庆大霉素生产工艺.doc
硫酸庆大霉素生产工艺
班级08药剂 姓名汪骏 学号08314028
培养48小时左右,培养24小时左右,
pH6.8-7.4pH自无菌接入然,36-37?发酵用小一级种子二级种子三级种子单胞菌罐罐罐
培养24小时左右,
pH6.7-7.4培养4天,洗涤洗脱酸化中和四级种子分离漂洗脱色交换罐34-35?
洗脱收率?98%
浓缩收率?88%调pH至5.0-5.8浓缩成盐脱色压滤
炭脱收率?95%
进塔温度:116-135?
喷速:20-80L/h产品喷雾干燥喷雾收率?90%
硫酸庆大霉素工业发酵的总流程图
孢子悬浮液的制备流程及工艺要求
设备:
蒸汽灭菌柜 双人净化工作台
操作步骤
1.分装纯化水至三角瓶,每瓶装150mL左右。 2.组装接种瓶及接种皮管,组装严密,包扎结实。 3.以上器材及接种用具灭菌,125?1?C,60min。 4.在缓冲间穿好无菌衣,戴上无菌口罩,进入洁净室,符合人流)物流进出程序。
5.用酒精棉球擦拭超净台面)双手,先擦台面,后
擦手。
6.开启超净台通风,观察风速是否正常,将接种瓶、皮管、无菌水、接种铲及斜面摆在洁净台上。
7.将灭菌纯化水倒入茄子瓶中,一瓶纯化水倒两只
茄子瓶。
8.用接种铲将孢子刮下制成孢子悬浮液,用力适
度,勿刮出培养基碎屑。
9.打开接种瓶瓶口,将孢子悬浮液全部倒入接种瓶
中,注意不要倒在瓶口处,然后重新组装好接种瓶及接种皮管。
10. 制备完毕关闭洁净台,出洁净室,符合人流、
物流进出程序。
物料指标
物料编物投产数号 料名称 量
06010纯150-2013 0ml 化水
--- 子4支
斜面孢子
一级种子发酵培养
实际培养参数控制
培养参数控制
培罐罐空空搅养时间 温 压 气压力 气流量 拌时间
43003-8小时7度 .06MPa .1MPa 0m*3/h - 左右
镜检
镜检步骤
1.取样 打开蒸汽阀先灭菌,然后关蒸汽阀,打开取样阀取样。取样完毕后关阀,再次打开蒸汽阀灭菌,关闭。
2 用载玻片沾取一薄层发酵液,加热以使发酵液固定在载玻片上,然后滴加美兰溶液进行染色,在显微镜下观察目
的菌的菌丝形态。
3.配制酚红肉汤培养基,在培养基中加入发酵液在恒温箱中进行培养。一定条件下观察培养基颜色的变化来判断是
否染菌。
4.另取样用粘度计测粘度。
一级种子镜检
1.正常
菌丝形态:实团,网团,边散,伸展,原生质充足。
无菌度: 正常,即无杂菌污染。
3.实例 批号21011097
一级种子镜检生长指标
生菌菌杂长时间 丝形态 丝数量 菌情况
2小量正2h 网、分支短 少 常
3网量正0h 团、实团 一般 常
3网量正8h 团、较伸展 较多 常
4实量正6h 团、边散 多 常
5实量正1h 团、伸展 多 常
二级种子的培养
进料状况
4 二级种子培养进料状况
物物投生批
料编号 料名称 料量 产单位 号
0淀1卫0
101009 50Kg 609014 粉 辉玉兰公
司
0玉4自0101006 0 Kg 907001 米粉 制
0豆1自0101007 00 Kg 907009 饼粉 制
0蛋2滑0101003 5 Kg 906013 白胨 云东升公
司
0硫4中0101002 Kg 906004 酸铵 石化岳阳
公司
0硝0交0101004 .4 Kg 903002 酸钾 城晋盛公
司
0轻2焦0101001 5 Kg 905003 质碳酸钙 作兰冠耀
公司
0氯3上0103272 0 g 90309 化钴 海先金公
司
0泡0开0101016 .6L 905013 敌 封树脂厂
0饮3 601007 .2t 用水
二级种子镜检
1.正常标准
菌丝形态:网团,边散,伸展,连片、原生质充足。
无菌度: 正常,即无杂菌污染。
2.实例 批号 21011097
表5 二级种子镜检生产指标
生菌菌杂长时间 丝形态 丝数量 菌情况
4散量正h 网、连片 多 常
8大量正h 网片、伸展 多 常
1大量正2h 网片、伸展 多 常
1大量正6h 网片、伸展 多 常
实际培养参数控制
表6 二级培养参数控制指标
培罐罐空空搅
养时间 温 压 气压力 气流量 拌时间
23001-
4小时7度 .03MPa .7MPa 70m*3/h - 左右
三级种子发酵
进料状况
表7 三级种子培养进料状况
物物投生批料编号 料名称 料量 产单位 号
0淀5卫0101009 50Kg 609004 粉 辉玉兰公
司
0玉1自0101006 20Kg 907001 米粉 制
0豆3自0101007 60Kg 907009 饼粉 制
0蛋6滑0101003 0Kg 906013 白胨 云东升公
司
0硫1中0101002 0Kg 906004 酸铵 石化岳阳
公司
0硝1交0101004 Kg 903002 酸钾 城晋盛公
司
0轻7焦0101001 5Kg 905003 质碳酸钙 作兰冠耀
公司
0氯1上0103272 20 g 90309 化钴 海先金公
司
0淀1北0102034 50g 904003 粉酶 京东升公
司
0泡3开0101016 L 905013 敌 封树脂厂
三级种子镜检
1. 正常标准
菌丝形态:散网、伸展,连片、量多。
无菌度: 正常,即无杂菌污染。
2.实例 批号 301/327
表9 三级种子镜检生产指标
生菌菌杂
长时间 丝形态 丝数量 菌情况
3散量正
h
网、连片、伸多 常
展
7大量正
h 片散网、伸展 多 常
1大量正
1h 片散网、伸展 多 常
1大量正
5h 片散网、伸展 多 常
提炼车间生产概况和流程
提炼组的任务是将庆大霉素从来自发酵车间的发酵液中提炼出来,同时也负责本车间低单位稀氨洗脱液和成盐炭脱车间活性炭滤饼中庆大霉素的提取,并最终得到含庆大霉素的
洗脱液,送入浓缩岗位浓缩。
庆大霉素与其他物质的分离采用阳离子交换树脂,这是基于庆大霉素的弱碱性实现的。用浓氨解析,阴离子交换脱
色。
发酵液 回收
套用下一批酸化罐氨回收罐
树脂分离器分离树脂复合物
漂洗罐回收,套用下一批除杂质
稀氨洗涤生物效价低于200u/ml低单位收集罐
阳离子交换柱浓氨洗脱
低于600u/ml阳串阴
脱色回收提炼车间流程图 测定生物效价洗脱液贮灌高于600u/ml酸化、中和
加树脂吸附分离漂洗
发酵液阳离子交换柱酸化罐树脂分离器漂洗柱饱和树脂通空气
赶气泡
回收、氨捞(再吸附)含部分庆大霉素的洗脱液饮用水
疏松0.08-0.12M稀氨洗浓氨 稀酸洗4.5%-5.3%1:20VVM-1:40VVM 洗脱纯化水冲洗0.05M盐酸、0.02M氯化铵pH8.5-9解析除氯离子除钙离子、镁离子除蛋白质等杂质
调节pH值至碱性
旋光效价解析完毕后水洗使树脂再生需要时收集压回酸化罐旁的树脂计量槽再生树脂
9500-12000L
200-1000u/mL 旋光效价>1000u/mL
加入浓氨水作阳离子交换柱洗脱液低单位洗脱液贮罐3000-4000L
酸洗、碱中和阴离子交换树脂再生
经阳串阴管道进入阴离子交换柱
高单位洗脱液脱色洗脱液贮罐送入浓缩车间流速1:100-150VVM
提炼车间流程简介
酸化、中和
操作
1.备好酸化用盐酸、中和用10mol/LNaOH,压
备用树脂入计量槽;
2.接发酵液20吨左右入酸化罐,缓缓加入盐酸(约1.5吨),调pH1.4-3.0,加入泡敌消沫,计量体积。该过程目
的在于裂解菌丝体,释放其中的庆大霉素,以提高收率。
3. 加适量饮用水稀释(20%左右),用
10mol/LNaOH中和pH6.4-6.8;
4.按6.5万u/mL(50吨、45吨罐)或6万u/mL(30吨、65吨罐)计量加入732阳离子交换树脂。30min后复测pH,控制在6.4-6.8。交换吸附5-8h。取样送化验组测
生物效价。
庆大霉素的洗涤
操作方法
1. 配制0.5 mol/L HCl与0.2 mol/LNH4Cl混
合液,0.08-0.12mol/L的稀氨。
2. 每柱装饱和树脂1100-1500L,用饮用水及空气疏松树脂并用饮用水赶走气泡。3. 通入稀酸洗涤液至无钙、镁离子,完成后用饮用水冲洗至无Cl-,再用0.08,0.12mol/L
稀氨水洗至pH 8.5,9.0。
庆大霉素的洗脱和脱色
操作方法:
1. 配制4.5-5.3%的浓氨。
2. 用纯化水疏松并冲洗树脂中氮根。 3. 用4.5%-5.3%浓氨水解吸至洗脱液旋光效价
控制在1000 u/mL。
4. 第2罐透光度低于70%时,用2mol/L HCl
和2mol/L NaOH对711脱色树脂进行再生,使其可以循环使用。注意洗脱收率在98,以上。
5(树脂吸率的计算公式:树脂吸率(%),树脂
投量/总回收树脂
洗脱收率=洗脱总亿,发酵总亿
庆大霉素的洗脱和脱色
操作方法:
1. 配制4.5-5.3%的浓氨。
2. 用纯化水疏松并冲洗树脂中氮根。 3. 用4.5%-5.3%浓氨水解吸至洗脱液旋光效价
控制在1000 u/mL。
4. 第2罐透光度低于70%时,用2mol/L HCl
和2mol/L NaOH对711脱色树脂进行再生,使其可以循环使
用。注意洗脱收率在98,以上。
5(树脂吸率的计算公式:树脂吸率(%),树脂
投量/总回收树脂
洗脱收率=洗脱总亿,发酵总亿
庆大霉素的成盐碳脱
成盐
配置人员穿好防护用品,先抽入总体积2/3的纯化水,在夹层冷却下再缓慢抽入1/3的浓硫酸,搅拌均匀,冷却应在0.5小时以上。上批装塔的浓缩液与本批浓缩液混合后压入成盐炭脱罐。在不断搅拌及夹层通冷却水冷却下缓慢加入6mol/L的硫酸液,调pH至5.0-5.8,当pH在5.0左右时取
样检测。
炭脱
成盐液温度降到45?以下时,加入767型针用活性炭进行炭脱,加炭量为成盐液体积的5,左右,在搅拌及夹层通蒸汽加热下,升温至65?5?,保温45min后,压缩。第一遍炭脱液由储罐压入成盐炭脱罐调pH在5.3左右,同法进行第二遍炭脱。滤饼用预热的纯化水清洗至尾样在500 u/mL以下,浓缩至比重1.10-1.13,套用于下一批。炭脱脱率在95,以上。
浓
浓缩液
盐脱缩车间 滤碳液
器 脱储酸
罐罐 储精罐压 成炭
炼车间
硫
透
光率
庆大霉素的炭脱流程图
《92%