氨肽素对^60

氨肽素对^60 氨肽素对^60 co^,辐射小鼠免疫损伤的保护作用第8 氨肽素对印Co辐射小鼠免疫损伤的保护作用? 焦淑萍薛立娟?杜培革(北华大学医学院,吉林132013) 中国图书分类号R967文献标识码A文章编号 氨肽素是从哺乳动物毛爪中经高科技工艺提取 分离的水溶性蛋白质,临床上作为治疗原发性血小 板减少性紫癜,慢性型再生障碍贫血,过敏性紫癜及 白细胞减少等血液疾病….近年来临床用于肿瘤 手术,放疗,化疗后的机体免疫治疗及血液治疗.为 探讨氨肽素免疫增强机理,我们以?Co辐射小鼠 引起免疫损伤为模型,结果如下. 1材料与方法 1.1主要试剂及仪器氨肽素(Ammoniapeptide element)粉末,丹东华盛生物制药有限公司提供. ConA,四甲基偶氮唑盐(MTT)(Sigma公司).小鼠 CD4,CD8单克隆抗体(为大鼠抗小鼠IgG,北京医 科大学单克隆抗体室).荧光标记第二抗体(为 FITC标记兔抗大鼠IgG,武汉博士德公司).酶标仪 (G3022型,中国南京).流式细胞仪(EpicsProfile ?型,CoulterLtd生产). 1.2动物分组及处理昆明种雄性小鼠5O只(吉林 大学实验动物中心提供),体重(354-2)g,随机分为阴 1000-484X(2O1)6)08-0705-02 性对照组,阳性对照组和200,400,800mJ(kg?d)剂 量氨肽素组.实验组每天灌胃给药1次,并称体重. 1周后,除阴性对照组外,其余各组均以?Co射线 一 次性全身照射,距离0.75m,照射视野20cm×20 cm,照射剂量率为57.0cGy/min照射时间8分钟, 剂量5Gy.照射后氨肽素组继续给药2周,然后测 定指标. 1.3测定指标及方法摘取眼球取血,按常规 WBC计数.颈椎脱臼处死动物,无菌取胸腺后称 重,计算胸腺指数.按文献[2]测定对T淋巴细胞 亚群的影响.按文献[3]方法观察对小鼠脾淋巴细 胞增殖(SI)反应的影响.以4-s表示实验结果,组 间差异用检验,由SPSS12.0软件包进行方差. 2结果 见表1.与辐射对照组比较,3个剂量氨肽素组 小鼠WBC数,胸腺指数,脾淋巴细胞增殖反应,T淋 巴细胞亚群CIM,CIM/CD8改变指标,差异均有显 着意义(P<0.05). 表1对小鼠WBC,SI,胸腺指数和T淋巴细胞亚群CIM,CD8的影响(x4-$) Tab.1EffectonWBC,SI,thymusindexesandTlymphocytesubsetsCD4.CD8ofmice(X?) Note:n=10,1)Comparedwithnegativecontrol,P<0.Ol;2),3),4)Comparedwithpositivec ontrol,P<0.05,P<0.01,P<0.001 3讨论 本实验用5Gy的?Co射线一次性辐射小鼠, ?本课题为辽宁省丹东市科技创新项目(0412) ?吉林大学中日联谊医院中心研究室,长春130031 一),女,副教授,主要从事天然保健产物 作者简介:焦淑萍(1961年 药理学研究. 引起小鼠免疫系统的白细胞数降低,胸腺指数下降, 脾淋巴细胞增殖反应降低,T淋巴细胞亚群CD4, CD4/CD8减少.结果显示,氨肽素3个剂量组对辐 射引起的以上指标改变均有显着的恢复和治疗作 用,说明氨肽素具有增强机体免疫功能的作用.氨 肽素在临床上已有2O多年的应用历史,但在增强机 体免疫力作用方面的研究未见报道.辐射导致的免 疫损伤是—个动态过程,氨肽素对辐射引起的机体免 疫功能下降的恢复和治疗机制还有待进一步探讨. 4参考文献 1张豁中,温玉麟.动物活性成分化学[M].天津:天津科学技术出 版社,1991:710-711. 2巴德年.当代免疫学技术与应用[M].北京:北京医科大学中国 (上接第699页) 株检出cagA基因(70.7%).我们实验室曾对临床 分离的坳进行oipA基因的检测,结果显示oipA 总检出率为46.6%,但在胃溃疡患者中oipA 的检出率达100%,oipA'的菌株96%检出cagA基 因,表明oipA主要存在于高毒力的菌株中[51.2004 年Graham等?叫应用cagA致病岛阴性,oipA阳性的 坳菌株,通过志愿者121服实验,发现该菌株同样可 以引起胃炎的发生,进一步证明oipA毒力在致 病中的重要作用.oipADNA疫苗的研制,有望用于 高毒力坳感染的预防. 为探讨oipA作为候选疫苗在预防尤其是高 毒株感染及治疗上的可行性,本研究成功构建了 pVAX1一oipA重组质粒,在证实pVAX1?oipA能够表 达相应的蛋白,且进入机体可诱导免疫应答的基础 上,肌注免疫6周龄BALB/c小鼠,再用SS1攻 击,继而对小鼠胃组织标本进行细菌学和组织学检 测,结果表明pVAX1一oipA具有抗的免疫保护作 用,保护作用达80%.该疫苗产生的免疫保护作用 可能同时与机体的体液免疫和细胞免疫都有关,因 而尽管pVAX1.oipA免疫小鼠后所产生的抗oipA抗 体滴度并不高,但仍可通过细胞免疫共同发挥保护 作用.pVAX1.oipA的免疫保护机制有待进一步研 究加以证实. 目前DNA疫苗所采用的质粒表达载体大多以 pUC系列载体为基本骨架,如pcDNA3.1等,这些载 体含氨苄青霉素抗性标志,其缺点是:合成的B.内 酰氨酶具有致过敏的作用;耐药质粒可能在体内传 播导致机体对氨苄青霉素耐药性的出现.pVAX1 是一种3.0kb的质粒载体,可在大肠杆菌中以高拷 贝数复制,易获得高产量的纯化DNA疫苗;并可在 大多数哺乳动物细胞中瞬时表达目的蛋白;以卡那 霉索为其抗性标志,此外pVAXI结构符合美国FDA (FoodandDrugAdministration)文件规定,去除了与 在原核细胞内扩增和真核细胞内表达无关的序列, 减少与人体基因组可能同源的序列,将其整合入染 中国免疫学杂志2006年第22卷 协和医科大学联合出版社,1998:80-85,203-207. 3陈月,王宝贵,张桂英.刺五加皂苷的抗辐射损伤作用[J】.吉 林大学(医学版),2005;31(3):423-425. [收稿2005.10.2O修回2006-02-20] (编辑许四平) 色体的可能性降低到最低限,因而以pVAX1为载体 的DNA疫苗有望进一步应用于人体. 4参考文献 1Nan:loneG.AtaibanoS.ToccoAd.EffectofHelicoboaerpylori infectionanditseradicationoncellproliferation,DNAstatUs,and oncogeneexpressioninpatientswithchronicgastritis[J].Gut, 1999;44(6):789-799. 2PetersonWL.Hdicobacterpyloriandpepticulcerdisease[J】.NEn? glJMed,1991;324(15):1043—1048. 3YamaokaY,KikuchiS,EI-ZimaityHMda1.ImportanceofHel/co- bacterpy/otioipAinclinicalpresentation,gastricinflammation,and mucosalinterleukin8production[J].Gastroenterology,2002;123 (2):414424. 4YamaokaY,KitaM,KodamaTeta1.Helicobacwrprioriinfectionin mice:roleofoutermembraneproteinsincolonizationandinflamma— tion[J].Gastroenterology,2002;123(6):1992-2004. 5张静,余菲菲,陈月秀eta1.幽门螺杆菌cagA,oipA,ieeA1基因 的检测及意义[J].中国卫生检验杂志,2004;14(2):133.134. 6IsamiTodoroki,TakashiToh,KatsushiWatanabed口I.Suppressive effectsofDNAvaccinesencodingheatshockproteinon//el~:oMaer priori?inducedcastritisinmice[J].BiochemicalandBiophysicalRe- searohCommunications.2Ooo;277:159?163. 7MasayukiMiyashita,TakashiToh.KatsushiWatanabed.Immune responsesinmicetointranasalandintracutaneousadministrationofa DNAvaccineencodingHellcobacterpriori?catalase[J].Vaccine, 2002;20:2336-2342. 8AndoT,PeekRM.PrideDela1.PolymorphismsofHdicobaaerpy. 1orlHP0638reflectgeographicoriginandcorrelatewithcasAstatUs [J].JClinicalMicrobiology,2002;40(1):239.246. 9TakahikoK,ZhannatZN,MargaretECeta1.Correlationbetween HelicobacterFflorioipAproteinexpressionandoipAgeneswitchstatUs [J].JClinicalMicrobiology,2004:42(5):2279-2281. 10GrahamDY,OpekunAR.OsatoMSet.Challengemodelfor Helicobacterprioriinfectioninhumanvolunteers[J].Gut,2004;53 (9):1235.1243. [收稿2005-07?22修回2005.12.10] (编辑许四平)