网织红细胞、血沉[整理版]
网织红细胞计数,RC,
1、 检验目的
网织红细胞是没有完全成熟的红细胞内残存的核糖核酸
,RNA,经特殊染色后成网状结构。网织红细胞计数的目的是
有助于作骨髓造红细胞的能力。 2、 检验原理
网织红细胞是没有完全成熟的红细胞~其胞浆内尚存有嗜碱
性的核糖核酸,RNA,物质~经煌焦油蓝或新亚甲蓝活体染色
后呈浅蓝或深蓝色的网状结构。 标本采集
3、标本
3.1 末梢血糖采集
:标本采集后应立即进行染色。
3.2 静脉血采集方法:用含有EDTA-K抗凝真空采集管采集2
血液~标本应在4小时内进行处理~若保存4时可延迟到8
小时。
4、设备和试剂
4.1 日本OLYMPUS公司的CH—2显微镜。
4.2 试管、玻片、Miller窥盘,置于显微镜目镜内,等。
4.3 10g/L煌焦油蓝生理盐水溶液。 5、操作步骤
5.1 试管法:于小试管内滴加1滴煌焦油蓝生理盐水溶液。
5.2 假如2滴末梢血,抗凝静脉血,~并与试管中混匀。
5.3 静置15——20分钟后~取1滴制成涂片。
5.4 油镜下观察1000个红细胞中网织红细胞~法定单位报
告。
6、干扰因素
6.1 活体染色体时间不能过短~室温过低时可置于37温箱。
6.2 每次制片2张~每张计数500个红细胞~避免分布不均匀引起误差。
6.3 试剂应定期更换~以免变质。
6.4 因操作误差大~不宜用玻片直接染色法。
7、网织红细胞绝对值计算
ARC 网织红细胞数/L=计数500个RBC所见网织红细胞数
X 2/1000
8、生物参考值区间
正常人网织红细胞:成人0.005——0.015 绝对值,24——
984, ×10/L
新生儿0.03——0.06 绝对值,144——
9336,×10/L
9、实验室解释
9.1 网织红细胞数值可反映骨髓造血功能的状态~可作为贫血治疗疗效观察的指标。
9.2 减少:常见于再生障碍性贫血、苯中毒等。
9.3 增多:
示骨髓造血功能旺盛~见于溶血性贫血~出血性贫血~恶性贫血~以及缺铁性贫血和巨幼细胞贫血治疗有效时。
9.4 如发现网织红细胞低于正常时~应慎重地反复检查并核实~并计算其绝对值。
9.5 在癌转移白血病、脾脏疾病时~网织红细胞亦有不同程度的增多~但不伴随血液内红细胞的增加~这种增加不表示红细胞生成旺盛。
10、异常结果处理
如网织红细胞计数结果异常~需与临床诊断相符合~不符合的结果应复查。
11、报告时间与标本保存
11.1 网织红细胞计数结果应在3小时内出报告~病房患者检验结果报告单在24小时内发回科室~门诊病人检验结果在当天下午领取报告结果。
11.2 网织红细胞计数检查过的标本不保存~制好的血推片可保存一周。
12、操作性能
本试验是目测法~检验结果的精密度欠佳~ICSH推荐使用Miller窥盘法进行显微镜目测计数~由于仪器法计数细胞数目多~结果的精密度较手工法好~将是未来网织红细胞计数的趋势所在。
13、参考文献
1 王宇主编. 全国临床检验操作规程. 中华人民共和国卫生部医政司. 南京. 第三版.2006.
红细胞沉降率测定(ESR)魏氏法
1 检查目的
红细胞沉降率是指红细胞于一定的条件下在plasma中沉降的速度~ESR的检查属非特异性试验~在许多病理情况下~ESR均可增快~但由于ESR操作简单~将ESR结果结合临床资料及其他检查结果进行分析时~对判断机体有无炎症、病变有无活动性以及治疗效果的好坏有重要的参考价值~故ESR检查临床上仍在广泛应用。
2 检测原理
在血液中~由于红细胞膜表面的唾液酸带有负电荷而相互排斥~使细胞分散悬浮而下沉缓慢。在Westergren method (魏氏法,中~将一定血液抗凝后~置于特制的玻璃管中~测定红细胞在一定时间内下降的距离~称红细胞沉降率测定,ESR,~简称血沉。
3 标本采集
3.1 红细胞沉降率测定,ESR,标本采集是一个重要的步骤~采集标本的好坏直接影响检测结果。
3.2 要求用采血器,注射器或真空采血器,在30秒内取出静脉血~同时压脉带束臂时间不宜过长。
3.3 一般应用抗凝剂浓度为109mmol/L,32.08g/L,的枸橼酸钠~抗凝剂与血液之比为准确的1:4。
3.4 按静脉采血的方法用采血器,注射器或真空采血器,抽取1.6ml的血液~注入含有109mmol/L,32.08g/L,的枸橼酸钠0.4ml的试管内~立即颠倒混匀数次~注意不要用力过猛。
4 设备与试剂
4.1 Westergren 血沉架~符合
的血沉管,或一次性使用的标准血沉管,VACUETTE Single-use pipettes ESR,。
4.2 109mmol/L,32.08g/L,的枸橼酸钠抗凝剂。
4.3 定时器。
5 操作步骤
5.1 将采集好的标本混匀~用符合标准的血沉管插入试管中~,注意不要用力过大,~让血液充满整个血沉管。
5.2 将血沉管放置于血沉架上~让其与地面垂直。
5.3 用定时器计时1小时后~观察红细胞在1小时内沉降的毫米数。即为红细胞沉降率,ESR,。
6干扰因素
6.1 抗凝剂与血液之比要准确~抗凝剂浓度高时ESR加快。
6.2 血沉测定管的内径不小于2.55mm~整条管子的内径要一致~允许偏差为5%~血沉管内腔必须洁净、干燥、血柱内不能有气泡。
6.3 室温应保持在18-25之间~取血后4小时内必须开始测定。
6.4 测定管有倾斜时常使ESR明显加快。
7 质量控制措施
无。
8 结果计算
红细胞沉降率测定,ESR,= 血沉测定管总刻度- 1小时时红细胞所处在测定管处的刻度
9 生物参考区间
国内教材所列参考值 ,Westergren 法,
成年男性 0 —— 15 mm/h
成年女性 0 —— 20 mm/h
10 实验室解释
10.1生理性变化
剧烈运动后ESR可增快; 新生儿由于红细胞数值高而致ESR值较低。60岁以上高龄者由于血浆纤维蛋白增高原因~ESR常增快。妇女经期ESR增快。
10.2 病理性变化
10.2.1 降低 见于真性红细胞增多症、遗传性球形红细胞增多症。
10.2.2 增快
1. 显著增快 见于多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、恶性淋巴瘤、白血病、重度贫血、肉瘤、严重的细菌感染、溃疡性结肠炎、严重的肾病、早期病毒性肺炎。
2(中度增快 见于急性或慢性感染、风湿热、类风湿关节炎、伴有坏死的恶性肿瘤、甲状腺功能亢进或减退症、结核病、肾病、过敏性紫癜等。
10.3 血沉增快常提示疾病状态~反之~血沉正常~也不能排除疾病。
11 异常结果处理
本试验结果异常需与临床诊断相符合~不符合的结果应复查。
12 报告时间与标本保存
红细胞沉降率测定,ESR,标本当日出报告。急诊标本60分钟发出报告~病房患者检验结果报告单在当日下午发回科室。检查过的标本不保存。
13 操作性能
13.1 本试验是临床上最常用的ESR检测方法~近年来使用动态血沉测定仪和微量ESR测定法进行ESR检测的实验室已明显增多。
13.2 不同的检测方法所需的雪量、检测时间、抗凝剂和血沉管的种类均有所不同的得出的结果也有差异。
13.3 为了使不同方法测出的ESR结果具有可比性~ICSH在1993年颁布了ESR检测的参考方法。要求常规使用的不同的ESR测定方法的结果均要与参考方法的测定结果进行比较~确认二者有可比性后方可使用。
20 参孝文献
1 王宇主编. 全国临床检验操作规程. 中华人民共和国卫生部医政司. 南京. 第三版. 2006.