钒化钠对人食管癌细胞系EC109细胞株增殖影响的研究

钒化钠对人食管癌细胞系EC109细胞株增殖影响的研究 DOC格式,方便您的复制修改删减 钒化钠对人食管癌细胞系EC109细胞株 增殖影响的研究 (作者:___________单位: ___________邮编: ___________) 作者,龚向峰 吕军 周立社 邵国 黄丽华 付玉华 闫少春 【摘要】 目的:探讨不同浓度钒化钠对食管癌细胞系EC109增殖作 用的影响。方法:将培养的食管癌细胞系EC109给予不同浓度及时间 的钒化钠刺激,以噻唑蓝(MTT)比色法检测食管癌细胞系EC109增 殖及增殖抑制情况。结果:一定浓度的钒化钠对食管癌细胞系EC109 有生长抑制作用。结论,一定浓度的钒化钠能明显抑制食管癌细胞系 EC109细胞株的生长。 【关键词】 钒化钠;食管癌;增殖抑制 Abstract Objective, To study the proliferation effects of sodium vanadate(SV) of different concentrations on the esophageal cancer cell line EC109. Methods: cells were stimulated with different concentrations of SV and the proliferation of cells was detected by MTT assay method at different druation. Results: DOC格式论文,方便您的复制修改删减 Sodium vanadate of certain concentrations could present proliferation inhibition effects on EC109 cells. Conclusion: Sodium vanadate of certain concentrations can remarkably inhibit the proliferation of human esophageal cell line EC109. Key words Sodium vanadate; Esophageal cancer; Proliferation inhibition 钒是化学元素周期表中VB族的过渡元素,现己经被确认为人 体必需的一种微量元素,参与人体许多不同的生理过程,如细胞的生 长和分化、糖类及脂类的代谢等[1]。钒的药理作用报道最多的是它的 降血糖作用[2]。随着对钒研究的深入,其抗癌作用也引起人们的注意。 Ray等[3]研究显示钒化钠可以促进乳腺癌MCF7细胞凋亡抑制其增 殖,显示了钒化钠作为有效的化疗制剂的潜能。但是关于钒化钠对食 管癌细胞方面的研究报道尚少[4]。 本研究在体外实验中观察钒化钠对食管癌细胞系EC109的作 用,研究钒化钠是否对食管癌细胞系EC109具有增殖抑制作用,并进 一步揭示钒化钠抗肿瘤作用的分子机制,扩大其抗肿瘤谱,为钒化钠 进一步发展成一种新型的抗肿瘤药物提供理论依据。 1 材料与方法 1.1 药品 钒化钠购买于北京化学试剂公司,纯度为纯。 MTT和RPMI1640培养基购自Gibco公司,胎牛血清购自杭州四季青 生物材料有限公司,二甲基亚砜、十二烷基硫酸钠、丙烯酰胺等化学 试剂购自Sigma公司,BCA蛋白分析试剂盒购自PIERCE公司。 DOC格式论文,方便您的复制修改删减 1.2 细胞株 人食管癌细胞系EC109购于中国科学院上海生科院细胞资源中心。食管癌细胞系EC109在37 ?、饱和湿度及5 % CO2条件下,用培养瓶在含10 %胎牛血清、1×105 U/L青链霉素的RPMI1640培养液中传代培养。 1.3 生长抑制实验(MTT法) 常规培养人食管癌细胞系EC109细胞,将对数生长期的细胞调整细胞浓度为5×107/L,待培养24 h细胞贴壁生长后分为对照组和实验组,对照组加入RPMI-1640培养液,实验组加入用无血清培养基配制的终浓度分别为0.1 μmol/L、1.0 μmol/L、5.0 μmol/L、10.0 μmol/L、50.0 μmol/L、100.0 μmol/L和200.0 μmol/L钒化钠试剂,每一浓度设6个复孔,分别于加药后培养4 h、12 h、24 h、48 h检测各组细胞增殖抑制的差异。 1.4 统计学处理 采用SPSS 11.0软件包对数据进行单因素方差分析,统计数据以均数?标准差(x?s)表示,P0.05为差异有统计学意义。 2 结果 钒化钠对食管癌细胞株EC109的增殖抑制作用,MTT法检测钒化钠在0.1,200.0 μmol/L浓度范围内对EC109细胞增殖的影响。结果显示,用钒化钠处理EC109细胞4 h,各个药物作用组对细胞无抑制作用(P0.05);用钒化钠处理EC109细胞12,48 h,在0.1,10.0 μmol/L浓度范围内对EC109细胞无抑制作用,药物作用组与对照组之间的OD值差异无统计学意义(P0.05);但在50.0,200.0 μ DOC格式论文,方便您的复制修改删减 mol/L浓度范围内对EC109细胞的抑制作用呈剂量依赖效应关系和时间依赖效应关系,药物作用组与对照组之间的OD值相比差异有统计学意义(P0.05);随药物作用时间的延长,药物浓度越高,其抑制作用越强。见表1。表1 钒化钠对食管癌细胞株EC109增殖的效应 3 讨论 食管癌是常见的消化道恶性肿瘤之一,寻找有效的化疗药物成为食管癌治疗领域研究的热点。钒化钠以其无致命不良反应而用于糖尿病病人的干预治疗[5],表明钒化钠作为临床治疗药物的潜在可能性。Bishayee等[6]报道了一系列钒制剂对动物模型系统的抗肿瘤活性。生长细胞对钒化钠的毒性作用更敏感,通过皮下注射,钒化钠很有效地抑制了小鼠肿瘤生长,抑制癌细胞生长增殖[7]。本研究利用MTT法,分析钒化钠对肿瘤细胞生长的抑制作用及其分子机制。为进一步将钒化钠研发成一种新的化疗药物提供理论基础。 MTT比色法是反映细胞增殖常用的方法。MTT能被活细胞线粒体中的琥珀酸还原酶还原为蓝紫色结晶,其490 nm的A值(MTT测定值)与活细胞的数目成正比。MTT法的测定结果表明高实验浓度(?50 μmol/L)钒化钠对食管癌细胞株EC109细胞有明确的生长抑制作用,随药物作用时间的延长,药物浓度越高,其抑制作用越强。这一结果为钒化钠防治食管癌的临床应用奠定理论基础。由于细胞生长抑制是一个极其复杂、涉及多步骤、多因子参与的过程,故钒化钠抑制肿瘤细胞生长的详细机制仍需进一步研究。 【参考文献】 DOC格式论文,方便您的复制修改删减 [1] Stern A,Yin X,Tsang SS,et al.Vanadium as a modulator of cellular regulatory cascades and oncogene expression[J].Biochem Cell Biol,1993,71:103-112. [2] Heyliger CE,Tahiliani AG,McNeill JH.Effects of vanadate on elevates glucose and depressed cardiac performance of diabetic rats[J].Science,1985,227:1474-1477. [3] Ray RS,Rana B,Swami B,et al.Vanadium mediated apoptosis and cell cycle arrest in MCF-7 cell line[J].Chemico-biological Interactions,2006,163:239-247. [4] 吕军,姜树原,邵国,等.钒化钠对食管癌细胞系 EC109 Caspase-3表达的影响[J].包头医学院学报,2008,24(3), 221-223. [5] Goldfine AB,Simonson DC,Folli F,et al.In vivo and in vitro studies of vanadate in human and rodent diabetes mellitus[J].Molecular and Cellular Biochemistry,1995,153:217-231. [6] Bishayee A,ChaLterjee M.Inhibitory effect of vanadium on rat liver carcino genesis initiated with diethyl DOC格式论文,方便您的复制修改删减 nitrosamine and promoted by Phenobarbital[J].Br Cancer,1995,71:1214-1220. [7] Cruz TF,Morgan A,Min W.In vitro and in vivo antineoplastic effects of orthovanadate[J].Molecular and Cellular Biochemistry,1995,153:161-166.