【word】 高效液相色谱法测定降压平片中的葛根素含量

【word】 高效液相色谱法测定降压平片中的葛根素含量 高效液相色谱法测定降压平片中的葛根素 含量 解放军药学2011年8月20日第27卷第4期PharmJChinP,Vo1.27,No.4,Aug20,2011 高效液相色谱法测定降压平片中的葛根素含量 李雪松,关云娇 [摘要]目的建立测定降压平片中葛根索的高效液相色谱法.方法采用色谱柱:Diamonsil—C.(4.6mm× 150mm,5m);流动相:甲醇.乙腈一水(6:8:86);检测波长:250nm,对方中葛根的有效成分葛根素进行含量测定.结果葛 根素回归方程为Y=46512.53X一36398.96,r=0.9999,在24,96g/ml浓度范围呈良好的线性关系.平均加样回收率为 98.64%.RSD为0.41%(n=6).结论该法简便可行,重复性好,可以用来控制降压平片的质量. [关键词]降压平片;葛根素;高效液相色谱法;含量测定 [中图分类号]R927.2[文献标志码]A[文章编号]1008—9926(2011)04-0348-02 [DOJ]10.3969/j.issn.1008-9926.2011.04.022 DeterminationofPuerarininJiangyapingTablets byHighPerformanceLiquidChromatography LIXue?song,GUANYun-jiao JilinHeadayScienceandTechnologyCo.,Ltd,Changchun130022,China [Abstract]ObjectiveToestablishamethodfordeterminationofpuerarininJiangyapingtabletsbyhigh Cl8column(4 performanceliquidchromatography.MethodsADiamonsil— .6mm×150mm,5Ixm)andmobile phaseofmethanol—acetonitrile—water(6:8:86)wereused.Thedetectionw avelengthwas250nm.ResultsThe calibrationcurvewasingoodlinearrelationshipovertherangeof24—96g/ml (r=0.9999).Theaverage recoverywas98.64%,andRSDwas0.41%(n=4).ConclusionThismethodissimple,quick,sensitive, accurate,reproducibleandcanbeusedtocontrolthequalityofJiangyapingtablets. [Keywords]Jiangyapingtablets;puerarin;highperformanceliquidchromatography;determination 复方制剂降压平片由夏枯草,葛根,珍珠母, 菊叶,淡竹叶,芦丁,槲寄生等11味药组成,降压,清 头目.用于高血压及高血压引起的头晕,目眩.为 了建立该制剂的质量检测,采用高效液相色谱 <highperformanceliquidchromatography,HPLC)法 对方中葛根的有效成分葛根素进行了含量测定. 1仪器与试药 高效液相色谱仪,包括LC一10AT泵,SPD—M10A 二级管阵列检测器,CLASS.VP6.0色谱工作站; LC-2010AHT泵,SPD一10A紫外检测器,CLASS.VP 6.0色谱工作站;UV-2401紫外分光光度计(均为日 本岛津制作所).降压平片(规格:0.3g/片,吉林省 海的科技公司,批号:090801,090802,100901, 100902,100903),葛根素对照品(中国药品生物制 品检定所),甲醇,乙腈为色谱纯. 作者简介:李雪松,工程师.研究方向:药物分析.Tel:(0431) 85350360;E-mail:cell_ 2@126.com 作者单位:130022吉林长春,吉林省海的科技有限公司 2方法与结果 2.1色谱条件色谱柱:Diamonsil—Cl8(4.6mnl× 150mm,5m);流动相:甲醇.乙腈一水(6:8:86);检测 波长:250Elm.柱温:25,进样量:1D. 2.2溶液的制备(1)对照品溶液取葛根素对 照品适量,精密称定,加甲醇制成6Og/ml的溶液, 即得.(2)供试品溶液取本品20片,除去糖衣, 精密称定,研细,取约1g,精密称定,置具塞锥形瓶 中,精密加入甲醇100ml,密塞,称定重量,加热回流 1h,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇 匀,滤过,取续滤液,即得.(3)阴性对照溶液按 处方量制备不含葛根药材的阴性样品,按供试品溶 液的制备方法制备,即得. 2.3专属性试验分别精密吸取对照品,供试品和 阴性对照溶液各10l,注入液相色谱仪中,按2.1 项下色谱条件测定,结果明,阴性对照溶液色谱图 中对应于对照品位置处无干扰.理论板数按葛根素 峰计算应不低于3000.见图1. 解放军药学2011年8月20日第27卷第4期 PharmJChinP,Vo1.27,No.4,Aug20,2011 1 c t(min) A:对照品;B:J绸性对照;C:供试品;1:葛根素 图1降压平片的HPLC图谱 2.4线性关系考察取葛根素对照品适量,加甲醇 分别制成24,36,48,60,72,84,96g/ml的溶液,精 密吸取上述对照品溶液10l,注入液相色谱仪,测 定,以峰面积(Y)为纵坐标,以浓度(X)为横坐标, 绘制标准曲线,得回归方程为: Y=46512.53X一36398.96.r=0.9999 表明葛根素在24,96g/m1浓度范围内,峰面 积与浓度呈良好线性关系. 2.5精密度试验精密吸取同一批(批号: 090801)供试品溶液,连续5次重复进样,按2.1项 下色谱条件测定葛根素含量.结果表明RSD为 0.88%,方法精密度良好. 2.6稳定性试验取同一供试品溶液(批号: 090801),分别在0,2,4,6,8h进样,进样l0l,记 录峰面积.结果显示,葛根素RSD为0.69%(n= 5),表明8h内稳定性良好. 2.7重复性试验取本品同一批(批号:090801) 样品称取低,中,高3个重量各2份,按2.1项下色 谱条件测定其含量.结果表明RSD为1.03%(= 6),方法重复性良好. 2.8回收率试验取已知含量供试品(含葛根素 6.1733mg/g)约0.5g,6份,分别置于6只具塞锥 形瓶中,再分别精密量取葛根素对照品溶液(浓度 为0.5913mg/m1)4.0,5.0,6.0ml各2份,分别加 入上述6只具塞锥形瓶中,按2.1项下色谱条件测 定含量,计算回收率,结果见表1. 2.9含量i贝4定取供试品5批,按2.1项下色谱条 件进行样品中葛根素的含量测定,结果见表2. 表1回收率试验结果(n=6) 样品批号含量(nqg/片)RSD(%) 3讨论 3.1检测波长的选择取葛根素对照品适量,加甲 醇制成30m1的溶液,于200,400nm波长下测 定光谱图,在250.30nm处有最大吸收峰,故检测波 长选定为250nm. 3.2回流提取时间的确定本试验根据葛根素的 理化性质,分别称取等量的本品,利用回流提取处 理,比较1.0,1.5,2.0h等不同回流提取时间,结果 不同回流提取时间制备的供试品中葛根素的含量以 60min时提取效果最好,所以选定回流提取1.0h 制备供试品溶液. [参考文献] [1]国家药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准中药成方 制剂(第3册)[S].北京:人民卫生出版社,1991.131 [2]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京:化 学工业出版社,2005.233-234 [3]苏春晖.葛根临床应用[J].时珍国医国药,1999,10(4): 293 [4]巢建国,刘产明.苍葛止泻灵颗粒剂的制备及其质量控制[J]. 南京中医药大学,2001,17(1):28—29 (收稿日期:2010-11-09;修回日期:2011-05-03) (本文编辑金杨红) 55_兰 OO 5 5/5 A一B一 一垃 ?,.,.m,_亘 5\5 ._ 0 0.0