金叶络石离体培养植株再生及其栽培试验

金叶络石离体培养植株再生及其栽培试验 金叶络石离体培养植株再生及其栽培试验 ? 生物技术?北方园艺2010(21):172,174 金叶络石离体培养植株再生及其栽培试验 邹清成,周江华,朱开元,刘慧春 (浙江省农业科学院花卉研究开发中心,浙江萧山311202) 摘要:以金叶络石茎段为外植体,分别接种于添加不同浓度6一BA,NAA的MS培养基中, 设置不同的温度环境,光照强度,肥料,基质栽培试验,观察生发育情况.结果明:诱导愈伤组 织最佳的培养基为MS+BA3.0rag/L+NAA0.2nag/L+蔗糖3+琼脂0.5;丛生芽分化增 殖的最佳培养基为MS+BAl_5mg/L+NAA0.2mg/L+3蔗糖+0.5琼脂;生根的最佳培 养基为1/2MS+NAA0.2mg/L+蔗糖3+琼脂0.5.栽培观赏研究表明:盆栽最佳温度为 20~30?;最佳光照强度为80;最佳基质为纯泥炭或者泥炭+蛭石(3:1);最佳肥料配比为N: P:K一1:1:1. 关键词:金叶络石;离体培养;植株再生;栽培;观赏植物 中图分类号:Q949.776.5文献标识码:A文章编号:1001--0009(2010)21一O172—03 金叶络石(TrachelospermumasiaticurnCv.Ougon— nishiki)为夹竹桃科络石属,是近年从日本引进的优良地 被.新叶橙黄色,老叶有绿黄色的斑块,叶色绚丽多彩, 是一种具有较大观赏价值和开发潜力的彩叶地被植物 新品种.目前与其同属的花叶络石(Trachelospermum asiaticumVariegatum)相关研究已有报道_1],但金叶络 石的组织培养和快速繁殖未见报道.为获得大量适应 城市环境生长的优质种苗,将其开发为一种新型盆栽及 观赏地被植物,现首次对其进行了离体培养植株再生及 栽培研究. 1材料与 1.1试验材料 金叶络石引种自杭州市萧山区林业局.2008年6 月上旬,选取生长健壮,无病害的金叶络石1a生枝的茎 段和顶芽为外植体. 1.2试验方法 1.2.1外植体消毒处理外植体先用清水冲洗干净,再 用0.1的升汞溶液浸泡5min,无菌水冲洗,然后将茎 段切成带1个节的小段,分别接种于添加不同浓度6一苄 基氨基嘌呤(BA)和萘乙酸(NAA)的MS培养基(pH 5.8,3蔗糖,0.5琼脂).培养基编号为1,15.培养 温度为(25?2)?,光照时间为12h/d,光照强度为 25#.mol?m一?S-. 1.2.2不同环境温度栽培试验2009年3月上旬,当 第一作者简介:邹清成(1981一),男,硕士,助理研究员,现主要从事 园艺植物生物技术研究工作.E-mailqczou@yahoo.com.ca. 基金项目:浙江省农科院创新能力提升工程资助项目. 收稿日期:2O1O—O7—22 172 试管苗根长达3,5cm时,移栽于泥炭+蛭石(3:1)基 质中进行练苗;4月上旬,将成活的试管苗植于相同基质 穴盘中,分置于光照培养箱中(3000lx,12h/d,相对湿 度80)设7个温度梯度(10,15,20,25,30,35,40?)培 养2个月,观察生长发育情况. 1.2.3不同光照强度栽培试验试验于4月下旬进行, 设不遮荫(100自然光强),单层白纱网遮荫(80%光 强),单层黑色遮阳网遮荫(40光强),双层黑色遮阳网 遮荫(20光强)处理.生长2个月,观察生长发育情况. 1.2.4不同基质栽培试验4月上旬,在自然光照,控 温30~C温室中,取练苗成活的试管苗,5O株一组,分植于 9种基质的穴盘中,观察成苗率及生长发育情况.栽培 基质见表3. 1.2.5不同肥料栽培试验4月上旬,在自然光照,控 温30?温室中,取练苗成活的试管苗,5O株1组,移栽于 泥炭+蛭石(3:1)基质中,选用4种不同氮,磷,钾配比 的花多多可溶性肥料灌溉,肥料施用浓度为1000倍,每 穴盘1L,10d灌溉1次.处理2个月后观察生长发育 情况.肥料配比见表4.CK为对照,不施肥料.以上试 验均2次重复. 2结果与分析 2.1不同植物生长调节剂组合对金叶络石叶片愈伤组 织诱导的影响 将金叶络石的茎段分别接种到6种不同的不定芽 诱导培养基上,接种1周左右腋芽萌发生长,1个月左 右,1,2,4号培养基上的外植体有明显的愈伤组织,3,5, 6号培养基外植体能分化出芽,其中以6号培养基为优, 筛选出最佳诱导培养基为MS+BA3mg/L+NAA0.2 mg/L+蔗糖3+琼脂0.5. 北方园艺2010(21):172,174?生物技术? 2.2不同植物生长调节剂组合对金叶络石丛生芽的增 殖继代的影响 当腋芽长至2,3cm时,将其切割下来进行增殖培 养.腋芽在增殖培养基上培养30d后,比较发现9,12 号培养基上的外植体能分化出更多的芽,且长势健壮, 叶片颜色深绿.选定12号腋芽的增殖继代培养基.筛 选出最佳增殖继代培养基为MS+BA1.5mg/L+NAA 0.2mg/L+蔗糖3+琼脂0.5.当芽增殖数量达到 2,3个,芽茎生长明显,芽长3,5cm时,可以将不定芽 切段后转移到新鲜的增殖培养基中,促使不定芽不断增 殖,30d为1个继代周期,增殖系数平均为4. 2.3不同培养基对金叶络石试管苗生根的影响 将长至3,5cm的芽单个切下,转入13~15号生根 培养基中培养.13和14号培养基中苗生长健壮,但是 生根率较低,15号培养基2周左右在芽基部有白色根突 出,以后根陆续长出,30d后生根率达90左右,根系健 壮.因此选定15号为生根培养基,筛选出最佳增殖继 代培养基为1/2MS+NAA0.2mg/L+蔗糖3+琼脂 0.5对组培进行生根培养.约45d,小苗长至6,8cm 即可移栽. 2.4不同温度对金叶络石生长发育的影响 由表1可知,在比较极端的温度下,植株能够成活, 但是长势较差,温度较低时(1O,15?)植株不能正常生 长,倒伏且没有新叶长出;在4O?时,植株能够成活,但 是长势较差,植株矮小,新叶很小时就萎蔫.在2O, 3O?时植株长势最旺盛,叶片橙黄色,最具有观赏效果; 在30~35?时,植株虽然比较健壮,但是新叶很多有白 斑,甚至完全变白色,观赏效果不佳.推测金叶络石试 管苗的最佳培养温度应该是20~30?. 表1不同温度对金叶络石生长发育的影响 表2不同光照强度对金叶络石生长发育的影响 2.5不同光照强度对金叶络石生长发育的影响 从表2可知,在金叶络石培养过程中应该需要较强 的光照强度,在露地栽培(100光照)和单层白网遮荫 (8O光照)时,植株生长健壮,新叶橙红色,具有较大的 观赏价值;光照强度较弱时,植株生长不壮,新叶嫩绿, 很少有金叶出现,观赏价值不大. 2.6不同栽培基质对金叶络石生长发育的影响 从表3可知,最佳基质为纯泥炭或者泥炭+蛭石 (3:1),成活率高,植株健壮,高度整齐一致,新叶较多; 最差为纯沙土和纯蛭石,植株虽都能成活,但是长势较 瘦弱,高度不齐,新叶少,老叶脱落严重. 表3不同基质对金叶络石生长发育的影响 基质类型鲜重株高叶片数根主根长长势 /g/cm{绦{cm 沙土0.297.2410.625.72?.96差,叶片易脱落 蛭石0.396.9811.414.6713.24差,叶片易脱落 泥炭0.527.4012.794.7011.94好,新叶多 沙土:蛭石=1:10.436.54l1.714.7611.61差,新叶少 泥炭:沙土=l:10.417.69l0.734.9013.50中等,新叶较少 泥炭:蛭石:1:10.4268011.225.0711.43较好,新叶较多 泥炭:蛭石:2:10.456.9412.535.0311.78较好,新叶较多 泥炭:蛭石一3:10.487.6313.595.7712.34好,新叶多 2.7不同肥料配比对金叶络石生长发育的影响 表4表明,金叶络石试管苗在不同肥料配比下生长 发育状况虽有不同,但是相互间差异较小.以株高,叶 片数,叶色和长势等观赏效果综合考虑,N:P:K一 20:2O:20的肥料配比较为理想,植株健壮,长势旺盛, 新叶多,颜色鲜艳,具有较好的观赏效果.对照比施肥 处理长势要差,但也具有一定的观赏效果. 表4不同肥料配比对金叶络石生长发育的影响 3结论 金叶络石适应性广,喜阳又耐荫,在不同的光照强 度下,叶色会有不同的变化,具有不同的观赏效果;耐寒 热,在10~C的低温和40~C的高温下,成活率依然较高. 耐瘠薄能力强,在沙土和不施肥料的环境中长势良好, 可广泛的适用于平面及立体绿化.在园林上,它是极其 美丽的彩叶植物,可以作为常年"开花"植物用于各种花 径布置;同时它又是优良的盆栽植物材料,可以代替目 前公园,现代设施上盆花布景,以克服盆花观赏期短,经 常换用的高成本缺点.此外,也可是家庭盆栽的优良植 物.同时由于其叶厚革质,对环境的耐受性强,可做污 染严重厂区,公路护坡等环境恶劣地块的绿化首选 用苗. 参考文献 [1]高燕会,童再康,黄华宏,等.花叶络石的组织培养口].浙江林学院学 报,2006,23(6):701—704. [2]陈旭君,林于健,潘文龙,等.花叶络石的耐荫性试验和应用[J].华东 森林经理,2006,20(2):3o_31. 173 ? 生物技术?北方园艺2OLO(21):174,176 胡麻胚状体诱导及植株再生的研究 赵玮,党占海,张建平,赵利,王利民,党照 (甘肃省农业科学院作物研究所,甘肃兰州730070) 摘要:以胡麻优良新品种'陇亚1O号'为试验材料,探讨了培养基中不同的激素配比 处理, 外植体的取材对愈伤组织和胚状体诱导以及再生植株分化的影响.结果表明:最佳 培养基为 MS+I从0.5mg/L+6一BA1.5mg/L;最适宜的外植体为下胚轴. 关键词:胡麻;愈伤组织;胚状体;再生植株 中图分类号:S563.9文献标识码:A文章编号:1001--0009(2010}21一O174一O3 胡麻(Linseed)属于亚麻科(Linaceae)亚麻属 (Linum),即油用亚麻,是一种重要的油料作物.胡麻油 富含o『亚麻酸及各种不饱和脂肪酸,这些物质是人体必 需的不饱和脂肪酸,具有促进人体智能强身健脑,防止 心血管疾病,抑制疾病基因等重要作用1].胡麻籽油也 是典型的干性油,可制造高档油漆,油墨,涂料等化工产 品,在工业领域也在广泛应用l2].为充分利用甘肃省丰 第一作者简介:赵玮(1976一),男,在读硕士,助理研究员,现主要从 事作物遗传育种工作.E-mail:308214921@qq.com. 通讯作者:党占海(1955一),男,研究员,博士生导师,现主要从事遗 传育种工作.E-mail:dangzhh1955@yahoo.corn.cn. 基金项目:国家现代农业产业技术体系建设专项资金资助项目 (nycytx-22). 收稿日期:2O1O一07—19 富的胡麻资源,胡麻的品质改良和抗病性研究已被广泛 关注.随着生物技术的广泛应用,已经深入到转基因等 分子生物学领域,但利用该项技术的首要条件是建立一 个高效的组织培养体系.组织培养中胚状体诱导具有 增殖率高,结构完整,易成苗和可免去生根,繁殖速度快 的优点,已受到各国生物工程技术人员的普遍重视口]. 为此课题组在胡麻上开展了胚状体诱导及植株再生的 研究,拟通过对不同的激素配比处理,外植体的不同取 材等影响因素进行探讨,建立一个适宜于胡麻胚状体诱 导及分化的再生体系,为胡麻的基因转化提供一种理想 的转化受体培养方法. 1材料与方法 1.1试验材料 供试材料为胡麻优良新品种'陇亚10号',由甘肃 省农业科学院作物所提供. Rssem-ehoninvitroCultureforPlantRegenerationandCultivationof OrnamentalofTrachelospermumasiaticumCV.Ougonnishiki ZOUQing-cheng,ZHOUJiang-hua,ZHUKai-yuan,LIUHui-chun (ResearchandDevelopmentCenterofFlower,Zh~iangAcademyofAgriculturalSciences.Xiaoshan,Zh~iang311202) Abstract:InvitrocultureandplantregenarationofTrachelospermumasiaticumCV.Ougonnishikibytissuecultureusing itsbladewerestudied.InoculatedthebladeintoMSmediumandwithdifferentconcerdrationofBAandNAAObserved growthconditionunderdifferenttemperature,illumination,mediumandfertilizer.Theresultsshowedthattheoptimum mediumforcallusinductionwasMSsupplementedwithBA3mg/L,NAA0.2mg/L,3sucroseand0.5agar.The optimummediumfortheformationandgrowthofclusterbudswasMSsupplementedwithBA1.5mg/L,NAA0.2mg/ L,3sucroseand0.59/6agar.Theoptimummediumforrootingwas1/2MSwithNAA0.2mg/L,3sucroseand0. 5agar.Thecultivationforornamentaloftest-tubewasalsostudied.Theoptimumtemperaturewas20,30?.The optimumlightintensitywas80.Theoptimummediumwaspeator2/3peatand1/3vermiculite.Thebestproportion ofN.PandKwas1:1:1.Thetest-tubeplantletscanbecultivatedasapotflowerandornamentallawnwithhigh ornamentalvalue. Keywords:TrachelospermumasiaticumCV.Ougonnishiki;invitroculture;regenaration;cultivation;ornamental 174