单剂量盐酸左西替利嗪片人体生物等效性研究

单剂量盐酸左西替利嗪片人体生物等效性研究 单剂量盐酸左西替利嗪片人体生物等效性 研究 ChineseJournalofNewDrugs2006.Vo1.15No.12 90%置信区间为(0.93,1.05),在80%,125%的 等效范围内.对…进行非参数检验(Wilcoxon符 号秩检验)得出,泮托拉唑钠受试制剂和参比制剂 比较差异无显着性意义(P>0.05).结果表明受试 制剂和参比制剂具有生物等效性. 讨论 泮托拉唑钠肠溶片及胶囊等药动学及人体生物 等效性研究国内外已有报道?”,泮托拉唑钠肠溶 微丸胶囊是一种新型肠溶制剂,普通肠溶胶囊是依 靠囊壳的肠溶特性来实现的,其稳定性受囊壳老化 的影响,该种制剂肠溶效果有时不可靠,而肠溶微丸 由多个小丸组成,是多元体系,个别小丸在制备上的 失误或缺陷不致对制剂整体的释药行为产生影响, 使药物的稳定性得到提高.肠溶微丸胶囊在胃肠道 分布面积大,刺激性小,提高了药物的安全性,患者 的顺应性好.肠溶微丸胶囊有利于维持血药浓度的 平稳,波动较小.将普通肠溶胶囊改制成肠溶微丸 胶囊是技术上的一种进步,同时国际上大多数药物 的口服肠溶制剂均采用肠溶微丸胶囊的形式,其药 动学及人体生物等效性的研究国内尚未见报道.本 中国新药杂志2006年第l5卷第l2期 研究表明泮托拉唑钠肠溶微丸胶囊与普通肠溶胶囊 c…和AUC...:经方差和双单侧t检验一致,吸 收程度等效,其相对生物利用度为(100.1? 15.0)%;二者经非参数检验无显着性差异,表 明2种制剂生物等效. [作者简介]周学敏(1956一),女,主任药师,主要从事药 物质量控制及体内药物分析研究.联系电话:(025) 86862008.E.mail:zxmO01001@sina.com. [参考文献] [1]吕明,刘冬葵.反相高效液相色谱法测定人血浆中泮托拉唑 [J].辽宁药物与临床,1999,2(3):28—29. [2]肇丽梅,营凌燕,段旭.泮托拉唑肠溶片药动学及相对生物利 用度[J].中国药学杂志,2000,35(5):329—331. [3]EHRLICHA,LUCKERPW,WIEDEMANNA,eta1.Compafision ofthepharmacodynamicsandpharmacokineticsofpantoprazole(40 mg)ascomparedtoomeprazoleMUPS(20mg)afterrepeatedoral doseadministration[J].MethodsFindExpClinPhaimacol,1999, 2l(1):47—51. [4]RADHOFER.WELTES.Pharmacokineticsandmetabolismofthe protonpumpinhibitorpantoprazoleinman[J].DrugsToday 772. (Barc),1999,35(10):765— 编辑:况扶华/接受日期:2006—0l一20 单剂量盐酸左西替利嗪片人体生物等效性研究 郭红英,王曼丽,赵志刚,张晋华,王汝龙 (1北京友谊医院临床药理室,北京100050;2北京天坛医院临床药理室,北京100050) [摘要]目的:研究盐酸左西替利嗪片(受试制剂)与已上市的盐酸左西替利嗪片(参比制剂)的相对生物利 用度和生物等效性.:健康男性志愿者18例,采用双周期两制剂交叉试验,分别口服受试制剂或参比制 剂10mg,用HPLC法测定血药浓度,DAS软件处理计算药动学参数和相对生物利用度.结果:受试制剂与参比制 剂的tl/2e分别为(5.4?1.2)和(4.9?1.5)h;C…分别为(424.4?89.2)和(415.3?65.0)ng?mL,.…分别为 (1.2?0.8)和(1.1?0.5)h.AUC..24h分别为(3223.3?612.3)和(3216.5?654.8)ng?h?mL,.相对生物利用 度为(103.5?26.8)%.AUCo_24h90%置信区间为0.9326—1.0821,C…90%置信区间为0.9482—1.0821,.经 非参数法检验,差异无统计意义.结论:2种制剂生物等效. [关键词]盐酸左西替利嗪;生物等效性;相对生物利用度 [中图分类号]R976;R969.1[文献标识码]A[文章编 号]1003—3734(2006)12—1010—04 Bi0equiValenceoflevocetirizinehydr0chl0ridetablets GUOHong-ying,WANGMan-li,ZHAOZhi.gang,ZHANGJin.hua,WANGRu.1ong (1DepartmentofClinicalPharmacology,TheFriendshipHospital,Beijing100050,China; 2DepartmentofClinicalPharmacology,TiantanHospital,Bering100050,China) [Abstract]Objective:Tostudytherelativebioavailabilityandbioequivalenceoflevocetirizine hydrochloridetablets(testsamples)newlydevelopedtolevocetirizinehydrochloridetablets(reference 一 1010— ChineseJournalofNewDrugs2006.Vo1.15No.12中国新药杂志2006年 第l5卷第l2期 samples)beingmarketed.Methods:18healthymalevolunteerswererandomlyadministeredwithanoral singlecrossoverdoseoftestandreferencelevocetirizine10mg.Theplasmasampleswerethencollected fromthevolunteerstomeasurelevocetirizineconcentrationsbyHPLC.Thepharmacokineticparameters andrelativebioavailabilitywerecalculatedbyDASprogram.Results:Thepharmacokineticprofilesof testandreferencesampleswereasfollows:tl/2(5.44-1.2)VS.(4.94-1.5)h,T…(1.24-0.8)VS.(1.14- 0.5)h,C…(424.44-89.2)VS.(415.34-65.0)ng?mL, andAUC0-24h(3223.34-612.3)VS. (3216.54-654.8)ng?h?mL,.Therelativebioavailabilityoftestsampleswas(103.54-26.8)%.The 90%confidenceintervalofAUC0- 24handCwas0.9326—1.0821and0.9482—1.0821,respective- ly.Conclusion:Thetestsampleswerebioequivalenttothereferencesamples. [Keywords]levocetirizinehydrochloride;bioequivalence;bioavailability 盐酸西替利嗪是由左西替利嗪及右西替利嗪等 比例组成的消旋体,属抗过敏药,它选择性作用于组 胺H.受体,可阻滞组胺介导的变态反应,用于缓解组 胺引起的鼻炎,枯草热,眼睛瘙痒,皮肤瘙痒,慢性荨 麻疹等症状.左西替利嗪与H.受体的亲和力及抗组 胺活性均比右西替利嗪大,左西替利嗪的血浆蛋白结 合率比右西替利嗪高,且与非靶器官的亲和力较右西 替利嗪小.左西替利嗪大部分以原型排出体外,在肝 中代谢比例远远小于右西替利嗪,表明左西替利嗪与 其他经CYP450酶系代谢的药物之间的相互作用较 小.本研究采用HPLC紫外法测定了受试制剂对参比 制剂的相对生物利用度,并进行了生物等效性评价. 材料与方法 1仪器 Agilent1100G1312A泵,自动进样器及紫外检 测器,Agilent化学工作站,离心机,振荡器,溶剂过 滤器等. 2药品和试剂 受试制剂:盐酸左西替利嗪片.北京海泽润医药 技术有限公司生产,每片5mg,批号:2004.02.z.参 比制剂:盐酸左西替利嗪片(商品名迪皿),重庆华 邦制药有限公司生产,每片5mg,批号:20050702. 对照品:盐酸左西替利嗪,纯度99.2%,北京海泽润 医药技术有限公司提供.内标:盐酸羟嗪(99.0%) 购自上海凯峰化工有限公司.试剂:甲醇(色谱 纯),K:HPO与磷酸(分析纯). 3受试者 健康男性志愿者18例,年龄28—36岁,体重指 数(BMI)20—24.受试者均先经全面体检和血生 化,尿液,血常规等检查确认其健康.受试者试验前 签署知情同意书. 4试验设计与血样采集 本研究采用随机双周期交叉试验设计,18例受 试者随机分成2组,每组9例.第1组于第1周期 单剂量口服受试制剂10mg,于第2周期单剂量口服 参比制剂10mg,第2组于第1周期单剂量口服参比 制剂10mg,于第2周期单剂量口服受试制剂10mg, 清洗期为一周.服药前取空白血,并于用药后 0.25,0.5,0.75,1,1.5,2,4,8,12和24h抽取静脉 血,分离血浆后,测定其血药浓度. 5左西替利嗪血浆药物浓度的测定 5.1色谱条件色谱柱:Shim—packCLC.ODS柱 (150mm×6mm),预柱:ODSClR柱(10mm×4.6mm); 流动相:甲醇-磷酸盐缓冲液(pH=3.6,Q02mol?L)为 60:40,流速:1.2mL?min,;检测波长:230nm;柱温:35?. 5.2血浆样品处理取受试者服药后血浆1mL, 加入内标溶液50L(2/zg?mL)及枸橼酸缓冲液 (1mol?L,,pH5.5)1mL,涡旋混合,加入乙酸乙酯 6mL,涡旋1min,振荡提取10min,离心10min (3000r?min),定量取乙酸乙酯层4.5mL,加入 100L1.7%的磷酸,涡旋1min,振荡10min,离心 10min(3000r?min),取磷酸层进样,进样20L, HPLC色谱图. 5.3曲线的制备取健康人空白血浆1mL, 混合后,按上述血浆样品处理方法操作.配制成 浓度分别为20,50,100,200,500和800ng?mL 的盐酸左西替利嗪标准血浆样品系列.以盐酸左 西替利嗪与内标峰面积比值(x)为横坐标,以相应 浓度(Y,ng?mL)为纵坐标,进行线性回归分析,回 归方程为Y:205.06X一1.68(r:0.9993,n=5).线 性范围为20—800ng?mL一,两批样品测定期间制作 了随行标准曲线,并测定了质控样品,偏差均小于 20%.最低定量浓度为20ng?mL,,准确度为 ‘ 111.1%4-9.5%,RSD为8.6%(n=5). 一 1011— ChineseJournalofNewDru~:s2006.Vo1.15No.12 5.4准确度分别配制盐酸左西替利嗪浓度为 50,200,800ng?mL的标准血浆样品,按上述血浆 样品处理方法操作,与对应标准溶液样品的峰面积 相比,计算提取回收率.上述3个浓度的血浆样品 的提取回收率依次为(64.0?5.7)%,(68.7? 6.6)%,(75.4?6.9)%(t/,=5). 配制浓度为50,200,800ng?mL的标准血浆样 品,按上述血浆样品处理方法操作,将盐酸左西替利 嗪与内标峰面积的比值代入标准曲线,计算检出浓 度,以检出浓度与加入浓度的比值作为相对回收率, 并以此评价本方法的准确度,上述3个浓度血浆样 品的准确度依次为(111.1?9.5)%,(92.8? 3.6)%,(102.9?6.3)%. 5.5精密度分别测定盐酸左西替利嗪浓度为 50,200,800ng?mL的标准血浆样品,按上述样品 处理及测定方法操作,日内精密度RSD分别为 8.6%,3.9%,6.2%;日间精密度RSD分别为 6.6%,4.1%,5.7%(n=5). 5.6稳定性为考察血样在采集后和贮存中的稳 定性,分别测定了其在常温和冷冻条件下的稳定性. 配制盐酸左西替利嗪浓度分别为50,200,800ng? mL的血浆样品,各浓度血浆样品分别于配制后 0.5,1,1.5,2h后以及冷冻3,9和15d后取出,解 冻,提取测定,计算其准确度和RSD.常温条件下, 上述浓度血浆样品的准确度分别为:(94.2? 4.0)%,(105.4?1.7)%,(99.0?4.4)%;RSD分 别为4.3%,1.6%,4.6%.冷冻条件下,上述浓度血 浆样品的准确度分别为:(93.6?2.2)%,(100.2? 1.6)%,(101.8?4.7)%;RSD分别为2.3%, 1.6%,4.6%.结果表明血浆样品在常温下2h内, 冷冻条件下15d内是稳定的. 6统计处理 采用DAS软件处理血药浓度一时间数据,对试 验制剂和参比制剂的AUC.及c…经对数转换后 进行方差分析和双单侧t检验,进行等效性评价. 生物利用度(F)用如下公式计算:F/%:AUC/ AUCR.×100. 结果 1色谱行为 取样品血浆1mL,按前述的样品处理方法操作. 在选定的色谱条件下,血浆中的左西替利嗪及内标羟 嗪峰形良好,分离完全,无杂质峰干扰.左西替利嗪 的保留时间为11.4,11.6min,羟嗪的保留时间为 一 1012一 中国新药杂志2006年第15卷第12期 7.7,7.9min.左西替利嗪血浆色谱图见图1. 盐酸庀 5101551015 t/raintlmin 卒自血浆+内标+盐酸左两替利嗪(2OOng?mL)服药0.5h血浆 1内标(tR=7.912rain);2盐酸左西替利嗪(tR=11564rain) 图1盐酸左西替利嗪血浆浓度测定的典型HPLC图 2血药浓度及药动学参数 18例受试者的平均血药浓度一时间曲线见图2, 药动学参数见表1. 5o0 4O0 300 200 0 100 0 0281216202428 tlh 图218例受试者单剂量口服10mg受试制剂和 参比制剂的平均血药浓度.时间曲线 表1口服盐酸左西替利嗪受试制剂和参比制剂后的 药动学参数及等效性检验 3生物等效性评价 用DAS软件对受试制剂和参比制剂的AUC. 及c…经对数转换后进行方差分析和双单侧t检 验,受试制剂AUC.-24h90%置信区间为93%一 108%,C…90%置信区间为94%,108%,相对生物 利用度为(103.5?26.8)%,符合《药物制剂人体生 物利用度和生物等效性试验指导原则》相应的规 定,两者生物等效. 讨论 1关于试验结果的讨论 本试验测定了受试制剂对参比制剂的相对生物 利用度及药动学参数,受试制剂对参比制剂的相对 生物利用度为(103.5?26.8)%.经统计学处理, 表明两者生物等效,试验结果为该药的临床应用提 ChineseJournalofNewDrugs2006,Vo1.15No.12 供了参考. 2提取方法的选择 作者在摸索试验条件的过程中比较了以下血样 提取方法.?用乙酸乙酯或二氯甲烷萃取血浆 中的药物,而后挥干溶剂,残渣用流动相溶解后进 样.?用乙酸乙酯或乙酸乙酯一二氯甲烷(30:1)萃 取后再用1.7%的磷酸提取,取磷酸层直接进样. 结果显示,在本试验选定的条件下,两种方法相比, 用第二种方法获得的血样色谱图在样品和内标出峰 处均无干扰峰,且回收率稳定,重现性好.此外,在 第二种方法中的乙酸乙酯中加入1/30的二氯甲烷 作为提取溶剂,其结果与单用乙酸乙酯提取无显着 差别,故本试验选取乙酸乙酯萃取后在用1.7%磷 酸提取的方法处理血样.盐酸左西替利嗪为水溶 性,采用乙酸乙酯,磷酸两步提取的方法,盐酸左西 替利嗪及内标盐酸羟嗪在1.7%的磷酸中易溶解, 且杂质较少,得到的色谱图较干净,但因此方法涉及 两次提取,操作步骤稍多,提取时间较长,这是本品 提取困难所在. 3内标的选择 文献中报导的有关试验中,使用的内标包括盐 酸羟嗪,氯雷他啶,普萘洛尔,普罗帕酮’, 盐酸异丙嗪,地西泮.作者在摸索试验条件的 过程中分别用地西泮,氯雷他啶,普罗帕酮和羟嗪作 内标.在内标峰的峰形,重现性,回收率的稳定性以 及与左西替利嗪的分离度等方面,羟嗪均优于地西 泮,氯雷他啶及普罗帕酮.羟嗪易溶与水,与左西 替利嗪溶解性相似,上述其他几种内标均难溶于 水,因血样处理中最后一步为用1.7%磷酸提取, 故作者认为,与左西替利嗪有相似的溶解性是羟 嗪优于其他几种内标的原因之一.此外,西替利 嗪是羟嗪的活性羧酸衍生物,两者色谱行为相似 且分离良好,在选定的条件下,羟嗪与西替利嗪的 代谢物无干扰. 中国新药杂志2006年第l5卷第l2期 4关于血浆中药物是否消旋化 Tillement等?的研究结果显示,左西替利嗪 在体内不发生消旋化,故人体口服本品后,测定的 血浆中的药物仍为西替利嗪的左旋体,经数据处 理得到的是左西替利嗪的有关药动学参数. [作者简介]郭红英(1971一),女,主管药师,主要从事新 药的生物等效性试验工作.联系电话:(010)63014411— 3515.E—mail:hy—guo@yeah.net. [参考文献】 [1]国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].2000年版.二 部.北京:化学工业出版社,2000:附录193—197. 【2]王本杰,郭瑞臣,高允生.盐酸左西替利嗪片人体生物等效性 研究[J].山东医科大学,2001,39(6):221—223. [3]孙苓苓,徐海燕,张逸凡.盐酸西替利嗪的药物动力学及制剂 的生物等效性[J]沈阳药科大学,2000,17(9):318—320. [4]史爱欣,孙春华,李可欣.盐酸西替利嗪胶囊的人体生物利用 度研究[J].中国l临床药理学杂志,1999,15(5):357—359. [5]蔡为民,姚兵,丁红兵.盐酸西替利嗪正常人体药代动力学及 生物利用度的研究[J].中国l临床药理学杂志,1999,15(4): 266—269. [6]段更利,陈钧,郑璐侠.国产与进El西替利嗪片的人体相对生 物利用度比较【J].中国新药与l临床杂志,2001,20(1): 23—25. [7]孙黎,刘晓琰,费艳秋.国产与进口西替利嗪的生物利用度测 定[J].医药导报,2003,22(1):15—18. [8]姜云平,曾任杰,吴苏澄.国产盐酸西替利嗪胶囊的人体药代 动力学及相对生物利用度[J].西南国防医药,2002,12(2): ll5一ll8. [9]MACEKJ,PTACEKP,KLIMAJ.Determinationofcetirizinein humanplasmabyhigh—performanceliquidchromatography[J]., ChromatogrB,1999,736(2):231—235. 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