乳酸菌厌氧培养乳酸菌厌氧培养
乳酸菌厭氧培養
觀察記錄:
1. 菌落外觀觀察:
Pia1:圓形,乳白色,直徑約3mm,表面光滑,平坦高起狀。 Pia2:圓形,米色,直徑約0.7mm,表面光滑,凸起狀。 Pia3:圓形,中央為純白色而光滑,周圍較透明且凹凸,直徑約3.5mm,中
央高起狀。
Pia4:略為圓形,米色較透明,直徑約3.5mm,表面較凹凸,中央高起而周
圍也略為高起。
Pia5:圓形,米色,直徑約0.5mm,表面光滑,凸起狀。 Pia6:略為圓形;輻射狀,中央為純白,周圍較透明,直徑約為5mm,不過
當菌落增加時(>3...
乳酸菌厌氧培养
乳酸菌厭氧培養
觀察記錄:
1. 菌落外觀觀察:
Pia1:圓形,乳白色,直徑約3mm,
面光滑,平坦高起狀。 Pia2:圓形,米色,直徑約0.7mm,表面光滑,凸起狀。 Pia3:圓形,中央為純白色而光滑,周圍較透明且凹凸,直徑約3.5mm,中
央高起狀。
Pia4:略為圓形,米色較透明,直徑約3.5mm,表面較凹凸,中央高起而周
圍也略為高起。
Pia5:圓形,米色,直徑約0.5mm,表面光滑,凸起狀。 Pia6:略為圓形;輻射狀,中央為純白,周圍較透明,直徑約為5mm,不過
當菌落增加時(>300),則會縮小至約2mm。
Pia7:略為圓形,乳白色,周圍較透明,直徑約4mm,表面凹凸,微微隆起
狀。
觀察到的米色有可能部分為培養基的顏色,而菌落本身為透明的。
2. 顯微鏡觀察記錄:
Pia1:細長桿狀菌,另外還有一些較短甚至為小球狀的可能為雜菌,抑或可
能為Pia1所產生的孢子。
Pia2:橢圓球狀菌,時可看見呈雙球甚至四球在一起的狀態,不過無法分辨
是否為正在分裂狀態。
Pia3:細長桿狀菌,可能是因為很長所會略有扭曲的形狀。 Pia4:細長桿狀菌,大致上比Pia3短。
Pia5:橢圓球狀菌,外觀看來和Pia2相同,也時常形成雙球狀態。 Pia6:細長桿狀菌,時可看見數個菌相接在一起,可能為在分裂狀態。 Pia7:短桿狀菌,也有一些小球狀的,可能是剛分裂出來的或是孢子。
3. 菌落數記錄:M表示菌落數過多,難以計算。
優沛蕾:
90.7.3~90.7.20
菌種 Pia1 Pia2
菌落數 菌液濃度 菌落數 菌液濃度
日期 換算實際菌數(個/ml) 換算實際菌數(個/ml) 90.7.9 20 10
~ -5-5 M 10 90.7.12 -6-60 10 73 10
-7-70 10 0 10
672.0*10 7.3*10
-5-5 M 10
-6-60 10 518 10
90.7.13 13 10
681.3*10 5.18*10 ~
-5-590.7.16 6 10 M 10 90.7.16
~ -6-63 10 142 10
90.7.18 586*10 1.42*10
-4-490.7.18 102 10 0 10
~ -6-61 10 17 10
90.7.20 671.02*10 1.7*10
統一AB:
90.7.7~90.7.21
0 菌Pia3 Pia4 Pia5
種 菌落數 菌液濃度 菌落數 菌液濃度 菌落數 菌液濃度
換算實際菌數(個/ml) 換算實際菌數(個/ml) 換算實際菌數(個/ml) 日期
90.7.9 0 10
-5-5-5 M 10 M 10
~
-6-6-60 10 42 10 213 10 90.7.12
-7-7-70 10 7 10 20 10
78 2.13*10
-6-6-690.7.13 23 10 50 10 356 10
0 4.2*10
~ -7-7-75 10 4 10 40 10 90.7.16 7782.3*10 5.0*10 3.56*10
-6-6-690.7.16 8 10 12 10 192 10
~ -7-7-70 10 0 10 13 10 90.7.18 6788*10 1.2*10 1.92*10
-5-5-590.7.18 12 10 8 10 M 10
~ -6-6-60 10 0 10 135 10 90.7.20 6581.2*10 8*10 1.35*10
7/20購買new sample
90.7.20 2 10-5-5-5 62 10 M 10
~ -6-6-62 10 14 10 423 10 90.7.23 -7-7-70 10 2 10 39 10
5682*10 6.2*10 3.9*10
光泉: 比菲多:
90.7.3~90.7.17 90.7.4~90.7.25
菌種 Pia6 菌種 Pia7
菌落數 菌液濃度 菌落數 菌液濃度
-5-5日期 日期 換算實際菌數(個/ml) 換算實際菌數 90.7.9 0 10 90.7.9 M 10~ -6-664 10 0 10
~ 90.7.12 -7-713 10 0 10 90.7.12 76.4*10 0
-690.7.13 47 10 90.7.13 32 10-3 ~ ~ -76 10 5 10-4 90.7.16 90.7.16 744.7*10 3.2*10
-6-290.7.16 38 10 90.7.16 31 10
~ ~ -7-35 10 0 10 90.7.18 90.7.18 733.8*10 3.1*10
-5-190.7.18 206 10 90.7.18 18 10
~ ~ -6-223 10 3 10 90.7.20 90.7.20 722.06*10 1.8*10
心得討論:
1. 在統一AB的樣本中,7/9的培養都沒有產生Pia3的菌落,而在7/13之後的培養都有發現,依照所謂的「統一AB」來看,應該是只有兩種乳酸菌,卻出
現了第三種菌,很有可能是汙染,待之後購買新的樣本再確定結果。 2. 從菌落外觀及顯微鏡中來看,Pia2和Pia5可能是同一種菌,而這些在樣本中,不過所知的乳酸菌多是桿Bifidobacterium lactis
佔大多數,可能就是所謂的狀的或是鏈狀的,而見到的Pia2及Pia5是單球狀或是雙球狀,故實際情況
仍需用其他方法再做確定。
3. 在顯微鏡觀察中,可看見細菌除了整體的移動現象外,也能發現細菌本身有
做些蠕動,不知是自身的動作還是受布朗運動影響,由於顯微鏡放大倍率不
夠,故無法觀察是否具有纖毛等運動器官,不過因為發現這樣的動作是部份
菌才有的,猜測是細菌自己的運動。
4. 在7/16的抽樣中,整體上來看菌落數有所減少,菌落也變小了,做了幾項假
設:a. 整體培養環境的變化。b. 培養的時間較短。c. 樣本本身就保存過久使得菌數減少且活性降低。然而如果操作上沒有錯誤的話,環境上的變化是
應該可忽略的,而從培養的時間上來看都是大約為48小時,故培養的時間上可以視為相同的,所以比較有可能的是樣本保存太久,菌總數減少使菌落減
少,活性降低使菌落較小。
5. 自7/9及7/13的培養成果中,選取適合分離的菌落,進行四區畫線塗菌,在
7/18時觀察其結果。發現Pia1及Pia6沒有菌落產生。首先假設是畫線操作
上的失誤,故在7/18時重新進行Pia1及Pia6的畫線培養,7/20時觀察其結果,發現仍然沒有菌落產生。再假設是培養時間不夠,便在7/20時將之前的
Pia1及Pia6四區畫線再進行培養。另外有個假設是這些菌要有其他種類的菌
生長來輔助,而這樣的假設在Pia6比較不可能,因為在此樣本內(光泉)只有發現Pia6,故猜想是其他的原因。
6. 從優沛蕾的瓶身上來看,它是有三種菌的,不過從培養的結果來看,只有發
現兩種菌(Pia1及Pia2),可能第三種菌不適合在此培養基上生長,也可能是
三種菌之間的競爭使它無法生長。試著從樣本中直接分離或許能確定結果。 7. 7/20時觀察7/18的培養結果,發現優沛蕾的樣本在濃度較高時(10-4)沒有Pia2
-5-6菌落的產生,但是在濃度較低時(10和10)Pia2的菌落數比Pia1還多,故假設在高濃度時菌數太多,生長上會有抑制發生。
8. 承1.,7/20培養新開罐的統一AB優酪乳,發現仍然會有Pia3的菌落產生,但是不多,故仍然無法確定是否為汙染。另外作個假設,Pia3這個菌種原本在樣本裡存在的量不多,只有在開瓶之後才會逐漸成長,故在開瓶後馬上塗
上的菌液是含有很少此菌的,這樣的假設是需要其他的實驗來証明的。 9. 承5.,7/20至7/23繼續培養之前的四區畫線,結果仍然沒有菌落產生。有可
能需要更長的時間培養,不過不排除是在畫線時細菌已經死亡,而我們畫線
上去的只是死菌而已,故無法長出菌落。
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