匹维溴胺对兔离体Oddi括约肌的作用

匹维溴胺对兔离体Oddi括约肌的作用 482中华消化杂志2007年7月第27卷第!塑g!!!!!:!::! 匹维溴胺对兔离体Oddi括约肌的作用 李翠萍钱伟侯晓华 Oddi括约肌功能障碍(S()D)是指Oddi括约肌的动力异 常,因胆管和胰管共同通过Oddi括约肌开口于十二指肠,其 功能障碍可引起胆汁或胰液引流不畅,导致胆汁淤积和(或) 胰腺炎.临床上治疗SOD的主要方法是手术治疗,内镜下 介入治疗和药物治疗,但前二者医源性风险较大,而目前治 疗SOD的口服药物又较少且无特异性l1].本实验使用离体 组织器官浴槽法.观察不同浓度匹维溴胺对兔离体Oddi括 约肌收缩活动的影响,为其临床治疗SOD提供实验依据. 一 ,材料和方法 1.材料:日本大耳白兔12只(华中科技大学同济医学院 实验动物中心提供),雌雄不限,体质量2.0,3.0kg. 2.Oddi括约肌肌环制作:兔实验前24h禁食(可自由饮 水),空气栓塞法处死,将其固定于手术台上,取上腹正中切 口进腹,沿胆囊向下找到胆总管及胆总管十二指肠接合部, 将其迅速分离,取出.剖开十二指肠,可看到其内壁有一圆 形隆起,此为十二指肠乳头.沿十二指肠乳头向总胆管方向 分离,常规固定,处理,包埋,行逐段切片,H—E染色,光镜下 观察其形态.如上法将取出的组织置于持续通混合气(95 oz+5COz)的4?Krebs液中,沿十二指肠乳头向总胆管 方向分离,剪除其周围组织,将其剪成数个宽3,5mm的肌 环.用1对小钩反向平行穿过肌环环腔,1个小钩固定在支 架上,另1个小钩与张力传感器(Fort一10,美国WPI公司) 相连,肌环完全悬浸于25mlKrebs液的浴槽中(MYO— BATH,25ml,美国WPI公司),通过恒温循环仪(Haake DCIO,美国WPI公司)保持浴槽内温度在37?,浴槽内持 续通混合气体. 3.匹维溴胺(原药,苏威制药公司)对兔Oddi括约肌的 作用:悬挂肌环后,给肌环初负荷2.0g,每20min换新鲜 Krebs液1次,待肌条在浴槽中平衡6O,90min,加入 0.1mmol/L氨甲酰胆碱(Sigma公司,浴槽内终浓度为 0.1~mol/L)诱发兔离体Oddi括约肌收缩,选取收缩活动规 则,稳定的肌环进行实验.采用累积法向浴槽内加入1× 1O.,1mol/L浓度梯度的匹维溴胺,从最低浓度开始,每 次加入药物容量25l,加入后观察5min,再加入下一浓度 药物,使浴槽内匹维溴胺终浓度为1×1O.,1×10tool/ L,观察各浓度匹维溴胺对Oddi括约肌肌环收缩活动的影 响.传感器信号输出至生物放大器(MP-IO0,美国BIOPAC system公司),放大的信号经数模转换成数字信号后输入PC 机,Acqknowledge软件(version3.7.1,美国BIOPACsystem 作者单位:430022武汉,华中科技大学同济医学院协和医院 消化科 通信作者:侯晓华,Email:houxh@public.wh.hb.cn ? 短篇论着? 公司)实时记录并保存. 4.数据分析:采用Aeqkonwledge软件自动计算平滑肌 条收缩曲线的曲线下面积积分.以单位时间(/min)内Oddi 括约肌肌环自发性收缩活动的曲线下面积积分代表收缩活 动的变化.单位时间曲线下面积积分(/min)一(选择区曲 线下面积积分/选择区时问)×60 5.统计学分析:采用SPSSl1.0处理数据,组问比较使 用ANOVA分析.组内比较使用StudentSt检验.数据以 ?S表示,P<0.05为差异有统计学意义. 二,结果 1.兔十二指肠乳头,Oddi括约肌段及总胆管的光镜下 形态:胆管壁周无明显肌纤维,Oddi括约肌上段开始出现大 量肌纤维,延续整个膨大部,近十二指肠乳头部时明显减少; 十二指肠乳头以黏膜上皮组织为主,乳头壁周可有少量肌 纤维. 2.氨甲酰胆碱对兔离体十二指肠乳头,Oddi括约肌段 及总胆管的作用:终浓度为0.1/~mol/L的氨甲酰胆碱能显 着增加Oddi括约肌段的收缩张力(1.14?0.24比3.46? 1.21,P<0.05)而诱发其收缩,但对十二指肠乳头和总胆 管的收缩张力(1.19?0.23比1.97土0.63;1.28?0.38比 1.6O?0.43)无显着影响(P>0.05) 3.匹维溴胺对兔离体Oddi括约肌肌环收缩的影响:如 图1所示,匹维溴胺对兔离体Oddi括约肌胆碱能收缩的抑 制效应呈浓度依赖性.当浴槽内匹维溴胺累计浓度达到1× 10mol/L时,即能显着抑制氨甲酰胆碱刺激诱发的兔离体 Oddi括约肌肌环胆碱能收缩效应(82.71?3.71比71.51? 4.12,P<0.05);累计浓度增至1×10一mol/I时,抑制维 持最大效应(82.71?3.71比65.41土4.O4,P<0.05),且 不随时问增加而增强. 随 k 鲁 85 基线一13—12—11—10-9—8—7—6—5—4—3 浴槽内匹维溴胺终浓度(1gmol/L) 图1匹维溴胺对兔离体oddi括约肌收缩曲线下面积积分的影响 讨论胆胰动力学研究的焦点是Oddi括约肌,目前还 少有特异针对Oddi括约肌作用的药物,但用钙离子拮抗剂 对SOD治疗效果已得到临床验证[. 匹维溴胺是一种具有强肌亲和性和弱神经亲和性的四 中华消化杂志2007年7月箍!鲞箜!塑!!!!!:!!:! 价氨大分子化合物,可与胃肠平滑肌细胞表面I通道的双氢 吡啶位点结合,阻断Ca内流,发挥对肠平滑肌的直接松弛 作用Is],对胃肠道具有高度选择性解痉作用,但对心血管平 滑肌细胞亲和力极低,临床上已广泛应用于治疗肠易激综合 征,可能也能像其他钙拮抗剂一样用于治疗Oddi括约肌功 能紊乱. 但目前少见匹维溴胺对Oddi括约肌活动影响的直接证 据.本研究显示,当浴槽内匹维溴胺累计浓度达到1× 10tool/L及以上时,能显着抑制氨甲酰胆碱刺激诱发的兔 离体Oddi括约肌肌环胆碱能收缩效应,且此抑制效应呈浓 度依赖性.lI缶床试验也显示,胆囊切除术后12,15d,与安慰 剂组相比,口服匹维溴胺15mg患者的胆总管内压力较服药 前显着降低,提示匹维溴胺对Oddi括约肌和胆管可能有特殊 作用n].在内镜下胰胆管造影术前使用匹维溴胺的临床试验 也显示,匹维溴胺能减少内镜检查过程中所需时间,提高患者 耐受性,Oddi括约肌活动的幅度和持续时间也显着减少[5]. 综上所述,匹维溴胺能抑制兔离体Oddi括约肌的胆碱 能收缩效应并呈剂量性,可能成为治疗Oddi括约肌功能紊 乱的新选择. 参考文献 483 1BeharJ,CorazziariE,GuelrudM,eta1.Functionalgallbladder andsphincterofoddidisorders.Gastroenterology,2006,13O: 149815O9. 2SandJ.ArvolaP,NordbackI.Calciumchannelantagonistsand inhibitionofhumansphincterofOddicontractions.ScandJGas— troenterol,2005,40:1394—1397. 3BoyerJC,MagousR,ChristenMO,eta1.Contractionofhuman coloniccircularsmoothmusclecellsiSinhibitedbythecalcium channelblockerpinaveriumbromide.CellCalcium,2001,29: 429—438. 4DiSommaC,ReboaG,PatroneMG,eta1.Effectsofpinaverium bromideonOddiSsphincter.ClinTher,1986,9:l19—122. 5LamazzaA,ToilA,BologneseA,eta1.Effectsofpinaverium bromideinthepremedicationofendoscopicretrogradecholangio— pancreatographyandonmotoractivityofthesphincterofOddi. CurrMedRes()pin,1986,10:280—284. (收稿日期:200610—19) (本文编辑:陆讳) 早期高容量短时血液滤过对重症急性胰腺炎犬 并发心肌损伤的治疗研究 夏亮曾皓吕农华刘丕钱克俭曾振国刘芬姜榕 重症急性胰腺炎(severeacutepancreatitis,SAP)常并 发多脏器功能障碍综合征(multipleorgandysfunctionsyn— drome,MODS).血液滤过(hemofiltration,HF)是血液净 化的方法之一,近年来有学者使用HF清除炎症因子,防治 重症疾病并发的MODS,取得了满意疗效'.我们通过早 期高容量短时血液滤过(earlyshort—termhigh—volumehemo— filtration,EHSVVH),观察其对SAP犬血浆中肿瘤坏死因子 (TNF)一a和白细胞介素(IL)一6的影响,以及对SAP犬并发心 肌损害的治疗作用,探讨SAP并发心肌损伤的机制,为SAP 并发症的预防探索一条新途径. 一 , 材料与方法 l_材料:健康杂种犬16条,体质量15kg,雄性,造模前 12h禁食.将实验犬随机(拆信封法)均分为治疗组和对 照组. 2.方法:实验犬氯胺酮麻醉后固定,连接呼吸机,经左 侧股动脉插入动脉留置导管,用以监测血压,心率.经右侧 股静脉插入双腔血透管.无菌条件下正中切VI进腹,暴露胰 管开VI,置入直径1mrfl的聚乙烯导管,用微量输液泵以 1ml/min速度逆行匀速注入5牛磺胆酸钠溶液(1ml/kg). 作者单位:330006南昌大学第一附属医院消化科[夏亮(第一 作者现在1CU科),曾皓,吕农华,刘丕],ICU科(钱克俭,曾振国, 刘芬,姜榕) 通信作者:吕农华,Email:lunonghua@163.corn 对照组造模后常规补液1000ml,呼吸机治疗+假治疗(血液 在滤器内循环,不接置换液,不超滤),治疗组造模后立即用 DiapactCRRT机进行HF,血流量80ml/mln,温度37?,碳 酸氢盐置换液以15oml?kg?h前稀释输入.两组犬均 于干预6h后处死. 3.观察及监测指标:?生命体征:监测两组基础状态时 及EHSVVH治疗0h(即SAP成模时),2,4,6h时的心 率,血压.?血清心肌酶谱:两组在上述5个时间点留取静 脉血,采用全自动生化分析仪.?心肌组织含水量:按 Ellis公式计算心肌含水量,心肌含水量()一(湿重量一干 重量)/湿重量×100.?心肌组织学观察:常规制作石蜡 切片,光镜下观察心肌形态学改变,对心肌病理损伤程度进 行评分.?血浆TNF-a,IL一6水平:两组在上述5个时间 点留取静脉血,采用酶联免疫法测定TNF-a和II,6水平. 4.统计学处理:应用SPSSl1.5软件包对实验数据进行 分析.数据均以均数?差表示,行单因素方差分析. TNF-a,IL一6与肌酸激酶同工酶(CK—MB)间的相关性采用 线性相关分析.P<0.05为差异有统计学意义. 二,结果 1.EHSVVH对SAP犬血流动力学的影响:两组12,率 和平均动脉压成模前和0h时比较差异无统计学意义(P> 0.05),治疗组2,4,6h时心率低于同时间点对照组,平均 动脉压高于同时间点对照组,差异有统计学意义(P< 0.01),见表1.