肺神经内分泌瘤的光镜,电镜及免疫组化研究

肺神经内分泌瘤的光镜,电镜及免疫组化研究 肺神经内分泌瘤的光镜,电镜及免疫组化研 究 中国医科大学JChinMedUniv第2g卷第3期2000年6月 一 o7,锰神经内分泌瘤的光镜,电镜及免疫组化研究 7烨 丛查苎翌刘宝宜李建华 摘要且的挥讨肺乳头状瘤型史性假瘤的性质及姐织发生.:对23侧肺乳头状瘤型史性韫瘤进行了肉 艰光境及免疫组化观幂.并从NSE染色阳性中选出10例进行了电境观察.结果r21侧NSE标记呈阳性反应;18侧 S—i00标记呈阳性反应Fl3例CgA标记呈阳性反应F其瘤细胞的阳性率分别为79.7.76.0%和67.9{而CEA CK及F8标记呈阴性反应;在电境下瘤细胞胞浆内均含多少不等的神妊内分泌颗粒结论:肺乳头状瘸型支性假瘤 是来自肺神蝗内分泌细胞的良性肿瘤.而且肺硬让d生血管瘤可能是蜒象,质也是肺神经内分泌瘤. 关键词!;苎垄皇望!壁兰皇遂电绝 StudyonNeuroendocrineTumoroftheLungbyLightMicroscope, ElectronMicroscopeandImmunohistochemistry WGuangping,SongJiyie,LiuB口,LiJianhua (DepartmentofCytopathology.TheFirstCtinicalCollege,ChinaMedicalUnive~ity,Shenyang,1100O]) ABSTRACT0bjective:Ourpurposewastodetectthenatureandthehfstogenesisofthepapillomatoidin? flanamatorypseudotumorofthelung.Methods:Twenty?threecasesofthesocalledpapiltomatoidinflnmmatory pseadoturnorofthelungwerestudiedbygross,lightmicroscopyandimmunohistoehemistry.ThelOc~sesthat wel’~positiveforneuronspecificenolase(NSE)wereobservedbytransmissionelectronmicroscopy.Resalls: Twenty.onecases(91.3)werepositiveforNSE;18(78.3)werepositiveforS-100protein(S—100)and 13(56.5)werepositiveforchromograninA(CgA),thepositiveexpressionsforNSE,S-lO0andCgAwere 79.7,76.0,and67.9respectively.whileallthetumorcellswel*enegativeforcarcinoembryonicantigen (CEA).cytokeratinfCK)andfactor ??relatedantigen(F8).Electronmieroscopieexaminationfoundtheneu_ roendocrinegranulesinthecytoplasmoftumorcel1.Conclttsion~Thepapillomatoidinflammatorypeveudotumorof thelungwasregardedtoheabenigntumororiginatingfromtheneuroendocrin ecellsofthelung,andsclerosing hemangiomaofthelungmighthefalseappearance,whoseentitywasalsoneur oendocrinetumorofthelung. KEYWORDSlungneoplasms;immunohistoehemistry;neuroendocrine 肺神经内分泌瘤(neuroendocrinetumorofthe lung,NTL)是肺内比较少见的一种良性肿瘤,其 组织结构以乳头状,血管瘤样及实性片状为特征,且 三者往往相互移行,混合存在,因而近年来深受国内 外学者的关注,对其性质及组织发生存在着许多不 同的看法.为了进一步弄清此瘤的性质及组织发生, 我们收集了沈阳市六家病理室诊断为肺炎性假瘤的 病倒54例.经过专家审核.参考wHO分类.从 中筛选出肺乳头状瘤型炎性假瘤及肺硬化性血管瘤 共23例,进行了组织学,免疫组化及电镜观察等临床 病理研究 1材料与方法 1.1标本来源收集沈阳市6家病理室手术后石 基础医学院病理学教研皇 蜡包埋组织23倒,其中肺乳头状瘤型炎性假瘤2O例, 肺硬化性血管瘤3例;年龄18,76岁男】5例,女8例. 1.2免疫组化试剂神经元特异性稀醇化酶 (NSE),嗜铬颗粒蛋白A(CgA),S一100蛋白(s? 】00),癌胚抗原(CEA),细胞角蛋白(cK)及第?因 子相关抗原(F8),均为多克隆,广谱,美国Maxin公 司生产,购于福州迈新公司 l_3免疫组化染色采用S—P法,PBS缓冲液代 替第一抗体怍为空白对照;细胞浆内含棕色颗粒为 阳性细胞.阳性细胞数大于或等于5为阳性,小于 5为阴性;凡神经内分泌标记物阳性者,在切片上 随机选取5个高倍视野,显微图像仪下计数阳性 瘤细胞的百分率. 1.4电镜观察从NSE染色阳性的病例中,选择 】O例,改制电镜切片,透射电镜下观察瘤细胞内的神 经内分泌颗粒,肺泡I型缅胞内的板层小体及血管 1--f 第3期晏广平等.肺神经内分泌瘤的光镜,电镜及免疫组化研究 源性的Weibel—Palade小体等特异性结构. 2结果 2.1大体观察 肿块可发生于各肺叶的肺实质内,直径为0.6, 16cm,呈球形,边界清楚,均有不完整的包膜,质地 软至中等硬,切面灰白或暗红,个别中心可见出血. 2.2光镜观察 肺乳头状瘤型炎性假瘤其特征性结构为瘤细胞 呈乳头状增生,表面多被覆肺泡上皮,瘤细胞大小形 态较一致,胞浆丰富透明,核卵圆形淡染,少见炎细 胞,部分病倒瘤细胞区可见局灶性或区域性纤维化 (硬化). 肺硬化性血管瘤以血管增生为主,血管腔大小 和血管壁厚薄不一,内皮下及血管间可见大小形态 较一致的长卵圆形细胞,胞浆亦较丰富透明,多数病 例有明显的纤维化. 值得注意的是上述乳头状和血管瘤样两种结构 多相互移行,混合存在,只是所占的比例不同;且瘤 细胞大小形态较一致,呈实性片状或菊形团样排列, 在肺间质内生长. 2.3免疫组化染色结果 2.3.1定性分析结果:20例肺乳头状瘤型炎性假瘤 中17例对上皮性标记物及神经内分泌标记物均呈阳 性反应,1例仅对神经内分泌标记物表达,2例对两种 标记物均呈阴性反应;3例肺硬化性血管瘤对两种标 记物均表达,与F8除间质小血管内皮细胞外均呈阴 性反应. 2.3.2定量分析结果:23例中,有20例乳头表面的 上皮或”血管内皮”对CEA及CK表达;而乳头轴心 及”血管内皮”下的瘤细胞对神经内分泌标记物大多 呈阳性表达,其结果见表1. 表1免疫组化染色定量分析结果 Tab.IQuantityanalyzisofimmunohistochemistry 2.3.3瘤细胞阳性率结果见表2. 表2免痤组化染色瘤细胞阳性率 Tab.2Therateoftumorcellspositiveof immunohistochemistry 2.4透射电镜观察结果 7例肺乳头状瘤型炎性假瘤及3例肺硬化性血管 瘤的瘤细胞胞浆内均含多少不等的神经内分泌颗 粒;肺泡上皮及”血管内皮中的?型细胞内含有板 层小体;整个组织中未见W—P小体. 3讨论 关于肺神经内分泌瘤,对其性质及组织发生有 着许多不同的看法,文献中存在着多种截然不同的 命名,WHO及国外多数学者命名为肺硬化性血管 瘤口}国内多数学者称之为肺乳头状瘤型炎性假瘤; 也有人认为是肺炎性假瘤中的一种特殊亚型,即肺 硬化性血管瘤型炎性假瘤口;还有人认为肺乳头状 瘤型炎性假瘤和肺硬化性血管瘤型炎性假瘤是肺炎 性假瘤中的两个不同的类型D;又有人认为其中部 分属于肺腺瘤;Nagata[,Satoh[等认为?型肺泡 细胞是此瘤的主要成分,应称为I型肺泡细胞瘤更 为妥当;近来国内又有学者认为是肺良性神经内分 泌瘤. 根据本研究结果分析,肺乳头状瘤型炎性假瘤 确实不是单纯的炎症性病变,而是最近才认识的起 源于肺神经内分泌细胞的良性肿瘤,依据肿瘤命名 原则,我们认为暂命名为肺神经内分泌瘤更为妥当; 而且肺硬化性血管瘤可能是假象,其本质也是肺神 经内分泌瘤.本实验的23例病例中,肺神经内分泌瘤 为20倒,占87.O,包括光镜下分类的肺乳头状瘤型 炎性假瘤17例,肺硬化性血管瘤3例. 实验结果中,有3例不能分类,均是实验前光镜 分类中的肺乳头状瘤型炎性假瘤.我们认为有以下 几种可能性:(1)还有其他类型的病变尚未被认识; (2)我们所用的抗体有限,不能检测出所有种类的神 经内分泌细胞;(3)由于标本中抗原大量丢失,未能 得到应有的结果. 参考文献 1KatzensteinAL.GmelkhJT.CarrlngtonCB.Sclerosingheman giomaofthelung}aclinlc.pathol0glcstudyof51c一.AmJ SurgPatho].1980.4:343—356 (下转第209页) 第3期都健等.钒酸盐治疗糖尿病作用机制的探讨 P水平 健康大白鼠脂肪,肝脏及肌肉组织的G一6一P水 乎分别为(8.9士0.4),(370士20),(950士30)nmol/ g组织(一3);STZ诱导糖尿病大白鼠,分别为 (6.85士0.3),(180?10),(300士20)nmol/g组织 (一5).高血糖使G一6一P水乎明显降低,在脂肪,肝 脏及肌肉组织分别降低至77,49及32.两组比 较差别显着(分别为P<0.05,P<0.01,P< 0.01). 2.2STZ诱导糖尿病大白鼠钒酸盐治疗后胰岛素 应答组织G一6一P水平 大白鼠血糖正常3d后测定外周组织G一6一P水 乎.脂肪,肝脏及肌肉组织G一6一P水乎分别为(12.2 ?1.0),(345?30)及(960士30)nmol/g组织(一 5)与对照组相比,钒酸盐治疗恢复G一6一P水乎分 别至145,93及10l. 3讨论 既往实验研究已观察到,钒酸盐治疗停止后,糖 尿病大白鼠的血糖可以保持正常几天甚至几个星 期IE],推测钒酸盐对糖尿病大白鼠的治疗作用不同 于其在体外胰岛素的快速代谢作用机制.而且内源 性酪氨酸磷酸化及肌肉或脂肪组织促进葡萄糖流入 都不受钒酸盐疗法的影响E2,6]o所以,我们进一步设 想,钒酸盐治疗作用的基础可能是促进在糖尿病时 受抑制的碳水化合物及脂肪代谢关键酶的合成. 哺乳大白鼠脂肪组织在体外20mmol/L葡萄糖中 3TC温育5h,脂肪酸合成酶及乙酰辅酶A羧化酶 水平提高5,7倍],增加的脂肪酸合成酶基因表达 认为与葡萄糖代谢物G一6一P相关,因此,我们考虑 G一6一P可能是糖尿病中的一个限速代谢物.本实验 结果表明,STZ诱导糖尿病大白鼠体内脂肪,肝脏 (上接第307页) 2武彦,廖橙林.战雪悔.等.29倒肺硬化性血管庙的组织学及免疫 组化研究.临床与实验病理学杂志,1997,13(3):233~234 3钟炳棠,周增辉.周宏泉.等呻郡爽性假窟16倒临床丹析中华肿 庙杂志,1989,7(3):314~318 4NagataN,DairakuM,lshidaT,etalScL~ros[oghemangiomaof thelung:immunohistoehemica[characterizationofitsoriginas relatedtosurfael;antapoprotein.Ca~er,1985,88(1):116--123 5SatohY,Tsuch[yaE,WengSiu—Yuhe,eta1.Pulmonaryse[eros一 及肌肉组织G一6一P水乎明显降低,钒酸盐治疗后 STZ诱导糖尿病大白鼠的血糖水乎正常化,并且恢 复脂肪,肝脏及肌肉组织的G一6一P水乎,据此推测, 高血糖是抑制STZ诱导糖尿病大鼠胰岛素应答组 织G一6一P水乎的关键因素.本实验结果也向我们提 供这样一个信息:G一6一P的降低是糖尿病的主要损 伤因子,为钒酸盐治疗糖尿病提供了一些证据. 参考文献 1DubyakGR.KleinzeHerA.Theinsu[in—mimeticeffectsofvana— dateinisolatedratadipocytestDissociationfromeffectso1ma— dateasaNa—KATPaseinhibitor.JBio【Chem.1930,255(11) 53O6—5312 2BrichardSM,Ass[macopeu[os—JeannetFtJear=renaudB.Vana— datetreatmentmarkedlyincreaseglucoseuti[izationinmugcleof insulinresistantfa/fafatswithoutmodifyingg[ucose—transporter expression.Endocrinology?】992?】31(】):3l1—317 3MeyerovkchJ.Farfe]Z.SackJ.etalOraladnfinistrationof vanada~normalizedbLoodg]ucoselevelsinstt~eptozotocin—tffeat— edratsICharacterizationandmodeofaction.JBio】Chem. 1937,262(141:3653--6662 4FoufelleF,GouhotB.DegorierJP.etalGlucosestimulationof ]ipogeniee~ymegeneexpressioninculturedwhiteadiposetis— Aroleforglucose8-phosphate.JBio[Chem,1992,267 (29):30543—30548 5LangG,Micha[G.D-glucc~e一6-phosphateandDfructose8 phosphate.In}MethodsofEnzymaticAnalysis,Academic Press.NewYork.BergmeyerHV1974.3|1238--1242 8MeyerovkchJ,RothenbergP,ShechterY,eta1.VanadatenOT- ma]i~shyperglycemiaintwomoHsemodelsofminsulinde- pendentdiabetesmeLLitus.JClinInvest,1991,87(4):1286_ 】294 7SibrowskiW.Saitz脚RapidactionofinsulinaadcyclicAMP intheregulationoffunctionalmessengerRNAcodingforglueok— inaseinratliver.JBiolChem,1984,259(1)|3—346 (】999—1O一28收穑) inghemanglomaofthelung:atype1pneumocytomabyim- munohistoehemicalandimmunoe[ectronmicroscopicstudies. Cancer,1989.64(6)}1310--1317 6李维华,许红民.李红芬,等.肺的一种良性神经内丹泌肿瘤—— 对所谓呻硬化性血管瘤来源的探讨.中华病理学杂志,1994,23 (2)r69,73 (1999-05一i7收稿)