碱性磷酸酶染色[资料]

碱性磷酸酶染色[资料] 碱性磷酸酶染色 拼音jiǎnxìnglínsuānméirǎnsè 英文参考alkalinephosphatasestaining 概述 成熟中性粒细胞中含有较多碱性磷酸酶。在碱性条件下，碱性磷酸酶经镁离子激活后能将磷酸酯水解为磷酸钠和甘油，磷酸钠再与氯化钙、硝酸钴、硫化铵发生一系列化学反应，生成棕色的硫化钴定位于胞质内。 别名 NAP 碱性磷酸酶染色的医学检查 检查名称 碱性磷酸酶染色 分类 血细胞化学染色>血液检查化验取材 血液 碱性磷酸酶染色的测定原理 碱性磷酸酶在pH9.2,9.8的条件下，能使β-甘油磷酸磷酸磷酸钠水解，生成磷酸钠，经与钙离子作用生成磷酸钙，再与钴离子作用生成磷酸钴，最后与硫化铵生成黑色硫化钴沉淀，定位于胞浆中。 试剂 (1)孵育液:30g/Lβ-甘油磷酸磷酸磷酸钠5ml，20g/L巴比妥钠5ml，20g/LCaCl210ml，其pH以9.2,9.5为宜。 (2)20g/L硝酸钴。 (3)20g/L硫化铵(新鲜配制)，或10ml蒸馏水加硫化铵4滴混合。 (4)10g/L伊红。 操作方法 (1)将标本用95%乙醇固定10min，晾干。 (2)置标本于37?的孵育液中，保温6,8小时。 (3)加20g/L硝酸钴5min。 (4)流水冲洗，滴加20g/L硫化铵5min。 (5)流水冲洗，加10g/L伊红复染5min。 正常值 成熟中性粒细胞呈阳性，其他细胞均呈阴性。 阳性积分正常参考值:80分以下(以计算100个中性杆状核和分叶核粒细胞为准)。 化验结果临床意义 积分降低:见于病毒感染，恶性组织细胞增生症，阵发性睡眠性血红蛋白尿症，急、慢性粒细胞性自血病，红、白血病，骨髓增生异常综合征，继发性红细胞增多症，急性单核细胞性白血病，慢性淋巴细胞白血病。当病情缓解时，积分又可上升到正常。 积分升高:见于化脓性细菌感染、急性大出血、原发性血小板增多症、再生障碍性贫血、红血病、骨髓增生性疾病、急性淋巴细胞白血病、类白血病反应、恶性淋巴瘤、恶性肿瘤、激素治疗等。再生障碍性贫血治疗好转时，积分可降低。 附注 (1)阳性积分计算方法:阳性反应主要见于粒细胞系成熟阶段的分叶核和杆状核细胞的胞质中出现灰色或棕黑色颗粒，其阳性程度分级及积分计算如下。 “-”即阴性反应:0分。 “+”即胞质1/2以下区域出现阳性颗粒:1分。 “++”即胞质l/2,2/3区域出现阳性颗粒:2分。 “+++”即胞质全部出现阳性颗粒，呈片状分布，密度较低:3分。 “++++”即胞质全部都被块状沉淀所充满，密度高:4分。 (2)由于各实验室的实验条件不同，正常参考值也有差异。应建立本实验室的正常值。 (3)碱性磷酸酶活性有生理性变化。新生儿碱性磷酸酶活性升高，以后逐渐下降。成人较儿童活性低，老年期更低。在应激状态下，如紧张、恐惧、剧烈运动时活性可升高。月经前期，活性也可升高。 (4)碱性磷酸酶阳性积分，在妊娠2,3个月时可轻度升高，以后逐月升高，分娩时达高峰，产后恢复正常。 相关疾病 阵发性睡眠性血红蛋白尿、骨髓增生异常综合征、继发性红细胞增多症、慢性淋巴细胞白血病、原发性血小板增多症、再生障碍性贫血、急性淋巴细胞白血病、类白血病反应、恶性淋巴瘤