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小鼠骨髓单核细胞的制备

2017-09-20 1页 doc 12KB 113阅读

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小鼠骨髓单核细胞的制备小鼠骨髓单核细胞的制备: 1. 取BABL/c小鼠颈椎脱臼致死,置70%酒精中浸泡5min。 2. 无菌剥取胫骨、股骨和髂骨, 剪去骨两端,用DMEM培养基冲洗骨髓腔得到骨髓细胞,1200r/min, 离心5min。 3. 加入红细胞裂解液消化红细胞,37℃作用5-15min。 4. 1200 r/min,离心5 min,弃去上清。 5. Completed DMEM培养基洗涤1次后,用含40ng/mL M-CSF(贮存液浓度为10000ng/mL)的DMEM培养基,调整细胞密度为5×105/mL,接种到12 or 24孔板中...
小鼠骨髓单核细胞的制备
小鼠骨髓单核细胞的制备: 1. 取BABL/c小鼠颈椎脱臼致死,置70%酒精中浸泡5min。 2. 无菌剥取胫骨、股骨和髂骨, 剪去骨两端,用DMEM培养基冲洗骨髓腔得到骨髓细胞,1200r/min, 离心5min。 3. 加入红细胞裂解液消化红细胞,37℃作用5-15min。 4. 1200 r/min,离心5 min,弃去上清。 5. Completed DMEM培养基洗涤1次后,用含40ng/mL M-CSF(贮存液浓度为10000ng/mL)的DMEM培养基,调整细胞密度为5×105/mL,接种到12 or 24孔板中, 3 7 ℃,5% CO2 At day3, add around 0.5 ml of fresh DMEM containting 40ng/ml M-CSF, 培养箱中培养5-6d。
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