巨噬细胞吞噬鸡红细胞的实验报告

巨噬细胞吞噬鸡红细胞的实验 巨噬细胞吞噬实验&沉淀实验实验报告 实验二 一 巨噬细胞吞噬功能实验 【原理】巨噬细胞是单核吞噬细胞系统的主要细胞，局域活跃的吞噬功能。吞噬细胞受抗原刺激后活化，可使吞噬功能明显增强。 在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后，再给小鼠腹腔注射鸡血红细胞，30min后处死小鼠，取出腹腔液，以冷亚甲蓝染色，显微镜下计数吞噬红细胞的百分数，及观察吞噬细胞内鸡红细胞的数目，以判断吞噬细胞的杀伤能力，由此间接地测定机体的非特异性免疫水平。 【方法】体内法: (1)实验前3小时，小鼠腹腔注射6%无菌淀粉液1ml，诱导巨噬细胞渗出至腹腔中。 (2)实验时，每只小鼠注射鸡红细胞1ml，轻柔腹部，使其在腹腔中分布均匀，利于吞噬。 (3)30min后，将小鼠拉颈处死，固定，打开腹腔暴露肠管，用载玻片轻擦腹腔，使腹腔液均匀涂于载玻片过，再滴一滴0.03%冷亚甲蓝溶液，盖上盖玻片。 (4)高倍镜下进行观察，计数。 【结果】 【分析】 在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后，再给小鼠注射鸡红细胞后镜检腹腔液，可观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象，并且可看到部分鸡红细胞聚集到吞噬细胞附近。 二 沉淀反应 双向琼脂扩散实验 【原理】将可溶性抗原与相应抗体分别加入琼脂板上的孔内，二者均可发生扩散，并且随扩散距离的增大浓度降低，在抗原抗体比例适宜处形成可见的沉淀线。本实验是定性实验，常用于分析抗原抗体的纯度关系以及相互关系。 【方法】 (1)制板:将熔化的1%琼脂加在载玻片上约5ml (2)打孔:待琼脂凝固后，将载玻片置于打孔样板上，用打孔器打孔 (3)加样:在中央孔内加抗体，上下两孔加抗原1，左右加抗原二，每孔加10μl (4)结果观察:将琼脂板置于湿盒，37?一天后观察结果。 【结果】 在中央孔与添加抗原1的孔之间出现沉淀线，有抗原抗体反应，为阳性反应，说明抗原1与抗体相对应。中央孔与添加抗原2的孔之间没有沉淀线，说明抗原2与抗体之间不相对应。 【分析】抗体与抗原发生扩散时，随扩散距离的增大浓度降低，在抗原抗体比例适宜处形成可见的沉淀线。当有沉淀线出现时， 说明有抗原抗体反应。 琼脂铺板时要一次铺成，并且铺设均匀。 打孔时要注意垂直打孔，注意不要有裂隙产生。 篇二:巨噬细胞吞噬细胞功能实验 实验一 巨噬细胞吞噬细胞功能实验 原理:巨噬细胞具有活跃的吞噬功能，能清除体内抗原物质及变性的细胞，在特异性及非特异性免疫中均起重要作用。巨噬细胞受抗原刺激后活化，可使其吞噬功能明显增强。此次实验我们用体内法来介绍巨噬细胞的吞噬功能。 体内法:在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后，再给小鼠腹腔注射鸡红细胞，30min后处死小鼠，取出腹腔液，以冷美兰染色，显微镜下计数吞噬鸡红细胞的百分数，及观察巨噬细胞内被杀死而染为紫色的鸡红细胞的形态、数目，以判断巨噬细胞的杀伤能力，由此间接地测定机体的非特异性免疫水平。 方法:(1)试验前3天，小白鼠腹腔注射6%无菌淀粉液1ml，诱导巨噬细胞渗出至腹腔中。 (2)实验时，每只小鼠腹腔注射鸡红细胞1ml，轻柔腹部，使鸡红细胞在腹腔中分布均匀，利于吞噬。 (3)30min后，将小鼠拉颈处死，固定，打开腹腔暴露肠管，用滴管取出腹腔液，均匀涂布于载玻片上，然后再滴一小滴0.06%冷美兰溶液，盖上盖玻片 (4)高倍镜下进(来自:www.XIelw.Com 写 论文网:巨噬细胞吞 噬鸡红细胞的实验报告)行观察，计数。 实验结果: 100个巨噬细胞中已吞噬了鸡红细胞的 巨噬细胞的数目 吞噬百分率 = ——————————————————— ×100% 100个巨噬细胞 100个已吞噬鸡红细胞的巨噬细胞中 鸡红细胞的数目 吞噬指数 = ———————————————————×100% 100个已经吞噬了鸡红细胞的巨噬细胞 结果分析:正常值 吞噬百分率:62.77?1.38 吞噬指数:1.058?0.049 我们的实验结果偏低，原因可能是腹腔注射时没有完全注射到腹腔内，部分残留在腹腔壁上。 实验二 沉淀反应(双向琼脂扩散实验) 原理:双向琼脂扩散试验是定性实验。将可溶性抗原与相应抗体与相应抗体分别加入琼脂板上的孔内，两者均可扩散，在抗原抗体比例适宜处形成可见的沉淀线。如果不是相应的抗原与抗体，就不出现沉淀线。本试验常用于分析抗原抗体的纯度及相互关系。 方法:(1)将熔化的1%琼脂加在玻片上，3ml/板。 (2)待琼脂凝固后，在板上打孔。 (3)中央孔加抗体，上下孔加抗原1，左右孔加抗原2，每孔10μl。 (4)将琼脂板置于湿盒内，37? 24h后观察结果。 结果:在中央孔与周围孔之间，如出现沉淀线，则为阳性反应，提示有相应抗体与抗原反应。 结果分析:(1)琼脂铺板应一次铺成，均匀平滑。 (2)打孔时要垂直打孔，防止孔壁破裂。 (3)加样时避免样品量过多溢出，影响沉淀线的生成。 篇三:小吞噬实验报告 篇一:巨噬细胞吞噬实验&沉淀实验实验报告 实验二 一 巨噬细胞吞噬功能实验 【原理】巨噬细胞是单核吞噬细胞系统的主要细胞，局域活跃的吞噬功能。吞噬细胞受抗原刺激后活化，可使吞噬功能明显增强。 在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后，再给小鼠腹腔注射鸡血红细胞，30min后处死小鼠，取出腹腔液，以冷亚甲蓝染色，显微镜下计数吞噬红细胞的百分数，及观察吞噬细胞内鸡红细胞的数目，以判断吞噬细胞的杀伤能力，由此间接地测定机体的非特异性免疫水平。 【方法】体内法: (1)实验前3小时，小鼠腹腔注射6%无菌淀粉液1ml，诱导巨噬细胞渗出至腹腔中。 (2)实验时，每只小鼠注射鸡红细胞1ml，轻柔腹部，使其在腹腔中分布均匀，利于吞噬。 (3)30min后，将小鼠拉颈处死，固定，打开腹腔暴露肠管，用载玻片轻擦腹腔，使腹腔液均匀涂于载玻片过，再滴一滴0.03%冷亚甲蓝溶液，盖上盖玻片。 (4)高倍镜下进行观察，计数。 【结果】 【分析】 在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后，再给小鼠注射鸡红细胞后镜检腹腔液，可观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象，并且可看到部分鸡红细胞聚集到吞噬细胞附近。 二 沉淀反应 双向琼脂扩散实验【原理】将可溶性抗原与相应抗体分别加入琼脂板上的孔内，二者均可发生扩散，并且随扩散距离的增大浓度降低，在抗原抗体比例适宜处形成可见的沉淀线。本实验是定性实验，常用于分析抗原抗体的纯度关系以及相互关系。 【方法】 (1)制板:将熔化的1%琼脂加在载玻片上约5ml (2)打孔:待琼脂凝固后，将载玻片置于打孔样板上，用打孔器打孔 (3)加样:在中央孔内加抗体，上下两孔加抗原1，左右加抗原二，每孔加10μl (4)结果观察:将琼脂板置于湿盒，37?一天后观察结果。 【结果】 在中央孔与添加抗原1的孔之间出现沉淀线，有抗原抗体反应，为阳性反应，说明抗原1与抗体相对应。中央孔与添加抗原2的孔之间没有沉淀线，说明抗原2与抗体之间不相对应。 【分析】抗体与抗原发生扩散时，随扩散距离的增大浓度降低，在抗原抗体比例适宜处形成可见的沉淀线。当有沉淀线出现时，说明有抗原抗体反应。 琼脂铺板时要一次铺成，并且铺设均匀。 打孔时要注意垂直打孔，注意不要有裂隙产生。篇二:中性粒细胞吞噬功能试验(小吞噬试验) 中性粒细胞吞噬功能试验(小吞噬试验) 实验目的 1.熟悉中性粒细胞的吞噬作用原理和方法。 实验原理 血液中的中性粒细胞即小吞噬细胞，通过趋化、调理、吞入和杀菌等几个步骤，能吞噬和消化衰老、死亡细胞及病原微生物等异物，是机体非特异性免疫的重要组成部分。 实验材料 实验方法 片。 瑞氏染色法:取瑞氏染液数滴滴于上述血片上先染1分钟。然后加等量蒸馏水， 轻轻晃动混匀，继续染5分钟，水洗，用吸水纸吸干后镜检。 结果观察 油镜检查:寻找中性粒细胞，如果染色结果正确，可见细胞核及被吞噬的细菌染 成紫色，而粒细胞的细胞浆则为淡红色。 中性粒细胞吞噬试验 计数:1.吞噬百分率:观察100个中性粒细胞，计算其中吞噬有细菌的中性粒细胞数，计算出吞噬细胞百分率。 2.吞噬指数:观察100个中性粒细胞，计算其中被吞噬的细菌总 篇三:吞噬细胞吞噬功能检测实验 -----吞噬细胞吞噬功能检测实验 实验概要 本文介绍了吞噬细胞吞噬功能检测(assay of the phagocytic function of phagocyte)实验的基本原理、操作步骤及注意事项等。 实验原理 吞噬细胞具有对异物(细菌、绵羊红细胞、鸡红细胞等)吞噬和消化的功能，在机体非特异性免疫中发挥重要作用。 小鼠腹腔内注射硫代乙醇酸钠，可刺激巨噬细胞的聚集。四日后小鼠腹腔内注入羊红细胞悬液，一小时后解剖收集腹腔吞嗜细胞，染色、镜检可观察对羊红细胞的吞嗜现象。通过计算吞嗜百分比或吞噬指数可测定吞噬细胞的吞嗜功能。 主要试剂 1. pbs 缓冲液 2. 3,硫代乙醇酸钠 3. 1,羊红细胞悬液 4. 瑞氏染液 5. 甲醇 主要设备 1. 解剖器材 2. 注射器 3. 尖吸管 4. 橡皮吸头 5. 小试管 6. 载玻片 实验材料icr 小鼠实验步骤 1. 实验准备:用无菌注射器吸取3,硫代乙醇酸钠3ml，注射于小鼠腹腔内。 2. 四日后，注射1,羊红细胞悬液1ml 于小鼠腹腔内。 3. 注射1 小时后，将小鼠用颈椎脱臼法处死，解剖暴露腹腔，于腹腔靠上部位，用镊子轻轻夹起腹膜，将腹膜剪一小口，用尖吸管注入5ml 预温的pbs，同时用手反复揉搓腹腔约1—2 分钟，以便尽可能多地冲洗出小鼠腹腔的吞噬细胞。 4. 用尖吸管吸取腹腔液，置一洁净试管内。 5. 用尖吸管将腹腔液吹打均匀(尽量避免产生气泡)，吸取一滴滴于载玻片上，加盖玻片镜检。 6. 观察结果，也可以将腹腔液涂片，平放于湿盘内，37?，孵育30 分钟。取出涂片，用预温的pbs 冲洗3 次，然后用甲醇固定1 分钟，以瑞氏染液1 份加ph6.4 的pbs 2 份混匀后，滴于涂片上染色5-10 分钟，以蒸馏水冲洗(切勿先将染液倾去)后，待干，镜检。 7. 实验结果 观察小鼠腹腔巨噬细胞和中性粒细胞对羊红细胞的吞噬现象，计算吞噬百分比，即每100 个吞噬细胞中吞噬有羊红细胞的细胞数。也可用吞噬指数示，即将100 个吞噬细胞中所吞噬羊红细胞的总数除以100，即为吞噬指数。吞噬百分比和吞噬指数一般是平行的。 注意事项1. 充分揉搓腹腔，尽可能将吞噬细胞冲洗下来。 2. 用尖吸管吸取腹腔液时，尽量避开腹腔脏器，避免损伤血管引起出血，影响实验结果。