[管理]尿蛋白定量留存方法

[管理]尿蛋白定量留存方法 关于24小时尿蛋白定量时尿液标本的留存方法: 1. 送检标本为从24小时尿中取3ML送检,并在化验单上注明24小时总尿量; 2. 防腐剂取甲苯或者二甲苯,本法主要的防腐原理为在尿液面形成一薄层,从而阻止与空气的接触; 3. 加入量为每100ML尿加防腐剂0.5ML,要随着尿液收集的增多而逐次增多,如使用敞口容器收集尿液,可一次性多放些防腐剂,但最多不得超过每100ML尿液加2ML防腐剂,送检时,需用吸管吸取防腐剂下的标本送检。 地中海贫血简介 一、概述: (一)定义 地中海贫血是我国南方最常见的一种遗传病，是一类由于珠蛋白基因缺失或缺陷，而使某些珠蛋白肽链合成受抑制引起的溶血性贫血，又称珠蛋白合成障碍性贫血或海洋性贫血。地中海贫血在广东的发病率相当高，α地中海贫血发病率高达7%—8%，β地中海贫血的发病率为2%—3%. (二)人类血红蛋白的组成。 1、人类血红蛋白的组成: 人类血红蛋白是由4分子血红素和4条珠蛋白肽链组成的结合蛋白质。这4条珠蛋白肽链是由两对不同的珠蛋白肽链组成，其中一对为α链(α,ξ),共141个氨基酸; 另一对为非α链(β,γ,δ,ε),共146个氨基酸。胎儿期的主要非α链是γ链，成人的主要非α链是β链。在接近分娩时，γ链合成逐渐减少，β链合成逐渐增多。 2、人类不同时期血红蛋白的组成: (1)胚胎期血红蛋白: Hb Gower 1 (ξε) 22 Hb Gower 2 (αε ) 22 Hb Portland (ξγ ) 即Hb Portland 1 22 另有少量Hb Portland 2 (ξβ )，Hb Portland 3 (ξδ ) 2222 (2)胎儿期主要血红蛋白: HbF (αγ) 22 (3)成人主要血红蛋白: HbA (αβ) 约占血红蛋白总量96.5—97.5%，是主要的携氧血红蛋白。22 HbA (αδ) 约占血红蛋白总量2.5—3.5%，是诊断α地贫和β地贫较222 灵敏的指标。 HbF (αγ) 约占血红蛋白总量1%以下。 22 二、α地贫 α地中海贫血是由于α基因缺失或缺陷而引起的α珠蛋白肽链合成障碍的疾病。 (一)分子机制: 1、基因缺失 正常人一条16号染色体上有两个α基因，两条16号染色体上共有四个α基因，缺失型α地中海贫血患者可发生1—4个α基因缺失。 2、点突变: 这类α地中海贫血又称非缺失型α地中海贫血，有时也把它们并入类地中海贫血综合征。最常见的是Hb Constant Spring，其142位的终止密码子发生有义突变，使得α链延长为172个氨基酸。 (二)临床分类: 1、Hb Bart’S 胎儿水肿综合征 这是α地中海贫血中最严重者，其基因型为(— —/— —)。由于4个α基因全部缺失，完全不能合成α链，不能形成HbF(αγ)，相对过多的γ链形成γ链四聚体γ，224γ称为Hb Bart’S，Hb Bart’S氧亲和力高，释放给组织的氧很少，胎儿由于严重缺氧，4 全身水肿。胎儿患此症者大多于妊娠30—40周，平均34周时，成为死胎或早产后不久即死亡。这种胎儿生下时，全身水肿苍白，胎盘大而易碎，可有轻度黄疸、出血点多见，脑血管常显著弯曲，肺发育不全，心脏明显肥大，胸腺缩小，肝脾肿大、腹水较多，胸腔及心包内亦常有积液，骨髓中红髓增生过多，含铁血黄素沉着明显增多(表示曾有严重溶血)，肝、脾和其他器官中有髓外造血。 贫血常较重，血红蛋白30—100g/L，平均60—70g/L。红细胞的MCV偏大，MCHC常低。红细胞大小不匀、异形、染色嗜碱以及靶形红细胞都很明显。网织红细胞显著增多。末梢血中有较多有核红细胞。 电泳:大部分为Hb Bart’S，HbH可有少量或无，其余均为Hb Portland。患儿父母均至少缺失两个α基因。 2、 血红蛋白H病 血红蛋白H病属于中间型α地中海贫血，其基因型为(—α/— —)或为(α—/— —)，缺失3个α基因，仅可合成少量α链，β链相对过多，多余的β链形成β链四聚体β，β即HbH。此类患者临床表现变动范围很大，有的可相当严重，有的病情较轻，44 可无明显不适。出生时婴儿可无贫血或只轻度贫血，肝脾亦不肿大，但红细胞形态异常已经存在。出生后一年其临床特点可显示出来，2/3以上病例有肝脾肿大，重者可见轻度黄疸。贫血可因感染和服用氧化性药物而加重。胆结石为常见并发症。 血红蛋白大多在70—100g/L间，但贫血严重时，可低至30g/L。红细胞低色素明显，靶形红细胞多见，大小不匀，异形红细胞多见，渗透脆性明显减低。红细胞经活体培养染色后可见较多亨氏小体(Heinz body)。 电泳:成人:可见HbH ，有的患者HbH含量很少，容易漏诊，需要结合红细胞形 态和亨氏小体。HbA:降低。 2 新生儿:Hb Bart’S较多，HbH少量，随着年龄的增大(γ链合成减少,β链合成增多)，HbH逐渐增多，Hb Bart’S逐渐减少，到6个月时Hb Bart’S可完全消失。 3、 轻型α地中海贫血 轻型α地中海贫血是按临床分类所划分，轻型α地中海贫血按α基因缺失的多少又可分为型α地中海贫血(缺失两个α基因)和静止型α地中海贫血(缺失一个α基因)。轻型α地中海贫血可无任何临床症状，也可以没有贫血或只轻度贫血，临床上很难做出正确的诊断。有的患者红细胞可有轻度异常，可见到小红细胞、异形红细胞。红细胞经活体培养染色后可找到蓝紫色较大的亨氏小体(本实验所检测的亨氏小体是一种变性珠蛋白小体，是由相对过多的β链聚合成β链四聚体沉积在红细胞膜上而形成)。 电泳:成人:Hb A轻微降低或正常。HbA正常。 2 新生儿:可见少量的Hb Bart’S，Hb Bart’S在3个月后消失。新生儿血红蛋白电泳发现Hb Bart’S是诊断轻型α地中海贫血最有价值的方法之一。 (三)防治: 1、轻型α地中海贫血:轻型α地中海贫血对患者本人并无多大不良影响，也不需治疗，但在遗传上有重要的意义。若夫妻双方均为— —/αα型地中海贫血，则有1/4可能性生下Hb Bart’S 胎儿，生下正常胎儿的可能性也仅为1/4。若能准确地诊断出夫妻双方均为— —/αα轻型α地中海贫血，则可以在妊娠期间进行B超检查、基因检查或抽取胎儿血做血红蛋白电泳，若发现为Hb Bart’S 胎儿，可考虑尽早终止妊娠。 2、 血红蛋白H病:患有HbH病的患者在病情稳定的情况下，多数病人不需治疗。当贫血加 重时，首先应注意有无感染、服用药物促使贫血加重。许多药物，特别是氧化性药物如磺胺类药，均能促使红细胞内的HbH发生沉淀而加速溶血。如病人还有缺铁情况，应给以铁剂。 输血在病情稳定的情况下并不需要。只有在急性溶血较严重、贫血一时不能很快纠正时，可以考虑输血。 长期较严重的贫血或巨脾患者，可考虑切除脾脏。贫血虽然较严重，但如感染、服药或其他加重贫血的因素尚未排除，不应贸然施行脾切除术。需要注意的是:脾切除后，患者容易感染。 3、 Hb Bart’S 胎儿水肿综合征:Hb Bart’S 胎儿水肿综合征尚无有效的治疗措施，目前所能做 的只能是有关婚姻和生育方面的医学指导，争取做到尽量避免、尽早发现。 三、β地中海贫血 β地中海贫血是由于β珠蛋白肽链合成减少或完全不能合成所造成的。β链合成减少者称为 +0β地贫，β链完全不能合成者称为β地贫。 (一)分子机制 1、点突变 绝大多数β地贫是由于β珠蛋白基因发生点突变所致，突变涉及基因功能结构各个 环节。 2、β基因缺失 (二)β地中海贫血的临床分类 1、重型β地中海贫血 重型β地中海贫血是威胁生命的严重疾病，β链几乎不能合成或合成很少。正常情况下，成人α链和β链的合成比例是相等的，β链主要用于Hb,的合成，如果没有β链或β链合成很少，则大量的α链呈游离状态，游离的α链很不稳定，易在RBC内生成沉淀，形成α链的包涵体，损伤细胞膜，使细胞变得僵硬，不能通过脾窦内皮间隙，而被巨噬细胞吞噬破坏。有包涵体的无核RBC，进入血液循环后，亦因其变形性差，通过脾脏时被扣留，“摘除”包涵体，同时带走部分细胞膜而使RBC变成泪滴状，循环血液中，RBC的寿命大大缩短。 重型β地贫患者初生时与一般正常婴儿无异，因为此时的非α链主要是γ链，血红蛋白成份主要是HbF，β链合成受抑制所引起的HbA减少并不明显。但随着γ链的合成量显著减少，出生约6个月后，患者即日渐苍白，出现黄疸，肝脾肿大，腹部膨隆，发育障碍，智力迟钝，易感染和发热，皮肤色素沉着，下肢可出现慢性溃疡。重型β地中海贫血病人可出现“愚样型面容”，形成原因与红细胞大量破坏，骨髓必须超常制造RBC而使得骨髓腔扩大有关。 患者可发生多种并发症。慢性溶血和长期多次输血可引起继发性血色病或铁血黄素沉着症，心肌易累及，可引起心律紊乱、传导阻滞和心力衰竭。 患者贫血常很严重。红细胞大小不等，低色素明显，红细胞形态异常明显，红细胞渗透脆性显著减低。 电泳:HbF明显增高;HbA明显减少或消失;HbA变动较大，但增高者并不多见。2 2、 中间型β地中海贫血 中间型β地中海贫血是临床名称，是其临床症状、贫血程度介于重型与轻型之间的β地中海贫血。本病一般于4—5岁时发病，呈慢性中度贫血，生长发育正常，脾中度肿大，可生存至成年，红细胞异常较多见。 电泳:HbF增高;HbA减少;HbA可有增高。 2 3、 轻型β地中海贫血 多数患者症状较轻或无症状，只轻微贫血或无贫血，可见小红细胞、靶形红细胞和其他异形红细胞，渗透脆性可降低。 电泳:HbF正常或略微增高;HbA增高。HbA是诊断轻型β地中海贫血较为特异22 的指标(注意:轻型β地中海贫血复合α地中海贫血时，其Hb A也可增高)。2 (三)防治: 1、预防:夫妻双方均为β地中海贫血的患者，可在妊娠期间做β基因检查以确定胎儿是否患有β重型地中海贫血。 2、治疗:严重贫血患者可给予输血，对反复输血引起的铁负荷过重者可试用促进铁排泄的螯合剂;脾功能亢进者可考虑切脾，但疗效较HbH病差，且易感染。 四、δβ-地中海贫血 δβ-地中海贫血的δ链和β链合成受抑制，其患者HbF常增高;纯合体病人只有HbF，故这种疾病也叫F-地中海贫血。 1、纯合体δβ-地中海贫血 纯合体δβ-地中海贫血多属中间型地中海贫血，常有中等程度贫血，某些病人可有轻度黄疸或脾肿大，也有体检未见异常者。 血片:红细胞中等程度的着色不足，明显的形态异常和大小不等，并有不同数量的靶形红细胞，红细胞渗透脆性降低，根本无HbA，只有HbF。 2 2、杂合体δβ-地中海贫血 与轻型β-地中海贫血相似，但HbA水平不高，HbF增高。 2 Hb:正常或稍低 红细胞:形态同轻型β-地中海贫血，可见小红细胞和异形红细胞。 电泳:HbA水平往往正常，HbF增高。 2 五、δ地中海贫血 δ地中海贫血是很少见的一种地中海贫血，其特点是单纯的杂合子的HbA减少，2纯合子则HbA完全没有。无论杂合子或纯合子者，HbA及HbF均仍正常，红细胞形态2 无异常，也不发生贫血。 六、类地中海贫血综合征 1、血红蛋白 Constant Spring(Hb CS) HbCS是一种α链异常的变异物，有的资料上也把它们并入α地中海贫血。这种异常Hb的携带 者，临床症状不明显，故不易被发现，但与α地中海贫血并存时，病情较严重，称CS型HbH病。 CSCSCS)HbCS病有杂合体(αα/αα)，纯合子(αα/αα)(1 血红蛋白电泳除HbA、HbA外，还可见少量HbCS。新生儿患者可检出Hb Bart’s。2 纯合体临床表现:低色素性贫血，肝脾稍肿大，血红蛋白低于正常，有红细胞异形及小细胞症。 杂合体:体征不明显，轻度贫血或不贫血，红细胞稍有异常。 (2)CS型血红蛋白H病 CS病人缺失两个α基因，还有一个α基因变成α基因。其临床表现要重于普通型HbH病，患者有中度贫血，肝脾肿大，红细胞形态大小不等，靶形红细胞约为10%，亨氏小体多见。 电泳:可见HbH、Hb Bart’s、HbCS、HbA;HbA降低。 2 2 2、血红蛋白Lepore综合征 血红蛋白Lepore是由两条正常α链和两条异常的非α链所组成，此异常非α链的特点是N端同δ链，C端同β链。 其遗传机制:推测其相应的结构基因也一定是一部分来自δ链基因，另一部分来自β链基因，并且将这种由两种基因(各一部分)融合或合并而产生的基因称为融合基因或并合基因。两条带有δ-β基因的染色体在减数分裂时发生错配,并且此区域进行交换，同时产生两种互相对应的融合基因:δβ基因(Lepore基因) βδ基因(反Lepore基因) (1)杂合体Hb Lepore综合征 其红细胞着色不足，大小不等，有异形红细胞，红细胞渗透脆性降低。许多血液学结果都与轻型β-地中海贫血相似。 电泳可见HbA、HbF、HbA、Lepore。HbF轻度增高者居多，HbA正常或稍有减22少。 (2)纯合体Hb Lepore综合征 其临床表现与重型β-地中海贫血者非常相似，少数类似中间型β-地中海贫血。 电泳:无HbA、HbA，只有HbF、Lepore。 2