrochloride 合用药 。临床应用表明 其单独治疗或联合用药治是 由 M erckle 公司开发的烷化抗肿瘤药物 于 2003 疗乳腺癌 疗效确切 能明显 降低复发率与死亡率 年 10 月在德国上市 商品名为 R ibomustin。 Salm e2 且不 良反应小 安全性好 。 报道 我们以 2 42 硝基氯苯为原 1,3 dix公司得到授权在 美国和加拿大开发 商品名为 综合文献 二Treanda SDX 2 目前正处于 ? 105 经取代、还原、 酰化、 环合、还原、 取代、 成盐等 水解、期临床 。临床用 料 于乳腺癌 、 非霍奇金淋巴瘤 慢性淋巴细胞性白血病 、 9步反应合成目标化合物。 此路线原料易得 反应条件 期 霍奇金病 、 ?,? 、 浆细胞瘤的单独治疗或联 温和 成本较低 易于规模化生产。合成路线见图 1。 图 1 苯达莫司汀的合成路线 定 固体 KB r压片 质谱用 M SDX300 和 VGZAS 2F 实验部分 质谱仪测定 核 磁共振谱用 JEOL FX 100Q 测 熔点用国产 YRT 3 型熔点测定仪测定 温度 定 400H z 溶剂为二甲亚砜 DM SO 荧光检测计未经校正 红外光谱用岛津 IR 455 型红外仪测 用上海顾村仪器厂的三用紫外分析仪 一般薄层 — 1960 — Chinese Journal of New D rugs 2007 Vol 16 No. 23 . 中国新药杂志 2007 年第 16 卷 第 23 期 层析 TLC 采 用 E 2 erck 公 司 预 铺 硅 胶 铝 箔 卷 。 M Pa 下进行催化氢化 6 h滤掉催化剂进行减压浓缩 所用试剂为 A cros公司和国产分析 纯或化学纯的 得白色固体 加入乙酸乙酯回流 5 m in 过滤 弃去试剂 。 滤渣 。 将 乙 酸 乙 酯 溶 液 浓 缩 至 少 量 白 色 固 体 析1 N 2 基 2 4 2 硝基苯 氨 2 甲 2 二 出 冰箱中放置过夜 。次日 抽滤 得到无色结晶 将 30的甲胺乙 醇 150 mL 溶液置于反应瓶 6 称重 1. 87 g。收率 : 72 mp: 131 , 132 ? 文 以下 分批加入 2 4 2 硝基氯苯 30 g 献 : 收率 97. 3 mp: 130. 5 , 132 ? 。 M S2ES I 2中 于 35 ? 二0. 15 mol 体系剧烈放热 加毕 搅拌 1. 5 h 板检反 m / z : 262. 4 M H 。应完全 展开剂为乙酸乙酯 2 乙烷 1 ? 大量黄 环 1 6 1 2 基 2 2 4 π2 酸乙酯基 2 2 N 2 2 π羟 基 甲 2 丁 5N 二 2色固体出现 降 至室温 抽滤 得黄色固体 2 称重 乙基 2 H 2 并咪唑 7 1 苯 128 g。收率 96 mp: 177. 5 ,179 ? 文献 : 收率 化合物 6 2. 61 g 0. 01 mol 溶于 15 mL 水中 89 mp: 178 ,180 ? 。 加入少量的醋酸钠中和 再加 5 mL 乙酸进行酸化 2 2 2 基 2 2 基 2 2 基苯氨 3 氨 4硝 N甲 将体系降温至 5 ?保持此温度 滴加环氧乙烷 2. 5 将化合物 2 11. 82 g 0. 06 mol 溶于甲醇 500 mL 0. 05 mol 滴毕 5 ?放置 5 h 20 ?放置过夜 。mL 中 将体系缓慢加热至 50 ?有少量固体不溶 用 4. 55的 K2 CO3 水溶液进行中和 用氯仿提取 为黄色悬浊液体 。后将九水合硫化钠 38. 4 g 0. 16 饱和氯化钠溶液洗 1 遍 无水硫酸钠干燥 。浓缩得mol和碳酸氢钠 13. 44 g 0. 16 mol 溶于水 150 浅棕色胶状物 7称重 3. 3 g。mL 中 将此溶液缓慢滴加至反应体系中 滴加时间 2 7 一水合甲基 2 2 4 π2 酸基 2 2 N 2 2 π氯乙 2 丁 5N 二约 1. 5 h。滴加完毕后 缓慢升温使回流 0. 5 h板检 基 2 H 2 并咪唑盐酸盐 1 1 苯反应完全 展开剂为乙酸乙酯 。将反应液倒入水 将上述油状物溶于氯仿 30 mL 中 0 ,5 ? 滴 1 800 mL 中 放置过夜 次日瓶底 10 mL 保持 0 ,5 ?搅拌 1 h。室温反体析出 抽有大量红褐色晶 加二氯亚砜 滤 50 ?下真空干燥 3 h 得红褐色固体 应 1 h 浓缩 。加入 30 mL 浓盐酸 90 , 95 ?加热3称 重 8. 8 g。收 率 : 88 mp: 177 , 178 ? 文 3 h。过滤 滤液浓缩 得油状物 将此油状物倒入 10 1献 : 收率 87 mp: 176 ,179 ? 。 mL 水中 得到浅棕色结晶 2. 6 g。粗品用水 10 mL 3 5 2 2 2 氨基 2 2 基苯基 氨基 4 甲 5硝 5氧 重结晶 析出无色结晶 1 称重 2. 4 g。收率 : 58 将2 2 代戊酸 化合物 3 1. 67 g 0. 01 mol 加入到三氯甲烷 2 mp: 150 , 151 ? 文 献 : 收 率 85 mp: 148 , 50 mL 中 在保持 20 ?的情况下完全溶解 搅拌分 151 ? 。M S2ESI m / z : 358. 3 M H 。HNMR 1批加入己二酸酐 1. 45 g 0. 01 mol 滴毕 加热回流 和 IR 与文献 2 报道吻合 。0. 5 h后即有黄色固体析出 反应 2 h板检反应完全 展开剂为乙醇 。冷却 抽滤 得黄色结晶 4 称重 讨 论 22. 7 g。收率 : 96 mp: 170. 5 ,171. 5 ? 文献 : 从起始原料到合成最终产物共需 9 步反应 总收率 78 mp: 170. 5 ,171. 5 ? 。 收率 33. 5 。我们对以下几方面进行了深入的研4 1 2 基 2 2 4 π2 酸乙酯基 2 2 基 2 H 2 并 甲 2 丁 5硝 1 苯 究 : ?在化合物 2 至化合物 3 的还原过程中 反应咪唑 5 结束后加水量很大 我们对水的体积进行了研究 发 将化合物 4 2. 81 g 0. 01 mol溶于乙醇 15 mL 现减少水的用量会影响产率 但再加大对产率贡献中 将浓硫酸 0. 8 mL 滴加入混合液中 完全溶解 搅 也不大 。 ?在化合物 5 至化合物 6 的还原过程中 拌下加热回流 3 h缓慢冷却到 35 ,40 ? 不可过冷 我们发现用铁粉和盐酸还原不如兰尼镍完全 且产否则固体提前析出 对以后的操作造成不便 将上述 率较低 。 ?在化合物 6 至 7 的过程中 用碳酸钾中反应液倒入 K2 CO3 水溶液中 1. 7 g K2 CO3 /20 mL 和很重要 必须确保 pH 7 ,7. 3低于 7 收率很低 H2 O 得到 2. 9 g黄色结晶 5。收率 : 99 mp: 109 , 高于 7. 3 则影响纯度 从而导致最终产物无法纯化 。 2110 ? 文献 :收率 68 mp: 109 ,110 ? 。 ?在制备化合物 8 的时候 我们通过增加氯化亚砜5 1 2 基 2 2 4 π2 酸乙酯基 2 2 基 2 H 2 并 甲 2 丁 5氨 1 苯 的量 是文献 2 的 3. 5 倍 来缩短反应时间 从文咪唑 6 献 2 的 24 h变为 1 h 从而有效地防止不良反应 化合物 5 2. 91 g 0. 01 mol溶于甲醇 100 mL 的发生 有利于目标产物的纯化 。 5中 加入催化剂兰尼镍 0. 03 g 常 温 约 3. 03 × 10 下转第 1970 页 — 1961 — Chinese Journal of New D rugs 2007 Vol 16 No. 23 . 中国新药杂志 2007 年第 16 卷第 23 期 取 得到的供试品溶液 分别精密量取 20μ 注入高 L 了乙腈作为蛋白沉淀剂 。效液相色谱仪 。另取 CuB 对照品溶液 同法测定 。 本法较酶解蛋白然后测定的方法更为简便省 7记录色谱峰面积 计算得到 3 批样品的含量分别为 : 时 。蛋白纳米粒样品经有机溶剂沉淀提取后可批号 20061024为 100. 2 批号 20061101 为 9916 直接进样测定 适合强脂溶性药物蛋白纳米粒制剂批号 20061110为 100. 7 RSD 0. 5 。 的分离检测 。 作者简介 王宁 1982 - 女 硕士研究生 。联系电话 : 讨 论 024 23986316 E2 mail: wangning_9728163. com。 通讯作者 邓意辉 1964 - 男 教授 博士生导师 主要 本实验采用了文献报道的 CuB 的最大吸收波 从事药物靶向新剂型的研究 。联系电话 : 024 23986316长作为检测波长 但文献报道的色谱条件多为甲醇 2 5 6 mail: dds2 2happy163. com。 E2 666水流动相系统 所得色谱峰有拖尾 理论塔板数较低 。因此本实验采用了乙腈 2 系统 并加入磷 水 参 考 酸 改善峰形的同时缩短保留时间 提高了理论塔板 1 方文 献 新德 . 葫芦素类成分的化学与生物活性的研究进展 J . 国数 。在其他色谱条件相同的情况下 作者考察的甲 外医学药学分册 . 1985 12 3 : 132 - 135.醇 2 62 ? 的流动相 理论塔板数仅为 2 875 而 水 38 2 JAYAPRAKASAM B SEERAM NP NA I MG Anticancer and R .本实验所采用的流动相理论塔板数提高到 8 212有 antiinflammatory activities of cucurbitacins from Cucu rbita and re2利于 CuB 的分离检测 。 ana J . Cancer L ett 2003 189 1 : 11 - 16. 由于蛋白纳米粒是一种比较特殊的制剂 所以 CK H SP NKUCH 2SCHM ITT B STREBHARDT K et 3 WARTL I本方法的关键之处在于选择一种合适的方法将蛋白 . al Tumour cell delivery of antisense oligonucleotides by human serum album in nanoparticles J . J Con trol R elease 2004 96与药物分离开来 避免其对测定产生干扰 。考虑到 3 : 483 - 495.CuB 是一种脂溶性极强的物质 本实验选定有机溶 4 M ICHA JP GOLDSTE I GH B I N . RK CL et a l Abraxane in the剂沉淀蛋白的方法来处理样品 有机溶剂可破坏蛋 treatm ent of ovarian cancer: the absence of hypersensitivity reac2 白的水化层 使之发生沉淀反应 。一方面 制剂中的 tions J . Gynecol O ncol 2006 100 2 : 437 - 438.蛋白被沉淀分离 另一方面脂溶性极强的药物充分 5 黄璐琦 姚三桃 . 高效液相色谱法测定异叶马交儿根中葫芦素溶解于有机溶剂中而被提取出来 。 B 的含量 J . 中草药 . 1994 25 10 555. 在本法建立的过程中 作者考察过甲醇 、乙腈以 6 李超英 候世祥 杨凯 等 . 血浆中葫芦素 B 的高效液相色谱测及无水乙醇 3 种蛋白沉淀剂 。其中甲醇产生的蛋白 定方法研究 J . 中国药学杂志 2001 36 8 : 557 - 559.沉淀量较少 且不易过滤除去 有可能沉淀不完全 7 王恺 马光辉 . 白蛋白药物载体的制备及表征 J . 过程 学报 2004 4 2 : 156 - 159.无水乙醇沉淀迅速 但生成较大的团块 不利于药物.