人参叶中减轻醋酸泼尼松副作用的活性成分研究

人参叶中减轻醋酸泼尼松副作用的活性成分研究 人参叶中减轻醋酸泼尼松副作用的活性成 分研究 f7一f7 ? 药 人参叶中减轻醋酸泼/用的人参叶中减轻醋酸泼尼松副作用的 薹盛强文哗裴玉萍陈英杰 (沈阳药移呋学植化教研室沈阳110015) 马忠泽(辽宁省药物研究所沈阳110015) 摘要人参叶总皂甙(GSL)对于醋酸泼尼松所致雄性兔的血清总脂,总胆固醇,甘油 三酯的升高和 皮质醇的下降具有显着的抑制作用.对GSL中化学成分进行研究,得到10十化台 物.对人参皂甙一Re 的活性初步研究明其为GSL中的活性成分. 用较为广泛 大剂量糖皮 质激素会产生多种副作用.如造成血脂升高, 尤其是血浆总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)的 升高,诱发高脂血症;使肾上腺皮质功能减退或 皮质萎缩.主要症状为肾上腺萎缩,体重下降, 皮质激素分泌减少等.人参皂甙减轻PA副作 用的活性,国内外目前尚未见报道.本文采用 多种生化指标对人参叶总皂甙(GSL)减轻PA 副作用的活性进行研究,并追踪其活性成分. 1材料 1.1动物雄性日本大耳白兔(陆军总院提 供),体重2kg左右. 1.2药物本实验所用的人参Panaxnseng c.A.Mey.叶产于黑龙江,陈英杰教授鉴定. 取人参叶10kg,粗粉碎,用70%乙醇提取2次, 减压回收乙醇,所得提取物经大孔吸附树脂,先 用蒸馏水洗去水溶性杂质,再用50%乙醇洗 脱,经浓缩,喷雾干燥得干重300g的人参叶总 皂甙.GSL经反复硅胶柱层析,反相Lobar柱 层析和Rp—HPLC等方法,自GSL中得到10个 化合物.经mp,IR,"C-NMR谱及化学方法与 已知品对照分别鉴定为胡萝甙,20(R)一 人参皂甙一Rh1,20(R)一Rg2,一P,g2,一RglrF3,一 ? 174? F',.Re,一Rd,一Rb'.人参皂甙一Re纯度?98%. 醋酸泼尼松(东北制药总厂生产),人参叶总皂 甙及人参皂甙一Re,均用5%oCMC稀释. 13仪器及试剂熔点采用显微熔点测定仪 (温度计未校正).紫外用7230紫外分光光度 计.核磁共振用JEOLa500型.质谱仪用JE— OLS×102A(日本产).高效液相色谱用LC- 10型(日本产),反相柱c18柱(Merck).柱层析 用硅胶(200,300目),薄层层析用硅胶G均系 青岛海洋化工厂产品. 2方法 2.1实验指标及测试方法皮质醇:高效液相 色谱法[cl8柱,甲醇一水(55:45),UV242 AUFS]….血清总脂,总胆固醇,甘油三酯:紫 外分光光度法j. 2.2实验过程实验动物随机分为3组:正常 对照组,PA组,PA+皂甙组.均灌胃给药.正 常对照组每日给5‰CMC溶液,PA组每日给 10mg/,PA+皂甙组每日给PA(iOmg/kg)+ 总皂甙(GSL一1,30mg/kg;GSL-2,60mg/kg)或 人参皂甙.Re(60mg/kg).每天1次,于末次给 药后空腹12,18h,从耳缘静脉取血,按规定方 法测各项指标.在降血脂实验中GSL对于PA 所致免的血清总脂,甘油三酯,总胆固醇的升高 1997年第22卷第3 的影响,考察的是在给药后15天测定的结果. GSL(60mg/kg)对PA所致的血清皮质醇降低 影响,考察的是给药30天测定的结果.人参皂 甙一Re(60mg/kg)对于PA所致血清总脂,甘油 三酯,总胆固醇的升高的抑制作用,考察的是给 药12天测定的结果. 2.3抑制率(x)的计算 X-v.)×II】o% VDVo v口,vD,分别是正常对照组,PA组,PA+GSL 组的相应指标. 3结果 3.1GSL减轻PA副作用的研究我们对 GSL减轻PA副作用的活性进行研究.结果表 明,GSL(60m~g/kg;120mg/kg)对于PA(10mg/ kg)所致小鼠肾上腺萎缩,在冷水中游泳时间缩 短具有显着抑制作用,此部分内容将另文发表 进一步研究表明,GSL对于PA所致雄性兔的 血清总脂(TL),TC,TG的升高和皮质醇(CT) 的下降均具有一定抑制作用,以60mg-- dGSL作用最显着(见表1,2),抑制率分别达 到662%,58.1%,92.8%,40.0%. 表1GSL对PA造成的兔血清总脂,甘油三酯和胆固醇升高的影响 注:?i?与PA组比较P<005Ip<0叭 表2GSL对PA所致兔血清皮质醇降低的影响 注:与PA组[,教P<005与正常对照组比较 P>002在实验过程中死亡3只 与正常对照组比较,在实验后期可观察到 大剂量PA造成的动物"耗竭"现象,主要表现为 动物显得动作迟缓,蜷缩,弓背,体毛枯疏,体重 呈下降趋势,而给予GSL组的动物,这些症状 得到基本缓解.上结果表明GSL确有减轻 PA副作用的活性. 3.2人参皂甙一Re减轻PA副作用活性的初步 研究人参皂甙一Re是GSL中主要成分.我们 首先对其活性进行初步研究,对雄性兔给药第 12天取血测定的结果表明60mg/kg的人参皂 甙一Re对PA(10mg/kg)所造成的血清TL.TC 和TG的升高均有一定抑制作用(表3). 表3^参皂甙一Re对PA所致免血清总脂,甘油三酯和胆固醇升高的影响 4讨论 传统中医认为人参具有"扶正祛邪"作用, 现代药理学研究人参是"适原性"药物,它 可以通过多种途径增强机体对各种有害因素的 1997年第22卷第3 抵抗能力.张树臣等报道:人参果总皂甙可抑 制大剂量氢化可的松引起的动物"耗竭"状态, 抑制肾上腺萎缩,具有保护垂体一肾上腺皮质系 统免于衰竭的作用.这一研究提示人参叶皂 175 甙可能具有减轻PA副作用活性.现代药理学 研究表明人参茎叶总皂甙对动物高脂血症具有 抑制作用.能阻止正常饲养大鼠血清TC和 TG的升高,降低高脂膳食大鼠血清和肝组织内 TC和TG的浓度_4'.此外,人参叶总皂甙中 主要成分人参皂甙一Re还具有升高大鼠血浆皮 质酮的作用J.另外,GSL还具有抗炎,抗溃 疡,抗休克,抗病毒,增强肾上腺皮质系统功能 等作用_6J,说明GSL一方面具有与PA某些副 作用相反的活性,另一方面还具有与PA某些正 常作用相一致的活性.提示GSL可能具有降 低PA副作用并增加其药效的活性.我们的结 果显示GSL(60mg/kg)具有显着的抑制PA副 作用的活性. 体内糖皮质激素如CT的分泌受下丘脑一垂 体一肾上腺皮质轴的调节.一般认为外源性糖 皮质激素,通过负反馈方式抑制垂体分泌 ACTH,从而使肾上腺皮质分泌功能降低,导致 内源性皮质激素分泌的减少.本实验PA所致 动物血清CT降低与此结论相符. 在应激状态下,人参皂甙对于垂体一肾上腺 皮质系统的功能具"保护"作用,使其免于发生 机能衰竭,这就是在应激反应过程中,人参对垂 ,3《 在 体一肾上腺皮质系统表现的所谓"适应原样"的 作用.GSL抑制肾上腺萎缩,抑制PA所致CT 降低,与此作用有关. 研究表明对于正常和高脂血症的动物,人 参皂甙能降低血中TC的浓度,加速其随胆汁 经肠道排除体外,并能影响TG的转运,促进血 中TG转移至脂肪组织.因此,人参皂甙具有 降低血中TL,TC和TG的作用,对于动脉粥样 硬化症有防治作用.目前认为人参皂甙是一种 物质代谢的调节剂,在其作用下,紊乱的代谢过 程得以正常化,从而维持正常代谢过程进行J. GSL抑制PA所造成的TL,TG和TC的升高 可能与人参皂甙的此作用有关. 本实验的研究结果为GSL在临床上增加 一 个减轻PA副作用的新用途提供实验依据. 5参考文献 1Amc~netteM融aJ.CAinChem1982;28{3);538 2上海医学化验所临床生化检验上册上海:上海科学技 术出版社,1979 3张树臣等药学,1981;16(12):861 4王新星等湖南医科大学,1990;15(1):10 5关熙隆等中国药理学通报,1991}17(2):110 6王车祥等人参研究天津:天津科学技术出版社.1985: 】36140283 1995—09—1 加多糖对实验性肝损伤的保护作用 . (兰州医学院药理教研室兰州730000) 摘要红毛五加多糖能明显降低小鼠和大鼠四氯化碳,硫代乙酰胺及D-氨基半乳糖 肝损伤所 致血清谷丙转氨酶的升高,使磺溴酞钠滞留量减少;尚能使正常和四氯化碳中毒小 鼠戊巴 比妥钠诱导的睡眠时间显着缩短. 磺溴酞钠 分布 红毛 五加根茎中提取的有效成分之一,本文报告该 成分对实验性肝损伤的保护作用. ? 176? 1材料 1.1药品红毛五加(根与茎)采自甘肃陇南 地区,经兰州医学院药学系赵汝能教授鉴定为 AcanthopanaxgiraldiiHarms.其多糖(AGP) 1997年第22卷第3 1,