2016年药学
—HPLC法测定晕痛定胶囊中阿魏酸的含量
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HPLC法测定晕痛定胶囊中阿魏酸的含量
【摘要】 目的,建立晕痛定胶囊中阿魏酸的HPLC定量测定方法。方法, 选用岛津C18色谱柱,甲醇-0.5%冰醋酸,350:650)为流动相,1,,
波长为320nm,2,,流速1.2ml/min 。结果, 阿魏酸在0.0068,0.068μg范围内线性良好,回归方程Y=5E+07X-63525 ,Г=0.9983,0.0068,0.068μg,,加样回收率为94.23%。结论, 该方法准确、灵敏、方便。
【关键词】 高效液相色谱法 晕痛定胶囊 阿魏酸 量
晕痛定胶囊是河南龙都制药有限公司自行研制,由SFDA批准独家产权保护生产的抗偏头痛、眩晕首选药物。目前研究成果
明其中蜜环菌菌丝溶液发酵物与天麻有相似的药理作用,川芎中的川芎嗪和阿魏酸较明显地扩张冠脉、增加冠脉流量及心肌营养血流量,使心肌供氧量增加,促进心肌供氧和耗氧的平衡。此外,其有效成分阿魏酸,体外实验表现抗血栓形成作用,能缩短血栓长度、减轻血栓干重和湿重。目前该品的相关药品标准收载于《卫生部药品标准》新药转正标准,第二册),其中仅包括性状鉴别及蜜环菌发酵培养物与川芎的定更多精品文档,欢迎来我主页查询
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性鉴别。对其发挥主要药理作用的蜜环菌菌丝溶液发酵物、川芎嗪和阿魏酸的含量测定方法尚未建立。目前国内外相关文献尚无关于晕痛定中阿魏酸含量测定方法的报道,本研究主要以建立晕痛定胶囊中阿魏酸的HPLC定量测定方法为目的展开讨论。
1 仪器与试药
1.1 仪器
岛津LC-10AT色谱仪,岛津 SPD-10A紫外检测器,N2000色谱工作站。
1.2 试药
阿魏酸对照品,中国药品生物制品鉴定所,,晕痛定胶囊,由河南龙都制药有限公司提供,,批号,061207,甲醇,一级色谱纯乙醇,天津四友,,乐百氏纯净水,其它试剂均为
纯。
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2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱,岛津C18色谱柱。高效液相色谱仪,岛津,LC-10AT,检测器,岛津,SPA-10A,数据处理系统,N2000。流动相,甲醇-0.5%冰醋酸,350,650,,流速,1.2ml/min,检测波长,320nm,进样量,20ul,在上述色谱条件下,阿魏酸的保留时间为23min左右。理论塔板数按阿魏酸峰计算应不低于4000,分离度达到1.5以上。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取阿魏酸对照品25mg,置100ml棕色瓶中加甲醇-5%冰乙酸,1,4,,1,至刻度,得A溶液,再取A溶液10ml置100ml棕色瓶中加甲醇-5%冰乙酸,1,4,至刻度,摇匀,即得。
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2.3 供试品溶液的制备
取本品10粒,求出平均粒重,0.5g,,研细,精密称取一粒重,置具塞锥形瓶中,精密加入50%乙醇25ml,称定重量,超声处理30分钟,放冷,补足减失的重量,摇匀,放置,取上清液,过0.45μ滤膜,即得。
2.4 样品空白对照溶液的制备
精密称取蜜环菌菌丝溶液发酵物0.5g,研细,置具塞锥形瓶中,精密加入50%乙醇25ml,称定重量,超声处理30min,放冷,补足减失的重量,摇匀,放置,取上清液,过0.45μ滤膜,即得。
2.5 测定法
分别吸取对照品与供试品溶液20μl,注入液相色谱仪,测定。用更多精品文档,欢迎来我主页查询
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外标一点法计算。
2.6 试验结果
2.6.1 阴性对照试验
分别制备样品溶液、阿魏酸对照溶液、样品空白对照溶液,在上述色谱条件下分别注入液相色谱仪,得色谱图,图1,3,。结果显示,在药材溶液和样品溶液色谱图中,与对照品溶液色谱图阿魏酸峰相应保留时间处有相应的峰出现,空白对照品在对照品溶液色谱图阿魏酸峰相应保留时间处无干扰。
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2.6.2 线性关系考查
取阿魏酸对照品精密称定,加甲醇-5%冰乙酸,1,4,制成每1ml含3.4mg的溶液,精密量取该溶液1ml置100毫升容量瓶中加甲醇至刻度,摇匀,得甲溶液。再精密量取甲溶液1ml置100毫升容量瓶更多精品文档,欢迎来我主页查询
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中加甲醇至刻度,摇匀,得乙溶液。分别精密量取乙溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml、10ml,分置7个100ml容量瓶中,加甲醇定容,照2.5项下测定方法分别测定。数据结果见表1。表1 阿魏酸峰面积与进样量的线性关系,略,
回归方程和浓度范围为,
Y=5E+07X-63525 Γ=0.9983 ,0.0068,0.068μg,
标准曲线为基本通过原点的一条直线,所以可用外标一点法测定计算阿魏酸的含量。
2.6.3 精密度试验
照2.5项下测定方法,分别取2.3项下供试品溶液重复测6次,测定峰面积。结果见表2。表2 精密度试验,略,
2.6.4 稳定性试验
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照2.5项下测定方法,取2.2项下对照品溶液,每隔2h进样1次,结果见表3。表3 稳定性试验,略,
2.6.5 回收率试验
精密称取批号为061207,已知含量,0.0104mg/粒,的样品一粒,重0.5g)置具塞三角瓶中,依2.3项下制备方法制备,在制备所得溶液中加0.0250mg/ml的对照品溶液1ml,依2.5项下测定方法测定。结果见表4。表4 回收率试验,略,
2.6.6 样品测定
取本品10粒,求出平均粒重,0.5g),研细,精密称取一粒,重0.4978g,,依2.3项下制备方法制备,所得样品溶液依2.5项下测定方法测定,测得峰面积为454251.343代入线性方程求出每粒样品中含阿魏酸0.0104mg。
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2.7 结果
采用HPLC法测定晕痛定胶囊中阿魏酸的含量,方法操作方便,精密度好,结果准确可靠。
3 讨论
该法对于测定晕痛定胶囊中阿魏酸含量专一性强,灵敏度高,样品较稳定,精密度和回收率好。
该法保留时间过长,可通过增加流动相中甲醇的比例来相应缩短保留时间。
本研究所采用提取方法所得阿魏酸含量太低,可通过增加提取时间及提取次数,然后浓缩来提高其浓度。
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阿魏酸为弱有机酸,化学性质不稳定,在制备标准品时可在标准品溶液中加入一定量5%冰乙酸,1,。另外样品溶液应当在制备后马上测定含量,以防止阿魏酸分解影响测定结果。
【参考文献】
1 贾晓斌,施亚芳,黄一平.当归和川芎中阿魏酸高效液相色谱法测定方法的改进.中成药,1998,20,6,,57.
2 国家药典委员会.中华人民共和国药典2000年,一部,,2000,313.
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