植物源物质对暗黑鳃金龟引诱和杀虫活性研究（可编辑）

植物源物质对暗黑鳃金龟引诱和杀虫活性研究（可编辑） 分类号 密级 华中农业大学硕士学位论文 植物源物质对暗黑鳃金龟引诱和杀虫活性的研究研究 生:王玉 彬 学 号: 指导教师:张宏宇教授 专业:农业昆虫与害虫防治 研究方向:害虫综合治理 获得学位名称:农学硕士 获得学位时间:年月 华中农业大学植物科学技术学院 二零一三年五月 一夸一二,牛直月 华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书 学位论文 如需保密,解密时间 年 月 日 孬 是否保密 独创性声明 本人声明所呈交的论文是我卟?人在导师指导下进行的研究工作 及取得的研究成 果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不 包含其他人已经发 或撰写过的研究成果,也不包含为获得华中农业大学或其他教育机构的学位或证书 而使用过的材料,指导教师对此进行了审定。与我一同工作的同志对本研究所做的任 何贡献均已在论文中做了明确的说明,并表示了谢意. 日 时间: 月 研究生签名: :/弓年 毗 学位论文使用授权书 本人完全了解华中农业大学关于保存、使用学位论文的规定,即学生必须按照学 校要求提交学位论文的印刷本和电子版本;学校有权保存提交论文的印刷版和电子版, 并提供目录检索和阅览服务,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位 论文。本人同意华中农业大学可以用:不同方式在彳:同媒体上发表、传播学位论文的全 部或部分内容,为存在馆际合作关系的兄弟高校用户提供文献传递和交换服务,同时 本人保留在其他媒体发表论文的权力。 注:保密学位论文即涉及技术秘密、商业秘密或申请专利等潜在 需要提交保密台论 文在解密后适用于本授权书。 、学位论文作者蛰占:班槲 锄戳:? 日 签名日期: 。年月/日. 签名日期:乙,年月植物源物质对暗黑鳃金龟引诱和杀虫活性的 研究 目录 摘要?.. 第一章前言 文献综述??.. .金龟甲.. .植物源杀虫物质研究进展? ..杀虫植物种类及成分研究..植物源杀虫物质作用方式..植物 源杀虫物质作用机理.金龟甲引诱物质研究进展? ..金龟甲性信息素引诱剂的研究概况? ..植物挥发性物质对金龟甲影响 研究的目的和意义?一 本研究技术路线??.. 第二章枣阳、宜城两地地下害虫种类调查?. .试验方法.调查时间?. .调查方法?. .数据?. 结果与分析? 小结与讨论? 第三章植物源引诱物质对暗黑鳃金龟的引诱活性研究??. 材料与方法? .材料?. ..供试昆虫??.. ..挥发物标样的来源?一 ..挥发物标样的制备方法??.. .嗅觉仪??. .室内生测过程??. .数据分析?. 结果与分析? .暗黑鳃金龟对不同化合物标样的行为反应?. .暗黑鳃金龟对不同化合物在不同浓度下的选择率?.华中农业大 学届硕士生学位毕业论文 小结与讨论? 第四章暗黑鳃金龟植物源引诱物质田间筛选及使用技术初步研 究. 材料与方法? .试剂与诱芯 .诱捕器??. .实验设计? .数据处理?. 结果与分析? .不同试剂对暗黑鳃金龟诱捕的影响?. .诱捕器设置不同高度对暗黑鳃金龟诱捕的影响??. .两种诱捕器对暗黑鳃金龟诱捕的影响. 小结与讨论? 第五章植物源提取物对暗黑鳃金龟幼虫的杀虫活性研究?. 材料与方法? .试验材料?. .供试虫源?. .室内毒力测定方法. .数据处理?. 结果与分析? 小结与讨论? 第六章烟碱粉剂研制?. 材料与方法? .供试药剂?. .供试载体?. .供试虫源?. .试验方法?. ..烟碱粉剂载体筛选?.. ..烟碱粉剂有效成分浓度的确定??一 .数据处理?. 结果与分析? .烟碱制剂载体筛选. .烟碱浓度确定??. ..烟碱浓度的初步确定.. ..烟碱浓度最终确定?一 小结与讨论?.植物源物质对暗黑鳃金龟引诱和杀虫活性的研究 第七章烟碱粉剂对暗黑鳃金龟幼虫体内主要酶的影响??. 材料与方法? .供试昆虫?. .供试药品?. .试虫处理?. .蛋白质含量测定?. .乙酰胆碱酯酶活力测定 ..酶液制备??.. ..乙酰胆碱酯酶活性测定方法一 .谷胱甘肽.转移酶活性测定? ..酶液制备??.. ..谷胱甘肽一转移酶活性测定.. .数据处理?. 结果与分析? .烟碱粉剂对蛴螬体内蛋白质含量影响的时间效应??. .烟碱粉剂对蛴螬体内乙酰胆碱酯酶活性影响的时间效应??. .烟碱粉剂对蛴螬体内谷胱甘肽一转移酶活性影响的时间效应. 小结与讨论? 第八章??. 参考文献? 致射?..植物源物质对暗黑鳃金龟引诱和杀虫活性的研究 植物源物质对暗黑鳃金龟引诱和杀虫活性的研究 摘要 金龟子属无脊椎动物,是鞘翅目金龟予科的一种杂食性害虫,分布于全世界, 幼虫乳白色,一般称为蛴螬,成虫、幼虫都可以对植物造成严重的危害。由于金龟 子幼虫生活在地下,防治困难,因此对金龟子成虫进行防治是控制蛴螬的一个重要 方面。为了顺应绿色、无公害生产的现代农业发展趋势,本文从植物源物质对金龟 子成虫的引诱和蛴螬的触杀两个方面进行了研究。在本文中,我们首先调查了枣阳、 宜城两地金龟甲发生情况,在室内利用型嗅觉仪比较了种植物源物质对暗黑 鳃金龟引诱活性的差异,同时进行了种植物源物质对暗黑鳃金龟引诱活性的田间 筛选,测定了种植物源提取物对暗黑鳃金龟幼虫的生物活性,并以此为基础研制 了烟碱粉剂和研究了粉剂对蛴螬体内主要酶的影响。本文主要研究结果如下: .在调查的地区当中,枣阳市鲍庄村、枣阳市张湾、宜城市李村花生田中以蛴 螬为主要的地下害虫,没有发现蝼蛄和金针虫,其中宜城市李村蛴螬发生量最高, 达到了.头/。经过分类鉴定明确暗黑鳃金龟为当地花生田蛴螬优势种。 .在室内用型嗅觉仪测定了种挥发物标样单体对暗黑鳃金龟的引诱活性。 结果表明,单体在~/、弓/、~/、。/浓度下均对暗黑鳃金龟 成虫有引诱作用.,在弓/浓度下有极显著的引诱作用.; 邻苯二甲酸二异丁脂在一/、弓/浓度下有引诱作用.;邻苯二甲 酸二正丁脂在巧/浓度下有引诱作用.;一脯氨酸甲酯在/浓度 下有引诱作用.;一石竹烯在一/、弓/、‘/浓度下有引诱 作用.;芳樟醇在一/、巧/浓度下有趋避作用.;.异 亮氨酸甲酯在‘/浓度下有引诱作用.。其中对暗黑鳃金龟引诱效果 最好的五种标样是单体、邻苯二甲酸二正丁脂、.脯氨酸甲酯、一石竹烯、.异 亮氨酸甲酯。引诱作用最强的是‘/浓度下的单体。单体、邻苯二甲酸二 正丁脂、.脯氨酸甲酯、.异亮氨酸甲酯的最适引诱浓度是~/。 .田间诱捕暗黑鳃金龟的效果表明,在被测种试剂中单体诱虫效果最好, 最高一天能诱捕头/罐,这与室内型嗅觉仪测定结果基本一致。通过使用技术华中农业大学届硕士生学位毕业论文 研究发现,诱捕器的最优设置高度为.,无盖诱捕器诱虫效果优于有盖诱捕器, 但无显著性差异。 .种植物提取物对暗黑鳃金龟幼虫的触杀作用中雷公藤提取物、烟碱的毒力 最高,分别是./、./,川乌、苍耳子、苦藤皮提取物触杀效果次 之,分别是./、./、./。相比较而言,其它种提取物 对暗黑鳃金龟幼虫触杀活性较弱,效果最差的是川楝子提取物,达到了 ./。 .通过对种保护剂载体的筛选发现以硅藻土、高岭土、膨润土、 滑石粉做填 料载体的烟碱粉剂均对蛴螬具有杀虫活性,其中以高岭土作为烟碱粉剂载体时杀虫 活性最强,是. , ,以滑石粉为载体时效果最差,是. 最终确定用高岭土作烟碱粉剂的载体。通过进一步分析研究确定以高岭土为载体的 烟碱粉剂农药的制剂浓度为.%。 .用./烟碱粉剂处理蛴螬后,试虫体内乙酰胆碱酯酶、谷胱甘肽一 转移酶酶的酶活性均随处理时间的变化而变化。其中谷胱甘肽.转移酶活性受到抑 制,而乙酰胆碱酯酶活性在整个处理阶段表现出被诱导,试虫在用烟碱粉剂处理后 ,体内乙酰胆碱酯酶、谷胱甘肽.转移酶的活性均升高,后乙酰胆碱酯酶、 谷胱甘肽一转移酶的活力都呈下降趋势。 关键词:暗黑鳃金龟,蛴螬,引诱活性,植物源农药,害虫防治’; , . ,. . .. , .... 、析 .砀 : . . . . , . . .‘‘’’ :一、 。、 ~、 ‘/., 。/. ;华中农业大学届硕士生学位毕业论文 ‘、‘/.; 、 。/. ; ~、 刁、 ~/.;~、‘、。/..? 、 、?/, .~/. . .. . .. ., ./ ./ . 、 , ./、./ ./ . , ,./. .、、 ., . , . /. .%. . 廿 ./ . , 、析. , 植物源物质对暗黑鳃金龟引诱和杀虫活性的研究. : ,, , 植物源物质对暗黑鳃金龟引诱和杀虫活性的研究 第一章前言 文献综述 .金龟甲 金龟子属鞘翅目金龟子科,类群庞大、分布广泛、危害严重。成虫俗称金龟子, 幼虫称为蛴螬。全世界共记录金龟子约种,中国已有记载约种刘光瑞 等,,我国金龟子具有种类多、分布广等特点,优势种主要是:铜绿金龟子, 暗黑鳃金龟,茶色金龟,以及华北大黑鳃金龟等。根据金龟子的 生活规律将其分为日出型、夜出型和昼夜型类。和发 现暗黑鳃金龟为夜出型昆虫,而且隔日出土活动,这与大多数金龟甲的活动规律都 不相同。 不同种类金龟子危害特点和危害方式不同,有的金龟子种类以幼虫为主,而有 的金龟子却以成虫为主,有的金龟子种类成虫、幼虫都会造成为害。幼虫生活在土 壤中主要为害花生、土豆的果实部分,如暗黑鳃金龟,大黑鳃金龟等。在中国大多 数金龟子的成虫和幼虫都对植物造成危害,如华北大黑鳃金龟,暗黑鳃金龟,铜绿 丽金龟等胡琼波,。蛴螬是一种杂食性害虫,以春秋两季为害最严重,啃食 作物根部和嫩茎,影响生长,使作物叶片枯死,蛴螬啃食作物根茎后,经常造成土 传病害或线虫病害等,最终导致作物减产。其中在中国为害农业、林业、畜牧业等 行业的蛴螬约有多种罗晨等,,主要为害玉米、土豆、大豆、甜菜、花 生等常见农作物和一些树木的幼苗和嫩叶。蛴螬是危害我国花生田的主要地下害虫, 近年蛴螬对我国花生生产造成严重危害,根据调查统计,在地下害虫危害严重区域, 由于蛴螬的危害使花生减产.%,严重时将造成花生颗粒无收。我国是花生种植 大国,花生作为中国重要的经济作物,种植面积约为万,是全球第二。 汤淮明发现暗黑鳃金龟是造成大豆田危害的主要地下害虫;刘旭等 对四川地区的蛴螬调查结果显示暗黑鳃金龟为该地区优势种。王秀幂 通过调查花生田金龟子危害发现:蛴螬占当地地下害虫总数的%以上,并通过分 类鉴定明确当地的优势种是华北大黑鳃金龟、暗黑鳃金龟和铜绿丽金龟;华中农业大学届硕士生学位毕业论文 .植物源杀虫物质研究进展 植物源杀虫物质来源于植物或植物的次生代谢产物,它们具有杀虫活性,因为 植物源杀虫物质具有很多化学农药不具有的优点,例如对环境友好,对农作物毒性 小,对人畜危害性低。所以,它将在绿色防控中占有重要的位置。 ..杀虫植物种类及成分研究 植物中存在含量巨大,种类多种多样的具有生物活性的化合物,全世界已知植 物万余种,已经发现的由植物产生的次生物质有多万种,,而 具有杀虫活性的物质恰恰是这些次生代谢物质。据调查研究,在我国作为植物源农 药的植物主要集中在楝科的川楝、印楝、香椿等,豆科的鱼藤、苦参等,卫茅科的 雷公藤、苦皮藤等,茄科的烟草等和百合科的藜芦等多科,其中最适合做植物源 农药的是楝科、豆科和卫茅科的植物杜小风等,。 目前国内生产的植物性农药主要品种有印楝素类化合物、鱼藤酮类化合物、除 虫菊素、苦参碱类、苦皮藤类等。植物性物质对蛴螬的毒杀作用,国内目前研究较 少。关于蓖麻对金龟子的作用,国内文章报道较多,蓖麻对大黑鳃金龟有引诱作用, 蓖麻提取物对蛴螬有触杀作用。申小卫等的研究表明,蓖麻籽的提取物对 蛴螬的触杀毒力高于其它部位的提取物,蓖麻植株其它部位对蛴螬也有触杀毒力, 所以蓖麻具有成为植物源杀虫剂的潜力。 ..植物源杀虫物质作用方式 .毒杀作用。毒杀包括胃毒毒杀、内吸毒杀、触杀和麻醉等,其中以胃毒的方 式作用于昆虫的杀虫活性物质比较常见。赵善欢等从苦楝、川楝中提取的 有很强的内吸拒食和毒杀活性;川楝素 川楝素对三化螟 对菜青虫等多种农业害虫具有胃毒作用杨光忠等,。从苦皮藤根中提取的杀 虫活性物质苦皮藤素分别对粘虫、棉大卷叶螟的幼虫具有一定的麻醉作用张兴 等,。泽漆植株的提取液对菜青虫的触杀作用和胃毒作用均很强,苦参碱也具 有较强的触杀活性高红明等,。从烟草中提取的杀虫活性物质烟碱,可以作 用于蚜虫的乙酰胆碱受体,触杀使其死亡孙小洁等,。从苦皮藤中提取的多 种活性成分主要作用方式为忌避、拒食和麻醉刘明霞等,。 ,植物源物质对暗黑鳃金龟引诱和杀虫活性的研究 .干扰昆虫正常的行为。化学物质可以影响昆虫的行为张兴等,。其 主要表现为忌避和拒食、干扰产卵或杀卵。从苦楝籽中提取的苦楝籽油因为对谷蠹 等有忌避效果所以可以用来防治储粮害虫姚康,。赵善欢发现川楝 提取物川楝素对米象、玉米象有拒食作用,而且还发现川楝素对其生长发育有不同 的抑制作用。 .抑制生长发育作用。有些植物源杀虫物质会对昆虫的生长造成一定影响,使 昆虫不能正常发育和产卵,从而降低害虫的虫口密度王燕等,。 发现.%印楝素对小菜蛾和菜粉蝶有较强的拒食作用,致使幼虫延缓蜕皮,蜕皮畸 形至死亡,还发现.%印楝素可以抑制其产卵。鱼藤酮可以干扰昆虫蜕皮行为,使 其形态产生缺陷从而导致昆虫死亡孔祥海,。雷公藤的总生物碱对棉铃虫的 生长发育有一定的抑制作用罗都强等,。雷公藤的总生物碱、印楝索、川楝 素对多种害虫的生长和发育都能起到一定的抑制作用,苦楝也可抑斑叶螨卵胚 胎的发育。 .植物光活化毒杀作用。植物光活化毒杀作用是一种很特别的作用方式,它的 作用原理是一些天然的植物源化合物,在可见光下对昆虫具有很高毒性,而在无光 时杀虫效果很差。研究发现在菊科和芳香科植物中的万寿菊的主要杀虫活性成分. 三连噻吩是当今光活化毒素中效果最佳的一种。万寿菊根的丙酮提取液对致倦库蚊 幼虫有很高的光活化杀虫活性王新国等,。 .其它作用。植物源物质作用于昆虫的方式还有很多种,比如很多植物源化合 物对昆虫都有引诱作用,除虫菊中除虫菊素对飞行的昆虫有较高的击倒活性等。 ..植物源杀虫物质作用机理 近年来有关植物杀虫物质作用机理的研究得到了深入的开展。 .影响昆虫的分泌系统。植物活性物质影响昆虫激素代谢,干扰正常的生长发 育。印楝素可以通过影响昆虫体内保幼激素的含量,干扰昆虫形态上的发育,最终 导致昆虫死亡张国洲,。 .影响昆虫的神经系统。神经系统遭改变或破坏将会影响昆虫的正常生长发 育,导致昆虫无法保持生物活性,从而死亡。张兴等指出川楝素可以影响 昆虫体内多个神经位点间的物质传递,最终影响昆虫乙酰胆碱酯的含量。闹羊角花华中农业大学届硕士生学位毕业论文 素也为神经毒剂,对莱青虫的乙酰胆碱酶有抑制作用,从烟草中提取的活性物质 烟碱也可以影响昆虫神经的传导。另外,海藻中分离的活性物质软骨藻酸、苦皮藤 根中分离的苦皮藤素都可以对昆虫的神经系统造成影响张国洲,。 .影响昆虫的消化系统。植物源活性物质可以影响昆虫的消化功能,使其功能 紊乱,从而影响其生理活性。张兴等研究表明川楝素对菜青虫幼虫的作用 机理是川楝素通过一定途径降低其幼虫中肠组织中酶的活性,进而影响其消化功能。 刘惠霞等通过研究发现苦皮藤素对昆虫的杀虫机理也是影响昆虫的消化功 能。雷公藤甲素、闹羊角花素一?通过抑制昆虫体内中肠酶活性,进一步影响中肠内 的细胞,使其正常状态紊乱,最终因为昆虫消化功能的缺陷导致昆虫死亡张兴等, ;钟国华等,。 .影响昆虫的呼吸系统。呼吸代谢是昆虫正常生长发育必不可少的生理行为, 植物源活性物质可以作用于昆虫的呼吸系统,使其功能产生紊乱,从而影响其生理 活性。鱼藤酮影响昆虫的呼吸系统,使昆虫呼吸作用不能正常进行,抑制昆虫呼吸 虫体死亡徐河山,,番荔枝中存在一些具有四氢呋喃脂肪酸内酯 结构的物质, ,。 它们通过抑制昆虫的呼吸作用而杀虫 ,; .金龟甲引诱物质研究进展 ..金龟甲性信息素引诱剂的研究概况 年代,世界上第一个金龟子性信息素苯酚被鉴定出:由雌性成虫体内分泌的 苯酚能引诱新西兰肋翅鳃金龟雄虫进行交配 .,。年代, 等研究发现红铜丽金龟 的性信息素为一. 十四碳烯酸甲酯。年代,等鉴定与报道了十余种金龟子性信息素。世纪后, 华北大黑鳃金龟、暗黑鳃金龟、毛黄鳃金龟等很多金龟的性信息素的研究得到快速 的发展,为以后的金龟甲性引诱剂的研究提供了可靠的依据。 等分析印度南部的重要农业害虫 的性信息素的主要成分,得到了含量较高的几种物质,通过进一步的田间试验证明 的性信息素是苯甲醚,还发现加入苯酚后可以对其引诱起到增 效作用,而苯甲醚同样是甘蔗大褐齿爪鳃金龟的性信息素的主要成分。 发现从雌性暗黑鳃金龟腹部末端腺体得到的粗提物,能引诱雄性 植物源物质对暗黑鳃金龟引诱和杀虫活性的研究 成虫。随后研究得出暗黑鳃金龟性信息素主要成分为.异亮氨酸甲酯、芳樟醇为 其微量成分,通过田间实验发现,芳樟醇对暗黑鳃金龟没有引诱活性,但当.异 亮氨酸甲酯与.芳樟醇的比例为:时却能大大提高一异亮氨酸甲酯的生物活性.,。 胡祖庆等通过对华北大黑鳃金龟引诱物质引诱活性的测定,表明甘氨 酸甲酯和脯氨酸甲酯是华北大黑鳃金龟性引诱剂的主要成份。 我国在鳞翅目昆虫的性信息素方面研究很多,对鞘翅目金龟科性引诱剂方面的 研究很少,对其性信息素的鉴定和应用有待广泛研究。 王宝升等通过田间试验对毛黄鳃金龟性腺粗提物进行了活性测定,发 现粗提物对雄虫具有很强的活性;同一年,王惠发现通过室内生物测定发 现华北大黑鳃金龟性信息素的主要组分是脯氨酸乙酯和甘氨酸乙酯,苯乙酮是性信 息素的微量组分。 周丽梅等通过触角电位检测法,发现当暗黑鳃金龟性信息素性信息素 含量达到?~,一异亮氨酸甲酯与芳樟醇的比例为:时检测效果最 佳,进行 “’’形管嗅觉仪室内测定,选择系数达.%,此研究结论对暗黑鳃金龟性信息素 田间推广应用具有重要意义。 罗宗秀等首次对暗黑鳃金龟性信息素进行了田间试验,结果表明,当 性信息素成分一异亮氨酸甲酯与芳樟醇的比例为:,二者总量为时具有 最佳诱捕效果,并且进一步研究了溶剂、诱芯载体、放置高度对诱捕效果的影响。 结果与周丽梅等报道的.异亮氨酸甲酯与芳樟醇的比例为:有所差异,分析其 原因可能是暗黑鳃金龟在不同地区的差异性所导致的张岩等,。至此填补了 国内暗黑鳃金龟性信息素田间应用的空白。 曲明静等通过田问试验进一步的优化,确定了暗黑鳃金龟性信息素最 佳田间用量:一异亮氨酸甲酯与芳樟醇的比例为:,总剂量为,防治效 果良好,幼虫减退率、保果率最高分别可达.%和.%,并以此申请了专利。 ..植物挥发性物质对金龟甲影响 很多研究证实植物的挥发性气味对植食性昆虫定位寄主有很重要的影响,有些植物挥发物对昆虫有引诱作用 .,; .,;华中农业大学届硕士生学位毕业论文 .,,也有些植物挥发物对昆虫有趋避作用,且有些已运用到生产实践中。植 物释放的挥发性化合物通常由叶、花或芽等散发的多种挥发性次生物质所组成,这 些次生物质一般是结构比较简单的天然化合物,主要分为萜类、芳香化合物、脂肪 酸衍生物,这些物质具有分子质量小、含量少、成分多样以及易变化等特点丁建 红等,。这些植物挥发物大部分对植物正常生长发育并不重要,但这些挥发物 对植食性昆虫定位寄主有很重要的影响樊慧等,。对植物挥发性化合物有效 组分及其比例和释放的研究有助于了解植食性昆虫定位寄主的原理,也可为天 然植物挥发性化合物在害虫无公害综合治理中发挥作用提供理论依据管致和, 。 植食性金龟子如丽金龟科和花金龟科的金龟子取食和求偶都在花上,由于对花 的挥发物敏感可以利用花的挥发物来诱集金龟子,作为一种防治金龟子的手段。李 仲秀等发现玫瑰花的提取物中含有的一些化合物可以大量诱集白星花潜金 龟和小青花金龟。 等通过研究发现从绿叶中提取的化合叶醇能够引 诱.的雄虫,而且其雌虫性信息素能够增强叶醇的引诱效果。花的挥 的雄虫的引诱效果尤为明显,而且黄色 发物..己烯醇一对 的诱捕器可以增强.一己烯醇.的引诱效果。等发现蒲公英中含有 的苯甲醛等化合物对扁绿丽金龟 有很强的引诱 作用。 有些金龟甲可利用脂类、醚类和醇类等作为其聚集信息素,如铜绿丽金龟利用 邻氨基苯甲酸甲酯作为聚集信息素。 引诱剂研究最全面的是日本丽金龟两性引诱剂。年,报 道了香叶醇和丁子香酚可以对日本丽金龟起到诱集作用,研究还发现丁子香酚可以 对香叶醇的引诱效果起到增效作用。.年间日本丽金龟的引诱剂是:的 香叶醇与丁子香酚的混合物。和研究发现一定比例的茴 香脑和丁香酚对日本丽金龟表现出很强的引诱活性。发现当丙酸苯乙 酯和丁子香酚比例为:时对日本丽金龟的诱集效果最理想,并且不仅可以 引诱其雄虫而且对雌虫也有引诱效果。最后提出一种引诱最为有效的 日本丽金龟引诱剂:由香叶醇、丁子香酚、丙酸苯乙酯按::比例配制的 混合物,目前己被广泛的应用于对该虫的诱杀与监测。 植物源物质对暗黑鳃金龟引诱和杀虫活性的研究 我国对植物源引诱剂方面的研究较少,王惠等发现苯乙酮是白星花潜 金龟的一种聚集信号物质。陈松笔通过对萍毛丽金龟 和小青花金龟诱捕试验,筛选出两种诱剂,食诱剂在室内诱 捕小青花金龟效果较好,性诱芯和食诱剂诱捕萍毛丽金龟效果最好。原国辉 等公开了一种金龟甲类广谱引诱剂,其主要成分是顺.一己烯醇和芳香族化 合物,既能引诱雄虫,又能引诱雌虫。另外有很多生产实践中利用金龟甲对某些植 物的趋向性来防治害虫的的实例,在苗圃周围种植蓖麻,能够引诱多种金龟,宋协 松证明在华北大黑鳃金龟 集中发生地区种植蓖麻,可以 很好诱集其成虫,在黑绒金龟子 集中发生地区种植白香草木樨等植 物,可以大量诱集其成虫。 研究的目的和意义 金龟子作为传统地下害虫,分布较为广泛,是一种杂食性害虫,危害十分严重, 以地下、地面作物组织为主,成虫期也造成为害。作为一种杂食性害虫,金龟子以 春秋两季危害最严重,啃食作物根部和嫩茎,影响生长,使作物叶片枯死,而且啃 食作物根茎后,经常造成土传病害或线虫病害等,最终导致作物减产。防治金龟子 的措施主要包括:化学、农业、物理和生物防治等几个方面,其中化学防治见效较 快,效果较好,是目前主要的防治手段。但化学药剂的使用容易造成药物残留,污 染环境,频繁使用还容易使害虫产生抗药性,同时会对天敌生物产生影响。物理性 的防治,需要与一些农业措施配合,劳动成本较高、效率低、不易彻底防治、流行 性较差。生物防治,可以很好地解决农药使用的弊端但是见效较慢,容易受气候环 境影响,一些生物制剂,由于含量低、性质不稳定,使其应用存在一定的局限性。 植物源杀虫剂来源于植物,容易降解、选择性高,积累毒性小,对人和牲畜相 对安全,对非靶标生物伤害小,且不使害虫产生抗药性,具有低毒或无毒的优点, 是一种绿色农药。绿色、无公害生产是现代农业的发展趋势,无公害防治技术最大 的优势在于绿色、环保,克服了化学药剂防治的种种弊端,可以和多种防治方法配 合使用,扩大了防治范围。 本研究针对上述问题,进行了相关问题的探索,其目的意义如下: .本文从植物源物质对金龟子成虫的引诱和蛴螬的触杀两个方面进行了研究, 华中农业大学届硕士生学位毕业论文 为进一步研究金龟子的新型、有效的绿色防控技术奠定理论基础。 .通过室内和田间试验筛选出对金龟子有引诱活性的植物源化合物,为植物源 引诱剂防治金龟子提供科学依据,进一步为开发高效的防治金龟 子的产品提供理论 基础。 .通过研究植物源提取物对金龟子的生物活性,为寻找开发防治 金龟子的无公 害植物源农药提供了方向。植物源物质对暗黑鳃金龟引诱和杀虫 活性的研究 本研究技术路线 巨堕 匿巫堕因 土 上 植物提取物对蛴螬的触杀毒力测定 习 优选植物提取物粉剂的研究 臣堕堕口 粉 粉 单体田间引诱活性测定 剂 剂 保 有 护 效 剂 成 载 分 单体田间引诱技术优化 体 最 筛 佳 选 浓 度 的 确 定 蓦謇别辩酬螬体内监聚酶的比活搠测定 华中农业大学届硕士生学位毕业论文 第二章枣阳、宜城两地地下害虫种类调查 随着气候、肥水条件、栽培水平、种植品种等因素的影响,地下 害虫的危害日 益加重。金龟甲在土壤中分布不均匀,隐蔽不易被发现,当作物表现出危害性状时, 作物的根部已经严重受害。因此,本章旨在揭示其发生规律,以便于及早发现、及 时治理,为合理有效防治蛴螬提供有效的防治依据。 .试验方法 .调查时间 于年月对枣阳和宜城部分地区的花生田地下害虫进行调查。 .调查方法 , ;挖土深度. 选择有代表性的田块,采用‘‘’’字形取样法,每点. 仔细检查样土中的害虫种类和数量,边挖边检查,回填样土时再检查遍杜玺, 。 .数据分析 使用 .统计软件分析数据,两组比较采用检验。 结果与分析 表.地下害虫虫口密度调查结果 植物源物质对暗黑鳃金龟引诱和杀虫活性的研究 本次调查结果表.发现,调查区域以蛴螬为当地主要的地下害虫,没有发 现蝼蛄和金针虫。枣阳市鲍庄、村枣阳市张湾、宜城市李村都不同程度的受到蛴螬 危害,其中宜城市李村蛴螬发生量最高,达到了.头/。 小结与讨论 通过本次调查,初步了解了当地花生地蛴螬的危害情况:危害当地花生田的主 要地下害虫以蛴螬为主,经过分类鉴定暗黑鳃金龟为当地花生田蛴螬优势种。 罗宗秀等通过调查发现不同土壤种类、当地的耕作方式、作物种类、 施肥方式和防治方法都对地下害虫数量变化有影响。经调查的花生地中,地下害虫 蛴螬数量都超过了~头/的防治指标,危害严重,但是由于地下害虫生活在土 壤中,防治困难,当地农民防治意识薄弱,任其自然生长危害,导致部分花生缺苗 断垅,甚至绝产绝收。因此,寻找高效环保的综合防治措施是防治地下害虫的热门 课题。华中农业大学届硕士生学位毕业论文 第三章植物源引诱物质对暗黑鳃金龟的引诱活性研究 目前测定昆虫室内活性的方法基本可以分为两种,第一种是直接测定昆虫对化 合物的引诱效果,第二种是测定昆虫的触角反应。直接测定昆虫对化合物的引诱效 果可以直观确定植物挥发物对昆虫的行为是否有影响以及是何种影响,这类测定方 法一般是利用嗅觉仪法和风洞实验,由于不同种类昆虫大小不同、趋光性等特性有 所区别,所以嗅觉仪也有很多种类,常见的如“”形嗅觉仪、单嗅觉仪和四臂嗅 觉仪等丁红建等,。国内外试验用风洞试验测定某些挥发物对华北大黑鳃 金龟的引诱效果胡祖庆等,、移动有空气流动的生物测定法和固定无空气 流动的小容器生物测定法测定华北大黑鳃金龟性信息素粗提物对其引诱效果孙凡 等,。本研究主要是利用型嗅觉仪从不同的植物挥发性气味单体和不同的 单体在不同浓度下对暗黑鳃金龟的引诱效果,筛选出对其引诱效果较好的引诱剂, 提高对暗黑鳃金龟的诱捕效果,从而为迸一步研究暗黑鳃金龟诱剂奠定基础。 材料与方法 .材料 ..供试昆虫 成虫采集于湖北省枣阳。采回后在.室温和自然光照条件下,用新 鲜柳条 饲养,饲养容器为××的养虫盒,底部装有厚,过目筛、 含水量在%~%的土壤,盆上方罩一尼龙网以保证空气流畅,并定期 换土。 ..挥发物标样的来源 被测挥发物标样单体有种,包括:单体纯度/%,、邻苯二 纯度/%,、邻苯二甲酸二正丁脂 甲酸二异丁脂 纯度/%,、对苯醌一纯度? 纯度?%, %,、脯氨酸甲酯 、香草醛纯度%,、乙酸叶醇酯一一 纯度?%,、香叶醇纯度/%,、.植物源物质对暗黑鳃金龟引诱和杀 虫活性的研究 石竹烯纯度%,、丁香酚纯度%, 、芳樟醇纯度?%,、.异亮氨酸甲酯. 纯度?%,、苯乙酮纯度?%, 。 ..挥发物标样的制备方法 取每种样品溶于的二氯甲烷中,在漩涡混合器上充分混匀后, 用 二氯甲烷分别按体积比配成~、一、巧、。/三种浓度浓度以倍递 减,并以二氯甲烷作为对照。 .‘嗅觉仪 参照等的设计制作型嗅觉仪装置。型嗅觉仪由无色玻璃制成, 主臂长,侧臂长,两测试臂夹角为。,内径.。装置组成依次为: 大气采样仪一型,北京市劳动保护科学研究所、活性炭过滤装置、加湿瓶、 流量计、味源瓶或对照瓶、型嗅觉仪。 图. 型嗅觉仪装置.室内生测过程 试验期间温度控制在士,湿度?%,型嗅觉仪两臂流量控制在华中农业大学届硕士生学位毕业论文 /。将不同浓度的各挥发性物质的标样分别与对照二氯甲烷组合来进行暗 黑鳃金龟子成虫对挥发物趋性的行为测定。每次取此样品滴在型嗅觉仪进气 管两端的滤纸上,一组测试完毕后换另一张滤纸继续测试。从型嗅觉仪主臂端口 逐头释放暗黑鳃金龟子成虫,每次观察,当其爬行距离超过某臂就记为选 择了该臂,内无选择的,记为无行为反应。每个处理记录有行为反应的次。 每测头后调换型管方向一次,每测完头就用%醇擦洗管的内、外壁, 烘干后使用,以消除误差。为进一步防止试验误差产生,采取间隔试验方式进行测 试,保证试虫身上残留的单体样品充分挥发,试验前对金龟子进行饥饿处理小时, 并且不在试验中重复使用试虫。 .数据分析 行为反应按照下列公式计算选择率。并假设味源对暗黑鳃金龟的选择不造成影 响,则对型嗅觉仪两边的选择率都是%,再进行卡方 分析。 选择率味源管中虫体数或对照管中虫体数头/测试总虫数头×% 程立超等,。 结果与分析 .暗黑鳃金龟对不同化合物标样的行为反应 植物源物质对暗黑鳃金龟引诱和杀虫活性的研究 氯甲烧?试村 卡材 . ???????? 苯乙酮 ?????????笛 . ???? 芳棚 .陟石竹烯?????????? . 。??????? .鲈曝 ?? 乙酸,尊醢 .圆 ?????????‘ ? .脯氨酸甲醋 . ????????? ?? 邻苯二甲酸二丑玎臆 。 单体。 三王曼曼曼曼蔓星量邑兰;曼璺三 。 .加 柏 印 ? .葵 。 反应虫头 图.暗黑鳃金龟对不同化合物标样在/下的行为反应 . /注:“?”表示差异极显著,“表示差异显著。., .。 “”“” . . . 卡赢;; 口二氯甲娩?嗣喇 。 ??????了 苯乙酮 . 异亮氨酸甲鹭 ???????? .豹 芳樟醇?????? 。 ?????????亡了 香置. 。 ?????????? 争石竹烯 . ??????了 香时群 一’气 乙酸叶醇癌??????匕 ??????【 香草醛 . ????????? 猫氨酸甲醺 对苯醺???????匕】 邻苯二甲酸二正丁厝 邻苯二甲酸二异丁腊 ?????亡】 单棒 。?????????亡. . 。 。鲈 ? ? 卯 ? 反应虫头 图.暗黑鳃金龟对不同化合物标样在/下的行为反应 ./ 注:“?”表示差异极显著,“表示差异显著。.,.。 “?”“” . . . 华中农业大学届硕士生学位毕业论文 卞乃解 甲烧?试嗣 ?? 苯乙酮 。? 异亮氯酸甲鸶鼹????????? 芳糖 ?贷 丁香酚 ::洲岛?? .? ’香叶簿 ???娶 乙酸叶醇醢 香草臣 二’二: 讥 绒酸甲醴匕 ?? . 对苯蠢 邻苯二甲酸二正丁膳鼹【 .?? 邻苯二甲酸二异丁朦 ? , 。叼 单体茁。蔓曼蔓邑蔓宝翌。 ? ..? ‘,? “~ 反应虫头 图.暗黑鳃金龟对不同化合物标样在/下的行为反应 / . ..。 注:..表示差异极显著,.’’表示差异显著。.尸., . . “??’’“?’’ 二氯甲烷?试羽 卡方拉 . ???????匕 苯乙酮 . ??????【 .异亮氨酸甲簟 芳樟群?????? . ???????亡 香酚 】 ?????亡了 恻擗 ‘ ???????【 香时醇???????匕】 乙酸时醇嚣 二‘~. “~ ?????? 香草臣 , 匕:::】 肯壹酸甲翻 对苯彦 ??????? ?????丁 邻苯二甲酸二正丁膀 . ????????? 邻苯二甲酸二异丁脂 单体。????????;习。 。.? 印 如 反应虫量头 图.暗黑鳃金龟对不同化合物标样在/下的行为反应 / ...。 注:“?.’表示差异极显著,“.,,表示差异显著。 ., “??’’“?”睫 . .. 结果如图.、.、.、.,通过室内测定暗黑鳃金龟对种不同化合物 标 样在不同浓度下的行为反应中发现:单体在~/、/、/、/ 】植物源物质对暗黑鳃金龟引诱和杀虫活性的研究 浓度下均对暗黑鳃金龟成虫有引诱作用.;邻苯二甲酸二异丁脂 在一/、 。/浓度下有引诱作用.;邻苯二甲酸二正丁脂在。/浓度下有引 诱作用.:一脯氨酸甲酯在巧浓度下有引诱作用.;.石 竹烯在~/、。/、。/浓度下有引诱作用.;芳樟醇在~/、 ‘/浓度下有趋避作用.;.异亮氨酸甲酯在巧/浓度下有引诱作 用.。其中引诱作用最强的是巧/浓度下的单体,趋避作用最强的 是’/浓度下的芳樟醇。 .暗黑鳃金龟对不同化合物在不同浓度下的选择率 踮 阳 ? 如 .异亮氨酸甲醑 柏 埽.竹烯 选择率? 叫扣旅酸甲醴 如 ?卜邻苯二甲酸二正丁腊 加 叫卜单体 .. 浓度 图.暗黑鳃金龟对不同化合物标样在不同浓度下的选择率.由图.可清楚的观察到引诱效果较好的五种挥发物标样单体、邻苯二甲酸 二正丁脂、.脯氨酸甲酯、一石竹烯、一异亮氨酸甲酯,引诱的最适浓度及阈值。 单体在~/、。/、~/、。/浓度下均对暗黑鳃金龟成虫有 引诱作用.,在巧/浓度下有极显著的引诱作用.。 单体、邻苯二甲酸二正丁脂、.脯氨酸甲酯、.异亮氨酸甲酯在在~/、 。/、一/、一/四个浓度中均在。/浓度下表现出最好的引诱作用 .。华中农业大学届硕士生学位毕业论文 单体、邻苯二甲酸二正丁脂、.脯氨酸甲酯、.石竹烯、一异亮氨酸甲酯等 五个化合物中,暗黑鳃金龟对其选择率受浓度变化影响最大的是 石竹烯。 小结与讨论 在室内测定的种植物源化合物单体中,对暗黑鳃金龟有较好引诱活性的是以 下五种化合物:单体、邻苯二甲酸二正丁脂、.脯氨酸甲酯、一石竹烯、一异亮 氨酸甲酯。其中引诱作用最强的是‘/浓度下的单体,趋避作用最强的是 。/浓度下的芳樟醇。单体、邻苯二甲酸二正丁脂、一脯氨酸甲酯、.异亮氨 酸甲酯的引诱的最适浓度是~/。 昆虫通过触角对周围植物挥发物产生反应,寄主植物的挥发物可以使昆虫对其 产生趋向行为,植物在自然生长过程中,由于植物、植食性昆虫及其天敌之间关系 的变化,植物自身会有不同的次生代谢产物,这就导致了植物在不同环境,不同生 长状态所产生的能引起昆虫行为反应的挥发化合物的不同。在暗黑鳃金龟对挥发物 单体标样的行为学反应中,可以发现挥发物浓度并不和引诱效果成正比,有些挥发 物在低浓度下才有较高的引诱活性。因此,这也说明了植物挥发 性气味中无论是挥 发物的组分还是含量都很重要,昆虫对寄主植物的定向行为就是由于识别了植物的 挥发性气味,而这些挥发性气味是由不同组分不同浓度的植物化合物组成的杜永 均等,。 供试的化合物都是参照不同植物挥发物成分鉴定结果中选择的,通过试验测定 筛选出的有引诱活性的植物单体,为研制诱杀药剂奠定一定基础。但是关于植物单 体对暗黑鳃金龟成虫的引诱机理和大田试验还有待进一步的研究。植物源物质对暗黑鳃金龟引诱和杀虫活性的研究 第四章暗黑鳃金龟植物源引诱物质田间筛选及使用技术初步 研究 由于蛴螬幼虫生活在地下,防治困难,因此对蛴螬成虫一金龟子进行防治是控 制蛴螬的一个重要方面。目前,金龟子引诱剂是一个研究热点,利用从昆虫诱集植 物中提取的物质作为无公害害虫防治的方法已经越来越受到关注,研究发现植物源 挥发物质可对金龟子趋性行为产生影响,表现为引诱、趋避、拒食、触杀等作用。 许多植食性金龟子都能被寄主植物的挥发物所引诱,例如华北大 黑鳃金龟对蓖麻有 很强的趋性但不是为了取食,通过研究蓖麻挥发物可以用来诱集 华北大黑鳃金龟, 从而进行害虫的预测预报和防治。 本文主要是从种植物源化合物中筛选择出暗黑鳃金龟有引诱活 性的物质,从 而为进一步研究暗黑鳃金龟诱剂奠定基础。 材料与方法 .试剂与诱芯 被试剂有种,包括:单体纯度/%,、邻苯二甲酸二异丁脂 纯度%,、邻苯二甲酸丁脂 纯度?%,、对苯醌一纯度?%,、 纯度?%,、香草 .脯氨酸甲酯. 纯度 醛纯度/%,、乙酸叶醇酯.一 ?%,、香叶醇纯度?%,、.石竹烯 纯度?%,、丁香酚纯度?%,、 芳樟醇纯度/%,、甘氨酸甲酯 纯度/%,、.异亮氨酸甲酯? 纯度/%,、苯乙酮纯度/%,、 橙花叔醇纯度/%,、反式..己烯一一醇一一一纯 度%,、一丙酸苯乙酯一 纯度/%,、 罗勒烯纯度?%,、反式茴香脑纯度?%, 。 华中农业大学届硕士生学位毕业论文 诱芯载体为聚乙烯塑料管,内含脱脂棉,分别取试剂滴加到脱脂棉中 制成诱芯。 .诱捕器 参考罗宗秀等的设计制作诱捕器。诱捕器由顶盖、漏斗型装置、交叉 挡板和收集装置组成,其中交叉挡板设于顶盖下方,漏斗装置设于交叉挡板之间, 收集装置设于漏斗装置下方图.。 诱芯 漏斗 接收器 图.暗黑鳃金龟诱捕器 . .实验设计 试验于:年月日至月在湖北枣阳进行。不同处理诱捕器随机分布于 田间,每个处理次重复并设置对照,诱捕器悬挂高度为.米,利用诱捕器漏斗 型装置和十字交叉板使金龟子在飞行中触碰漏斗装置和十字交叉板出现假死现象, 。 随漏斗落入接收器中。:.:安放诱捕器,诱捕器距田埂及诱捕器之间均 第日清晨检查其中诱虫数量后清除所诱虫,更换诱芯并随机调换诱捕器的位置。 实验的各因素处理如下:植物源物质对暗黑鳃金龟引诱和杀虫活性的研究 试剂种类:种试剂 诱捕器设置高度:.、.、.、. 诱捕器类型:有盖诱捕器、无盖诱捕器 .数据处理 所有的数据均使用.软件进行计算分析,多重比较采用’新复 极差法,两组比较采用检验进行差异显著性分析。进行方差分析前,数据进行正 态性分布和方差同质性检测,不符合的数据进行对数转换后进行分析。 结果与分析 .不同试剂对暗黑鳃金龟诱捕的影响 表 种试剂对暗黑鳃金龟成虫诱集效果注:数据为个重复的平均值 不同字母表示不同试剂诱捕量的差异显著性. : 华中农业大学届硕士生学位毕业论文 结果表明表,诱捕暗黑鳃金龟单体试剂效果最好,最高一天能诱捕 头/罐,其余试剂对暗黑鳃金龟诱捕效果较差,不超过头/天。 .诱捕器设置不同高度对暗黑鳃金龟诱捕的影响 平 蓑 虫 数 头‘ 米 .米 米 。米 诱?嚣毫鹿眯 图.诱捕器设置不同高度的诱捕量.. 暗黑鳃金龟属于飞行能力较强的金龟甲,有特定的飞行活动区域,所以诱捕器 高度是田间诱捕中很重要的一个因素。为了探究暗黑鳃金龟的特定飞行活动区域, 分别进行了.、.、.和.的个不同高度的田间试验,结果如图. 所示:诱捕器的不同放置高度对诱捕效果有很大的影响,当诱捕器高度为.时诱 捕效果最好,诱捕器高度为.时诱捕效果最差,平均不到头/罐。 .两种诱捕器对暗黑鳃金龟诱捕的影晌植物源物质对暗黑鳃金龟引诱和杀虫活性的研究 平 均 诱 虫 数 头盂 有盖 无盖 诱蕾嚣类基 图.两种诱捕器的诱捕量 喀. 诱捕器类型也是田间诱捕中很重要的一个因素,为检验不同诱捕器的诱捕效果, 进行了有盖诱捕器和无盖诱捕器两个试验,结果如图.所示:无盖诱捕器诱虫效 果和有盖诱捕器相比没有显著性差异。 小结与讨论 从本实验在湖北枣阳地区诱捕暗黑鳃金龟的效果来看,在被测种试剂中诱捕 暗黑鳃金龟单体效果最好,最高一天能诱捕头/罐,其余试剂对暗黑鳃金龟诱 捕效果较差,不超过头/罐。从使用技术研究,发现诱捕设置高度以及诱捕器种类 都可以对诱捕效果产生影响,结果表明,诱捕器的最优设置高度为.,无盖诱捕 器诱虫效果好于有盖诱捕器。 在田间观察引诱效果,单体引诱效果比较好,这与室内型嗅觉仪测定结果 基本一致。但邻苯二甲酸二正丁脂、.脯氨酸甲酯、.石竹烯、.异亮氨酸甲酯的 田间诱虫效果不好,这可能由于田间环境与室内环境的差别导致,也可能由于金龟 子对一些诱剂的气味敏感性差,加之其它气味的遮盖,从而影响诱捕效果。 在室内环境测定诱剂有效并不能说明在田间环境中诱剂同样有效,为了验证诱 剂的有效性及实用性,进行田间试验是必不可少的。田间引诱效果与天气因素很有 关系,也与当地虫口密度有关,在虫情严重发生的地区,诱捕效果 更好曲明静等, ,另外诱芯组分,多种成分之间比例、释放量、诱芯种类、诱捕器形状、诱捕华中农业大学届硕士生学位毕业论文 器高度等都会影响诱虫量罗宗秀等,。根据载体起到的目的可以把载体分为 吸附性载体、缓释性载体和保护性载体等,不同的诱剂成分,不同的靶标昆虫所需 的载体都有所区别。值得注意的是诱剂的诱捕范围对引诱效果影响十分严重,陈松 笔等在诱捕小青花金龟的田间试验中发现,诱剂的有效范围是直径内, 一旦超过这个距离,诱剂就会失去诱捕能力。为了提高诱剂的诱捕效果,这些因素 都有待于进一步的研究。 本实验通过对种试剂的田间筛选得到一种有引诱作用的植物源化学活性物 质,虽然单一的诱捕目前难以达到有效控制成虫的要求,但为诱剂诱集暗黑鳃金龟 提供一些基础,有助于筛选到较好的诱剂,用其控制暗黑鳃金龟。 植物源物质对暗黑鳃金龟引诱和杀虫活性的研究 第五章植物源提取物对暗黑鳃金龟幼虫的杀虫活性研究 暗黑鳃金龟 属鞘翅目金龟总科,分布在我国余个省 区市,是花生、豆类等作物的重要害虫,最近几年逐渐成为国内危害最严重的 金龟子类害虫,因其生活在土壤中,给其防治带来很大困难,防治蛴螬目前最常用 的是化学农药,但化学农药毒性高危害大,对食品安全和环境卫生造成严重威胁。 随着人们认识的提高对环境危害较少的植物源农药成为目前研究的热门课题。植物 源农药,又称植物性农药,是生物农药的一个重要组成部分,它是指利用从植物中 提取的有杀虫或抗菌作用的活性成分加工而成的植物源制剂,植物源农药有效成分 通常是种类复杂的混合物李永夫等,。 本研究选用种植物源提取物对暗黑鳃金龟幼虫进行室内毒力测定,以期筛选 出对暗黑鳃金龟幼虫较理想的植物源杀虫剂。 材料与方法 .试验材料 川乌提取物:、苍耳子提取物:、川楝子提取物.%、苦楝皮提 取物:、泽漆提取物:、苦参提取物%、雷公藤提取物:、烟 碱提取物%、藜芦提取物%共种。均订购于武汉大华伟业医药化工 有 限公司。 .供试虫源 供试蛴螬为暗黑鳃金龟幼虫采自湖北枣阳的重茬花生 田里,该地区多年来蛴螬发生严重。将采回的试虫经次精选,以大小一致的健壮 幼虫作为供测试虫。幼虫喂以新鲜甘薯块,尽量少翻动土壤,保证适宜的土壤湿度。 .室内毒力测定方法 采用浸虫法进行。将植物源杀虫剂用水稀释成个浓度,设清水为对照。挑取 龄. 的暗黑鳃金龟幼虫,将放置有头蛴螬的不锈钢纱网浸入粗提液中后 取出,沥干虫体上的水分后放入装有土壤含水量%.%的养虫盒内,土层厚 ,与华中农业大学届硕士生学位毕业论文 度。在自然变温条件下饲养,供以足量土豆块作为饲料。每浓度头,重复 次。后检查结果,统计其死亡虫数,并计算其校正死亡率。以用镊子轻触幼虫 体背,虫体明显不能卷爬行或虫体已明显收缩变色为死亡标准。 .数据处理 死亡率%死亡虫数/供试虫数×% 处理组死亡率%一对照组死亡率% 校正死亡率% 卜对照组死亡率% 计算死亡率和校正死亡率,求出毒力回归方程式、致死中浓度及其% 置信区间,数据用.统计软件分析。 结果与分析 表 种植物提取物对暗黑鳃金龟幼虫的触杀毒力分析 植物源物质对暗黑鳃金龟引诱和杀虫活性的研究 结果显示表.种提取物处理暗黑鳃金龟幼虫致死中浓度从大依次为 川楝子./苦参./泽漆./藜芦./ ./苍耳子./苦藤皮./烟碱./ 雷公藤./。其中雷公藤、烟碱对暗黑鳃金龟幼虫的毒力最高,分别 是./、./。 小结与讨论 在选取的种植物提取物中,雷公藤、烟碱对暗黑鳃金龟幼虫的毒力最高, 分别是./、./。其余几种植物提取物如苦藤皮、苍耳子等提取物也有 一定的触杀活性,上述结果说明对环境危害较少的这几种植物提取物有迸一步研究、 开发和利用的价值。 目前国内很少见植物源杀虫剂防暗黑鳃金龟幼虫的报道,在这里,我们首次报 道了烟碱、雷公藤等植物提取物对暗黑鳃金龟幼虫的触杀作用。 本试验只测定了种植物