有机磷

食品中有机磷农药残留量的测定 第一法水果、蔬菜、谷类中有机磷农药的多残留的测定 1范围 本标准规定了水果、蔬菜、谷类中敌敌畏、速灭磷、久效磷、甲拌磷、巴胺磷、二嗪磷、乙嘧硫磷、甲基 嘧啶磷、甲基对硫磷、稻瘟净、水胺硫磷、氧化喹硫磷、稻丰散、甲喹硫磷、克线磷、乙硫磷、乐果、喹硫磷、 对硫磷、杀螟硫磷的残留量分析方法。 本标准适用于使用过敌敌畏等二十种农药制剂的水果、蔬菜、谷类等作物的残留量分析。 2原理 含有机磷的试样在富氢焰上燃烧,以HPO碎片的形式,放射出波长526 nm的特性光;这种光通过滤光片选择后,由光电倍增管接收.转换成电信号,经微电流放大器放大后被下来。试样的峰面积或峰高与标准品的峰面积或峰高进行比较定量。 3试剂 3.1丙酮。 3.2二氯甲烷。 3.3氯化钠。 3. 4无水硫酸钠。 3.5助滤剂Celite 545。 3.6农药标准品如下: 3.6. 1敌敌畏(DDVP):纯度≥99%。 3.6.2速灭磷(mevinphos):顺式纯度≥60%,反式纯度≥40%. 3.6.3久效磷(monocrotophos):纯度≥99%。 3.6.4甲拌磷(phorate):纯度≥98%。 3.6.5巴胺磷(propetumphos):纯度≥99%。 3.6.6二嗪磷(diazinon):纯度≥98%。 3.6.7乙嘧硫磷(etrimfos):纯度≥97%。 3.6.8甲基嘧啶磷(pirimiphos-methyl):纯度≥99%。 3.6.9甲基对硫磷(parathion-methyl):纯度≥99%。 3.6.10稻瘟净(kitazine):纯度≥99%。 3.6.11水胺硫磷(isocarbophos):纯度≥99%。 3.6. 12氧化喹硫磷(po-quinalphos):纯度≥99%。 3.6.13稻丰散(phenthoate):纯度≥99.6%. 3.6.14甲喹硫磷(methdathion):纯度≥99.6%。 3.6.15克线磷(phenamiphos):纯度≥99. 9%。 3.6.16乙硫磷(ethion):纯度≥95%。 3.6.1 7乐果(dimethoate):纯度≥99.0%。 3.6.18喹硫磷(quinaphos):纯度≥98. 2%。 3.6.19对硫磷(parathion):纯度≥≥99. 0%。 3.6.20杀螟硫磷(fenitrothion):纯度≥98. 5%。 3.7农药标准溶液的配制:分别准确称取3.6.1~3. 6. 20标准品,用二氯甲烷为溶剂,分别配制成 1.0 mg/mL的标准储备液,贮于冰箱(4℃)中,使用时根据各农药品种的仪器响应情况,吸取不同量的 标准储备液,用二氯甲烷稀释成混合标准使用液. 4仪器 4.1组织捣碎机。 4.2粉碎机。 4.3旋转蒸发仪。 4.4气相色谱仪:附有火焰光度检测器(FPD)。 5试样的制备 取粮食试样经粉碎机粉碎,过20目筛制成粮食试样;水果、蔬菜试样去掉非可食部分后制成待分析试样。 6分析步骤 6.1提取 6. 1.1水果、蔬菜 称取50.00 g试样,置于300 mL烧杯中,加入50 mL水和100 mL丙酮(提取液总体积为150 mL),用组织捣碎机提取1 min~2 min,匀浆液经铺有两层滤纸和约10 gCelite 545的布氏漏斗减压抽滤。取滤液100 mL移至500 mL分液漏斗中. 61.2谷物 称取25. 00 g试样,置于300 mL烧杯中,加入50 mL水和100 mL丙酮,以下步骤同6.1.1。 6.2净化 向6. 1. 1或6. 1. 2的滤液中加入10 g~15 g氯化钠使溶液处于饱和状态。猛烈振摇2 min~3 min,静置10 min,使丙酮与水相分层,水相用50 mL二氯甲烷振摇2 min,再静置分层。 将丙酮与二氯甲烷提取液合并经装有20 g~30 g无水硫酸钠的玻璃漏斗脱水滤入250 mL圆底烧瓶中.再以约40 mL二氯甲烷分数次洗涤容器和无水硫酸钠。洗涤液也并入烧瓶中,用旋转蒸发器浓缩至约2 mL,浓缩液定量转移至5 mL~25 mL容量瓶中,加二氯甲烷定容至刻度。 6.3气相色谱测定 6.3.1色谱参考条件 6.3.1.1色谱柱 a)玻璃柱2.6m×3 mm(i.d),填装涂有4.5%DC-200+2.5%OV-17的Chromosorb W A W DMCS(80目~100目)的担体。 b)玻璃柱2.6 m×3mm(i. d),填装涂有质量分数为1.5%的QF-1的Chromosorb W A W DMCS(60目~80目)七 6.3.1.2气体速度 氮气50 mL/min、氢气100 mL/min,空气50 mL/min. 6.3.1.3温度 柱箱240℃、汽化室260℃、检测器270℃。 6.4测定 吸取2μL~5μ产L混合标准液及试徉净化液注入色谱仪中,以保留时间定性。以试样的峰高或峰面积与标准比较定量。 7结果计算 i组分有机磷农药的含量按式(1)进行计算。 X i = (1) 式中: X i——i组分有机磷农药的含量,单位为毫克每千克(mg/kg); A i——试样中i组分的峰面积,积分单位; A si——混合标准液中i组分的峰面积,积分单位; V1——试样提取液的总体积,单位为毫升(mL); V2——净化用提取液的总体积,单位为毫升(mL); V3——浓缩后的定容体积,单位为毫升(mL); V4——进样体积,单位为微升(μL); E si——注入色谱仪中的i标准组分的质量,单位为纳克(ng); m ——试样的质量,单位为克(g)。 计算结果保留两位有效数字。 8精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的15%。 9其他 9.1 16种有机磷农药的色谱图 16种有机磷农药(标准溶液)的色谱图,见图1。 1——敌敌畏最低检测浓度0.005 mg/kg; 2——速灭磷最低检测浓度0. 004 mg/kg; 3——久效磷最低检测浓度0.014 mg/kg; 4——甲拌磷最低检测浓度0. 004 mg/kg; 5——巴胺磷最低检测浓度O. 011 mg/kg; 6——二嗪磷最低检测浓度0. 003 mg/kg; 7——乙嘧硫磷最低检测浓度0.003 mg/kg; 8——甲基嘧啶磷最低检测浓度0.004 mg/kg; 9——甲基对硫磷最低检测浓度0.004 mg/kg; 10——稻瘟净最低检测浓度0.004 mg/k9i 11——水胺硫磷最低检测浓度0.005 mg/kg; 12——氧化喹硫磷最低检测浓度0.025 mg/kg; 13——稻丰散最低检测浓度0.017 mg/kg; 14——甲喹最低检测浓度0.014 mg/kg; 15——克线磷最低检测浓度0. 009 mg/kg; 16——乙硫磷最低检测浓度0. 014mg/kg, 图1 16种有机磷农药(标准溶液)的色谱图9.2 13种有机磷农药的色谱图 13种有机磷农药的色谱图,见图2。 1——敌敌畏; 8——乐果; 2——甲拌磷; 9——喹硫磷, 3——二嗪磷; 10——甲基对硫磷; 4——乙嘧硫磷; 11——杀螟硫磷; 5——巴胺磷; 12——对硫磷; 6——甲基嘧啶磷; 13——乙硫磷。 7——异稻瘟净; 图2 13种有机磷农药的色谱图 第二法粮、菜、油中有机磷农药残留量的测定 10范围 本标准规定了粮食、蔬菜、食用油等食品中敌敌畏、乐果、马拉硫磷、对硫磷、甲拌磷、稻瘟净、杀螟硫磷、倍硫磷、虫螨磷的测定方法。 本标准适用于粮食、蔬菜、食用油使用过敌敌畏、乐果、马拉硫磷、对硫磷、甲拌磷、稻瘟净、杀螟硫磷、倍硫磷、虫螨磷等的农药的残留量分析。 最低检出量为0. 1 ng ~0. 3 ng,进样量相当于0. 01g试样,最低检出浓度范围为0. 01 mg/kg~0. 03 mg/kg。 11原理 试样中有机磷农药经提取、分离净化后在富氢焰上燃烧,以HPO碎片的形式,放射出波长526 nm光,这种特征光通过滤光片选择后,由光电倍增管接收,转换成电信号,经微电流放大器放大后,被记录下来。试样的峰高与标准的峰高相比,计算出试样相当的含量。 12试剂 12.1 二氯甲烷。 12.2无水硫酸钠。 12.3丙酮。 12.4中性氧化铝:层析用,经300℃活化4h后备用。 12.5活性炭:称取20g活性炭用盐酸(3 mol/L)浸泡过夜,抽滤后,用水洗至无氯离子,在120℃烘干备用。 12.6硫酸钠溶液(50g/L)。 12.7农药标准储备液:准确称取适量有机磷农药标准品,用苯(或三氯甲烷)先配制储备液,放在冰箱中保存。 12.8农药标准使用液:临用时用二氯甲烷稀释为使用液,使其浓度为敌敌畏、乐果、马拉硫磷、对硫磷和甲拌磷每毫升各相当于1. 0 μg,稻瘟净、倍硫磷、杀螟硫磷和虫螨磷每毫升各相当于2.0μg。 13仪器 13. 1气相色谱仪:具有火焰光度检测器。 13.2电动振荡器。 14分析步骤 14.1 提取与净化 14.1.1蔬菜:将蔬菜切碎混匀。称取10.00g混匀的试样,置于250 mL具塞锥形瓶中,加30 g~100 g无水硫酸钠(根据蔬菜含水量)脱水,剧烈振摇后如有固体硫酸钠存在,说明所加无水硫酸钠已够。加0.2 g~0. 8 g活性炭(根据蔬菜色素含量)脱色。加70 mL 二氯甲烷,在振荡器上振摇0.5 h,经滤纸过滤。量取35 mL滤液,在通风柜中室温下自 然挥发至近干,用二氯甲烷少量多次研洗残渣,移入10 mL(或5 mL)具塞刻度试管中,并定容至2. 0 mL,备用。 14.1.2稻谷:脱壳、磨粉、过20目筛、混匀。称取10. 00 g,置于具塞锥形瓶中,加入0.5g中性氧化铝及20 mL二氯甲烷,振摇0.5h,过滤,滤液直接进样。如农药残留量过低,则加30 mL二氯甲烷,振摇过滤,量取15 mL滤液浓缩并定容至2.0 mL进样。 14.1.3小麦、玉米:将试样磨碎过20目筛、混匀。称取10. 00 g置于具塞锥形瓶中,加入0.5g中性氧化铝、0. 2 g活性炭及20 mL二氯甲烷,振摇0. 5 h,过滤,滤液直接进样。如农药残留量过低,则加30 mL二氯甲烷,振摇过滤,量取15 mL滤液浓缩,并定容至2 mL进样。 14.1.4植物油:称取5. 0 g混匀的试样,用50 mL丙酮分次溶解并洗入分液漏斗中,摇匀后,加10 mL水,轻轻旋转振摇1 min,静置1h以上,弃去下面析出的油层,上层溶液自分液漏斗上口倾入另一分液漏斗中,当心尽量不使剩余的油滴倒入(如乳化严重,分层不清,则放入50 mL离心管中,以2 500 r/min离心0.5 h,用滴管吸出上层溶液)。加30 mL 二氯甲烷,100 mL硫酸钠溶液(50 g/L),振摇1 min,静置分层后,将二氯甲烷提取液移至蒸发皿中。丙酮水溶液再用10 mL二氯甲烷提取一次,分层后,合并至蒸发皿中。自然挥发后,如无水,可用二氯甲烷少量多次研洗蒸发皿中残液移入具塞量筒中,并定容至5 mL。加2g无水硫酸钠振摇脱水,再加1g中性氧化铝、0.2g活性炭(毛油可加0.5 g)振摇脱油和脱色,过滤,滤液直接进样。二氯甲烷提取液自然挥发后如有少量水,可用 5 mL二氯甲烷分次将挥发后的残液洗入小分液漏斗内,提取1 min,静置分层后将二氯甲烷层移入具塞量筒内,再以5 mL二氯甲烷提取一次,合并入具塞量筒内,定容至10 mL,加5g无水硫酸钠,振摇脱水,再加1g中性氧化铝、0.2g活性炭,振摇脱油和脱色,过滤,滤液直接进样。或将二氯甲烷和水一起倒入具塞量筒中,用二氯甲烷少量多次研洗蒸发皿,洗液并入具塞量筒中,以二氯甲烷层为准定容至5mL,加3 g无水硫酸钠,然后如上加中性氧化铝和活性炭依法操作。 14.2 色谱条件 14.2.1色谱柱:玻璃柱,内径3 mm,长1.5 m~2.0 m。 14.2.1.1分离测定敌敌畏、乐果、马拉硫磷和对硫磷的色谱柱。 a)内装涂以2. 5%SE-30和3%QF-1混合固定液的60目~80目Chromosorb W AW DMCS; b)内装涂以1. 5%OV-17和2%QF-1混合固定液的60目~80目Chromosorb W AW DMCS; c)内装涂以2%OV-101和2%QF-1混合固定液的60目~80目Chromosorb W AW DMCS。 14.2.1.2分离、测定甲拌磷、虫螨磷、稻瘟净、倍硫磷和杀螟硫磷的色谱柱。 a)内装涂以3%PEGA和5%QF-1棍合固定液的60目~80目Chromosorb W AW DMCS; b)内装涂以2%NPGA和3%QF-1混合固定液的60目~80目Cbromosorb W AW DMCS。 14.2.2气流速度:载气为氮气80 mL/min;空气50 mL/min;氢气180mL/min(氮气、空气和氢气之比按各仪器型号不同选择各自的最佳比例条件)。 14.2.3温度:进样口:220℃;检测器:240℃;柱温:180℃,但测定敌敌畏为130℃。 15测定 将12.8所述的混合农药标准使用液2μL~5μL分别注入气相色谱仪中,可测得不同浓度有机磷标准溶液的峰高,分别绘制有机磷标准曲线。同时取试样溶液2μL~5μL注入气相色谱仪中,测得的峰高从标准曲线图中查出相应的含量。 16计算 试样中有机磷农药的含量按式(2)进行计算。 X = (2) 式中: X——试样中有机磷农药的含量,单位为毫克每千克(mg/kg); A——进样体积中有机磷农药的质量,单位为纳克(ng); m——进样体积(μL)相当于试样的质量,单位为克(g)。 计算结果保留两位有效数字。 17精密度 敌敌畏、甲拌磷、倍硫磷、杀螟硫磷在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。 乐果、马拉硫磷、对硫磷、稻瘟净在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的15%。 18其他 其他有机磷农药的气相色谱图,见图3~图6。 2. 5%SE-30和3%QF-1柱,柱温180℃ 1——乐果; 2——马拉硫磷; 3——对硫磷。 2.5%SE-30和3%QF-1柱,柱温130℃ 图3 3种有机磷农药的气相色谱图图4敌敌畏农药的气相色谱图 3%PEGA+5%QF-1柱 2%NPGA+3% QF-1柱 1——甲拌磷; 1——甲拌磷; 2——稻瘟净; 2——稻瘟净; 3——倍硫磷; 3——倍硫磷; 4——杀螟硫磷。 4——杀螟硫磷。 图5 4种有机磷农药的气相色谱图图6 4种有机磷农药的气相色谱图 第三法肉类、鱼类中有机磷农药残留量的测定 19范围 本标准规定了肉类、鱼类中敌敌畏、乐果、马拉硫磷、对硫磷的残留分析方法。 本标准适用于肉类、鱼类中敌敌畏、乐果、马拉硫磷、对硫磷农药的残留分析。敌敌畏、乐果、马拉硫磷、对硫磷检出限分别为0. 03,0. 015,0. 015,0. 008 mg/kg。 20原理 同第2章。 21试剂 21.1丙酮。 21.2 二氯甲烷。 21.3无水硫酸钠:在700℃灼烧4h后备用。 21.4中性氧化铝:在550℃灼烧4 h。 21.5硫酸钠溶液(20 g/L)。 21.6农药标准溶液:准确称取敌敌畏、乐果、马拉硫磷、对硫磷标准品各10.0 mg,用丙酮溶解并定容至100 mL,混匀,每毫升相当农药0. 10 mg,作为储备液,保存于冰箱中。 21.7农药标准使用液:临用时用丙酮稀释至每毫升相当2.0μg。 22仪器 22.1气相色谱仪:附火焰光度检测器(FPD)。 22.2电动振摇器。 23分析步骤 23.1提取净化 将有代表性的肉、鱼试样切碎混匀,称取20. 00 g于250 mL具塞锥瓶中,加60 mL 丙酮,于振荡器上振摇0.5 h,经滤纸过滤,取滤液30 mL于125 mL分液漏斗中,加60 mL 硫酸钠溶液(20 g/L)和30 mL二氯甲烷,振摇提取2 min后,静置分层,将下层提取液放入另一个125 mL分液漏斗中,再用20 mL二氯甲烷于丙酮水溶液中同样提取后,合并二次提取液,在二氯甲烷提取液中加1g中性氧化铝(如为鱼肉加5.5 g),轻摇数次,加20 g 无水硫酸钠。振摇脱水,过滤于蒸发皿中,用20 mL二氯甲烷分二次洗涤分液漏斗,倒入蒸发皿中,在55℃水浴上蒸发浓缩至1mL左右,用丙酮少量多次将残液洗入具塞刻度小试管中,定容至2 mL~5 mL,如溶液含少量水,可在蒸发皿中加少量无水硫酸钠后,再用丙酮洗入具塞刻度小试管中,定容。 23.2色谱条件 23.2.1色谱柱:内径3.2 mm,长1.6 m的玻璃柱,内装涂以1. 5%OV-17和2%QF-1混合固定液的80目~100目Chromosorb W A W DMCS。 23.2.2流量:氮气60 mL/min;氢气0. 7 kg/cm2;空气0.5 kg/cm2。 23.2.3温度:检测器250℃,进样口250℃,柱温220℃(测定敌敌畏时为190℃)。如同时测定四种农药可用程序升温。 23.2.4 4种有机磷农药的色谱图,见图7。 1——敌敌畏; 2——乐果; 3——马拉硫磷; 4——对硫磷。 图7 4种有机磷农药的色谱图 23.3测定 将标准使用液或试样液进样1μL~3μL,以保留时间定性;测量峰高,与标准比较进行定量。 24结果计算 同第7章。 25精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。