蛋氨酸螯合锌测定方法的研究

蛋氨酸螯合锌测定方法的研究 饲料 蛋氨酸螯合锌测定方法的研究 周建群罗玉芳王韶辉谢梅冬李妍 1.广西南宁市泽威尔饲料有限责任公司 2.成都蜀星饲料有限公司 3.广西饲料监测所 4.广西化工研究院 中图分类号:$816.17文献标识码:B文章编号:1002—2813(2008)02—0048—02 蛋氨酸螯合锌是由蛋氨酸与硫酸锌经合成反应 形成的蛋氨酸锌螯合物.产品中螯合物所占比率决 定该物质的生物利用率,影响动物体的消化吸收. 产品螯合率的测定在衡量产品质量,改进生产工 艺和研究微量元素的作用机制方面等均有积极意义, 但目前螯合率的测定均较复杂,如离子交换树脂法,凝 胶过滤色谱法和电极法等,这些方法一般实验室难以 检测.为此,试验针对螯合物产品重点研究出一套简 便易行的检测方法,经多次比对结果令人满意. l试验材料 无水甲醇,双硫腙氯仿溶液(5~g/mL),EDTA标 准滴定溶液(0.05mol/L),抗坏血酸,硫脲溶液 50L,氟化铵溶液200g/L,盐酸溶液(1+4),乙 酸一乙酸钠缓冲溶液,二甲酚橙指示液2g/L.盐酸 溶液(1+1),氨水溶液(1+1),磷酸氢二钾溶液 500g/L,磷酸二氢钾溶液200g/L,碘化钾溶液 200g/L,碘溶液:c(1/2I2)约0.1mol/L,硫代流酸钠 滴定溶液:c(Na2S203)约为0.1mol/L,淀粉指示 液l0L. 2原理 氨基酸微量元素螯合物几乎不溶于甲醇等有机 溶剂,而游离金属离子均能溶解于甲醇等有机溶剂, 利用这一特性,我们用检测无水甲醇提取液中锌离子 的办法来区分是否是纯的氨基酸微量元素螯合物. 3鉴别方法 纯的氨基酸微量元素螯合物在有机溶剂中应没 有游离的金属离子存在.另外,因为双硫腙易与 cu,zn和Fe离子形成红色络合物,所以用双硫腙试 剂鉴别游离金属离子,只要出现红色,就证明螯合物 收稿日期:2OO7—10—24 48饲料研究1,戳}一M 中有一定量的游离金属离子存在,从而证明该产品 不纯.纯的蛋氨酸螯合锌样品的甲醇溶液在加入双 硫腙试剂后呈蓝绿色(原双硫腙的颜色).从二者甲 醇溶液的颜色变化可知样品是否完全螯合. 称取蛋氨酸螯合锌试样1g,用25瑚L无水甲醇提 ,取滤液0.1mL加入3mL双硫腙氯仿溶液,试 取,过滤 样应呈蓝绿色(双硫腙颜色),不得出现红色现象. 为验证此方法的可行性,用蛋氨酸与硫酸锌按 照蛋氨酸螯合锌的配比,混合成蛋氨酸与无机锌盐 的混合物,然后用上述方法与蛋氨酸螯合锌做比较. 检验结果见表1. 蛋氨酸混合锌样品的甲醇溶液在加入双硫腙试 剂后呈红色,蛋氨酸螯合锌样品的甲醇溶液在加入 双硫腙试剂后呈蓝绿色(双硫腙颜色),所以双硫腙 确实能与游离的金属离子形成红色络合物,从二者 甲醇溶液的颜色变化可知样品是否完全螯合. 此鉴别方法有效检测了产品的螯合情况,在鉴 别合格的前提下就可直接测定金属离子及蛋氨酸的 含量. 表1双硫腙试剂检验蛋氨酸螯合锌及蛋氨酸 混合锌样品的甲醇溶液的试验结果 4锌含量的测定 4.1原理 将试样用盐酸溶解,加适量的水,加入氟化铵, 硫脲和抗坏血酸作为掩蔽剂,以乙酸一乙酸钠溶液 调节pH为5,6,以二甲酚橙为指示剂,用乙二胺四 乙酸二钠标准滴定溶液,滴定至溶液由紫红色变为 亮黄色即为终点. 4.2分析步骤 称取蛋氨酸锌式样0.5,1.0g(准确至0.0002g) 置于250mL锥形瓶中,加少量水润湿.加5mL盐 酸溶液(1+4)使试样溶解,加50mL水,10mL氟化 铵溶液,10mL硫脲溶液和0.2g抗坏血酸,摇匀溶 解后加入15mL乙酸一乙酸钠缓冲溶液和3滴二甲 酚橙指示液,用乙二胺四乙酸二钠标准滴定溶液,滴定 至由紫红色变为亮黄色即为终点.同时做空白试验. 4.3结果计算 式样中锌含量x以质量百分数(%)表示,按下 式计算: x:l二.翌×1001A一 ‘m1 式中: ,一滴定试样溶液所消耗乙二胺四乙酸二钠 标准滴定溶液的体积(mE). 一 滴定空白溶液所消耗乙二胺四乙酸二钠 标准滴定溶液的体积(mE). C一乙二胺四乙酸二钠标准滴定溶液的实际浓 度(mol/L). 0.0653与1.O0mL乙二胺四乙酸二钠标准 滴定溶液C(EDTA=1.000mol/L)相 当以克表示的锌质量. m一试样质量(g). 5蛋氨酸含量的测定 5.1原理 在中性介质中加入过量碘溶液,将2个碘原子 加到蛋氨酸的硫原子上,过量的碘溶液用硫代硫酸 钠标准溶液回滴. 5.2分析步骤 称取试样约0.5,1.0g(准确至0.0002g)移人 子水,加10mL盐 500mL碘量瓶中,加入70mL去离 酸溶液溶解,用氨水(1+1)调pH为7,然后分别加 入10mL磷酸氢二钾溶液,10mL磷酸二氢钾溶液 和10mL碘化钾溶液,摇匀,准确加入50.O0mL碘 溶液,盖上瓶盖,水封,充分摇匀,于暗处放置 30min,用硫代硫酸钠标准溶液(0.1moUL)滴定过 量的碘,近终点时加入1mL淀粉指示液(10L), 继续滴定至溶液蓝色消失并保持30s为终点.同 时做空白试验. 5.3结果计算 试样中的蛋氨酸含量x2以质量分数(%)表示, 饲料检测 按下式计算: x2:— (I/2-V3)C— 2x0.0746 ×100一 m2 式中: 一 滴定空白溶液所消耗的硫代硫酸钠标准 溶液体积(mE). 一 滴定试样溶液所消耗的硫代硫酸钠标准 溶液体积(mE). C2一硫代硫酸钠标准溶液的实际浓度(mol/L). 0.0746一与1.00mL硫代硫酸钠标准溶液c (Na203=1.000mol/L)相当以克表 示的蛋氨酸质量. m2一试样质量(g). 6讨论 6.1由于蛋氨酸螯合锌微溶于水,为避免甲醇中含 有的少量水分将锌离子游离出来,所以甲醇必须经 过蒸馏后方可用于试验. 6.2双硫腙试剂与锌离子的络合反应非常灵敏,只 要有痕量的锌离子存在,就会与双硫腙生成红色络 合物,并且颜色随着锌离子的增多而加深,因此只要 出现红色,就证明螯合物中有一定量的游离金属离 子存在.双硫腙氯仿溶液极易挥发,故应现用现配. 6.3方法的适用性 测定多个产品,并用同配比的无机盐产品做对 比,考察方法的适用性见表2. 表2蛋氨酸锌螯合物与蛋氨酸锌混合物的鉴别比较 7结论 这项试验重复性好,鉴别方法反应灵敏,操作简 便,能快速有效的对氨基酸微量元素螯合物的游离 金属离子进行定性检查,锌含量和蛋氨酸含量采用 滴定分析,一般实验室即可进行检测. 通讯地址:广西南宁沿海经济走廊开发区亮岭 路6号530221 饲料研究|~EEDE《NO,!.2{49