【doc】复方氨酚那敏缓释片释放度测定方法及其体外释药动力学研究

【doc】复方氨酚那敏缓释片释放度测定及其体外释药动力学研究 复方氨酚那敏缓释片释放度测定方法及其 体外释药动力学研究 复方氨酚那敏缓释片释放度测定方法及其体外释药动力学研究 杨金荣,朱或,王润玲,李雅静,张庆伟,赖作刚,张一兰(1天津医科大学药学院,天津 300070;2.天津市太平洋制 药有限公司,天津300381) 摘要:目的建立复方氨酚那敏缓释片释放度测定方法,并评价其体外释药特性.方 法进行体外释放度实验,考察释放介 质对释放度的影响.结果复方氨酚那敏缓释片具有明显的缓释作用,3种主成分的 体外释放均符合一级动力学规律.结论 该缓释片处方合理,达到了预期结果. 关键词:对乙酰氨基酚;咖啡因;马来酸氯苯那敏;缓释片;释放度 中图分类号:R969文献标识码:A文章编号:1001—2494(2008)03—0222—04 StudyonDeterminationofReleaseofFufangAnfenNaminSustained?ReleaseTabletsinVitro YANGJin— rong,ZHUYu,WANGRun.1ing,LIYa-jing,ZHANGQing.wei,LAIZuo.gang,ZHANGYi— lan(1.CollegeofPharmacy,TianjinMedicalUniversity,Tianjin300070,China;2.TianjinPhn册euticnlCo.Ltd,n 300381,China) ABSTRACT:OBJECTIVETostudythedeterminationofreleaserateofFufangAnfenNamin,andevaluatethedrugreleaseprop— erty.METHODSExperimentofreleaserateinvitrowascarriedonandmediumeffectsuponthereleasewereinvestigated.RE- SULTSThetabletshadasustained— releaseprofile.Thereleasepatternofthemaincompositionallfollowedthefirstorderkinet— ics.CONCLUSIONWiththereasonableformulation,thesustained— releasetabletsreachtheexpectedleve1. KEYWORDS:acetaminophen;caffeine;chlorpheniraminemaleate;sustained— releasetablets;releaserate 复方氨酚那敏缓释片是治疗感冒的复方缓释制 剂,其主要成分为对乙酰氨基酚,咖啡因和马来酸氯 苯那敏.由上述3种药物组成的抗感冒制剂在国内 外应用十分广泛,除一般抗感冒作用外,也可用于流 行性感冒的预防和治疗.近年来,国内有该组成的 普通制剂问世…,但缓释制剂释放度的研究笔者尚 未见报道,对缓释制剂进行释放度测定是控制其质 量的重要指标之一. 1仪器与材料 1.1仪器 美国Waters高效液相色谱仪(515双泵型,2847 双通道紫外检测器,控温箱,美国Waters公司Mil— lennium色谱);日本岛津uV一240紫外 分光光度计;GM一0.33隔膜真空泵(天津津腾公 司):电子天平(Sartorius);ZRS一8型智能药物 释放仪(天津大学无线电厂). 1.2试剂与药品 对乙酰氨基酚对照品(批号10018-0107),咖啡 因对照品(批号1215-0104),马来酸氯苯那敏对照 品(批号10047.9904)(中国药品生物制品检定所; 复方氨酚那敏缓释片(天津市太平洋制药有限公 司),批号分别为:030801,030802,030803);甲醇 (色谱纯);其他试剂均为分析纯. 2方法与结果 2.1分析方法的建立 2.1.1检测波长的确立分别精密称取对乙酰氨 基酚,咖啡因和马来酸氯苯那敏对照品约10.0mg, 分别置于3个100mL量瓶中,用水溶解并稀释至刻 度.再分别精密量取上述3溶液5mL,分别置于10 mL量瓶中,加水溶解并稀释至刻度(50mg?L). 将3种对照品溶液分别在190,400nm内扫描,结 果见图1.结果表明,对乙酰氨基酚,咖啡因和马来 酸氯苯那敏在210nm波长处有最大吸收.根据对 乙酰氨基酚,咖啡因以及马来酸氯苯那敏在各波长 处的响应值选210nm作为检测波长. 2.1.2色谱条件色谱柱为Kromasol—CI8 (4.6mm×250mm,5Ixm);流动相为甲醇.水一磷酸 (40:60:0.2)用三乙胺调节pH(3?0.1);流速为1 mL?min,;柱温为35?;检测波长为210nm;进样 量为50L. 作者简介:杨金荣,男,实验师'通讯作者:王润玲,女,教授Tel:(022)23529241E— mail:wangrunling@tijmu.edu.cn PharmJ,2008February.Vo1.43No.3中国药学杂志2008年2月第43卷第3期 图1紫外扫描谱图 一一 对乙酰氨基酚;…一咖啡因r一马来酸氯苯那敏 Fig.1UVSpectmm —— acelaminophen:''一caffeine:,一chh)rpheniraminemaleate 2.1.3线性实验精密称取马来酸氯苯那敏对照 品约45mg,置100mL量瓶中,加人5mL甲醇使溶 解后加水稀释至刻度.另精密称取对乙酰氨基酚对 照品约375mg及咖啡因对照品约22.5mg,置250 mL量瓶中,精密加入上述马来酸氯苯那敏对照品溶 液l0mL,加水适量使溶解后,稀释至刻度.分别精 密量取此溶液0.5,1,2,3,4,5,6mL,置50mL量瓶 中,加流动相稀释至刻度.分别量取上述溶液50 L进样,记录色谱图. 对乙酰氨基酚的回归方程:Y=168l32X+ 45567(r=0.9999);咖啡因的I=旦I归方程:Y=417 297X一29781(r=0.9999);马来酸氯苯那敏的回 归方程:Y:97789X—l410(r:0.9999). 上述结果表明,在此色谱条件下,对乙酰氨基酚 在l5.08,180.96mg?L内,咖啡因在0.90, l0.80mg?L内,马来酸氯苯那敏在0.179, 2.150mg?L内,峰面积与浓度均呈良好的线性关 系. 2.1.4重复性实验取同一样品液,用0.8I-un滤 膜过滤.精密量取续滤液l0mL,置25mL量瓶以 流动相定容.分别量取上述溶液50L,连续进样 6次,以峰面积考察进样精密度,结果对乙酰氨基 酚,咖啡因和马来酸氯苯那敏的RSD分别为 0.39%,0.30%和0.33%.可见,同一样品液连续6 次进样,其峰面积值的相对偏差均小于1.0%, 精密度良好. 2.1.5供试品溶液的稳定性取同一样品液,用 0.8Ixm滤膜过滤.精密量取续滤液20mL,置50 mL量瓶以流动相定容.分别于室温下放置0,l,2, 3,4,5,6,8,10,12,24h,进样测定,结果在室温下放 置24h样品液的峰面积值的变化,对乙酰氨基酚的 RSD:1.66%,咖啡因的RSD:0.70%,马来酸氯苯 那敏的RSD=1.97%,其测定结果RSD均小于2%. 中国药学杂志2008年2月第43卷第3期 表明室温下放置24h溶液比较稳定. 2.1.6回收率实验分别精密称取对乙酰氨基酚, 咖啡因,马来酸氯苯那敏适量,制成含对乙酰氨基酚 2062.5mg?L..,咖啡因125mg?I,,马来酸氯苯 那敏25mg?L的储备液.分别精密量取上述储 备液3,5,10mL各6份,分别置盛有约49.5mg混 合辅料的50mL量瓶中,加适量蒸馏水,超声波振荡 30mill后,以蒸馏水稀释至刻度(分别相当于药物 全部释放时含量测定浓度的30%,50%,100%),用 0.8Ixm滤膜过滤.精密量取续滤液2mL,置5mL 量瓶中,以流动相定容.取储备液同法制成上述3 个浓度的对照溶液.分别取上述样品溶液和对照溶 液50L,分别进样,记录色谱图,按外标法计算回 收率.结果对乙酰氨基酚的回收率为100.18% (RSD:1.67%),咖啡因的回收率为100.07% (RSD=1.14%),马来酸氯苯那敏的回收率为 99.88%(RSD=0.70%),表明3种主成分的回收 率良好. 2.1.7马来酸氯苯那敏检测限的检查马来酸氯 苯那敏的最低检测限为0.9ng. 2.2释放度实验 2.2.1释放度测定方法取本品,照释放度测定法 (《中国药典~2000年版二部附录XD第二法),以蒸 馏水为释放介质,转速为50r?min,,在规定时间 取溶液5mL,用0.8m滤膜过滤,并及时补充同温 度的释放介质5mL.分别精密量取续滤液2mL,置 5mL量瓶中,以流动相稀释至刻度,作为供试品溶 液.另分别精密称取对乙酰氨基酚,咖啡因和马来 酸氯苯那敏的对照品,制成每毫升分别约含对乙酰 氨基酚150Ixg,咖啡因9Ixg和马来酸氯苯那敏1.8 g的对照品溶液.分别取溶液50,进样,于210 nm波长处测定,并记录色谱图,以外标法计算每片 在不同时间的累积释放百分率(Q). 2.2.2释放介质的考察按照"2.2.1"项下释放 度测定方法,分别以蒸馏水,pH6.8的磷酸缓冲液 (PBS),0.01mol?L盐酸溶液作为释放介质,取 样时间分别为0.5,l,2,3,4,5,6,8,10,12h,依法测 定,结果见表l.由表l可以看出,缓释片在以0.01 mol?I盐酸为释放介质释放百分率低于以水为释 放介质的累积释放百分率,因此采用水为释放介质 进行实验. 2.2.3制备重现性考察按照"2.2.1"项下 释放度测定方法,测定3批复方氨酚那敏缓释片的 累积释放百分率,结果见表2. 表1不同释放介质中缓释片释放度结果.%,n=6 Tab.1Releaseratesofthesustained—releasetabletsindifferentmediums.%=6 通过对同一批号6片实验的释放曲线及3批样 品批间释放曲线的测定,经方差分析(F检验)无显 着性差异(P>0.05).表明自制复方氨酚那敏缓释 片的释放度均一性和重现性良好,证明其制备工艺 稳定. 2.3复方氨酚那敏缓释片释放行为的分析 将自制复方氨酚那敏缓释片的累积释放百分率 (Q)与时间(t)分别按零级,一级和Higuchi方程处 理,通过对释放曲线进行拟合方程,结果见表3. 表3拟合方程结果 Tab.3Equationsfittedforoptimalformulation 通过表3可以看出,对乙酰氨基酚,咖啡因和马 来酸氯苯那敏的释放行为基本符合一级动力学方 ChinPharmJ,2008February,Fo1.43No.3 程. 通过3批样品的测定结果可以看出3种成分释 放度的均一性和重现性良好,释放度符合要求. 3讨论 3.1本品是采用水凝胶骨架材料制成的缓释片,遇 水首先在表面润湿形成水凝胶层,使表面药物溶出, 凝胶层继续水化,骨架溶胀,凝胶层增厚,药物可通 过凝胶层向溶出介质扩散,同时骨架水化溶蚀,使药 物释放.处方中水凝胶骨架材料随其用量的增加, 缓释作用增强,释药速度减慢;片剂的硬度也影响释 药速度. 3.2在"2.1.2"色谱条件下,辅料(包括人工牛黄) 对3个主成分的测定无干扰,滤膜对氯苯那敏的测 定会有干扰,因此在进样前滤膜需用流动相进行冲 洗至无杂质峰. 3.3样品液的稀释曾试用水和甲醇,均不理想,后 采用流动相定容,峰形良好,重复性好. 3.4对复方氨酚那敏缓释片在释放介质中的释放 规律研究结果表明,批间释放度重现性良好,制备工 艺稳定;复方氨酚那敏缓释片在12h内保持连续缓 慢释药,其释放规律的研究表明,零级,一级和Higu— , chi方程均较好地拟合了缓释片的释药过程,其中中国药学杂志2008年2月第43卷第3期 液相色谱一质谱联用法测定大鼠血浆中的槲皮素代谢物 陈峰,符乃光,任守忠,魏娜,张俊清(海南医学院药学系,海南省热带药用植物研究与 开发重点实验室,海口571101) 摘要:目的采用液相色谱一质谱联用法鉴定大鼠lJ'服槲皮素单体后血浆中的代谢 产物.方法血浆样品经过2mol?L盐 酸(甲醇一水)水解后,进行色谱分离,采用液相色谱一质谱联用仪检测,大气压电喷 雾离子源(EP1)负离子条件下进行扫描,鉴 定大鼠给药槲皮素(100mg?kg)单体后血浆中代谢产物的结构.结果通过与标准物 紫外谱图比较,结合质谱仪扫描结 果分析,在大鼠给药槲皮素(100mg?kg)单体后血浆中鉴定出槲皮素(m一3【J1.0) 和异鼠李素(m一3l4.9)两种代谢产 物结构.结论采用盐酸酸水解的方法可快速,有效地鉴定出大鼠血浆中槲皮素代谢 产物,为进行含槲皮素中药及其复方的 药动学研究提供参考.. 关键词:槲皮素;异鼠李素;液相色谱一质谱联用法;代谢物 中图分类号:R917文献标识码:A文章编号:1001—2494(2008)03—0225—03 DeterminationofQuercetinMetabolitesinRatPlasmabyLiquidChromatography— MassSpectrometry CHENFeng,FUNai—guang,RENShou—zhong,WEINa,ZHANGJun— qing(DepartementofPharmacy,HainanMedical College,HainanPravincialKeyLaboratoryofR&DoJ'TropicalHerbs,Haikou571101 ,China) ABSTRACT:OBJECTIVETodeterminethemetabolitesofquercetininratplasma'afterano raladministrationbyLiquidChroma— tography—MassSpectrometry(LC— MS),METHODSTheratswereadministratedwithquereetinmonomersolution(100mg.kg) o— ralandthebloodsamplewerecollected.Quercetinandisorhamnetinwereextractedfromratp lasmaafteracidhydrolysisusing2mol. LHCIinaqueousmethon1.Afteracidhydrolysis,theanalytesofinterestwereseparatedonaS UPELCOS1LCcolumn.Themobile phasewasmethonl—aeetonitrile—l%aceticacid(20:30:50)Withaflowrateof0.8mL?min一.ABrukerMassSpectrometryequipped withanAtmosphericPressureIonization— Electrospray(EP1)souFcewasusedasdetectorandwasoperatedinnegativeion mode.RESuLTSQuercetinandisorharnnetinwereidentifiedusingthestandardspectruman dtheresultsofmassspectrometry.i.e. "l/z—}301.0forquercetinandm/—}314.9forisorhamnetin.CONCLUSIONAceticacidhydrolysiswasafastfeasiblemetho dand couldbeusedtoidentifythequercetinmetabolitesinratplasma.Andthismethodcouldbeagui danceforpharmacokineticsstudieupon TraditionalChiBeseMedicines. KEYWORDS:quercetin;isorhamnetin;LC—MS;metobolites 黄酮是广泛存在于植物中的多酚类化合物,这 些化合物中尤其槲皮素这一黄酮醇类化合物具有广 泛的生物活性,比如抗癌,抗氧化,抗炎等.人们日 常饮食中的洋葱,苹果,红酒中就含有大量的黄酮醇 类化合物.流行病学和实验室的研究均表明,黄酮 (主要是槲皮素)可以降低冠心病以及某些癌症如 结肠癌的发病率. 槲皮素等黄酮类化合物也是中药及其复方中的 主要活性成分之一,受到国内学者的关注.实验动 物或人通过口服摄人槲皮素后,槲皮素在血浆中的 物质形式以及代谢产物的情况一直是研究热点.本 实验通过液相色谱一质谱联用技术测定大鼠血浆中 的槲皮素及其代谢产物,弄清槲皮素在大鼠血浆中 的物质形式,主要是为研究含槲皮素等黄酮类成分 一 级动力学方程更好地描述了复方氨酚那敏缓释片 中3个主成分的释放规律和释放机制. REFERENCES [1]BeijingMunicipallleahhBureau.DrugSpee~eationsPromulga一 把dbyBeijing(1996edit)(北京市药品标准)[S].Beijing: ChemicalIndustryPublishingCompany,1996:252-256. [2]Y1NQDeterminationofparacetamol,caffeine,ehlorphenamine inPowderPreparationforcommoncoldbyHPLC[J]JChinClin Med(中华临床医药),2001,2(7):93-95. (收稿日期:20074)1.15) 基金项目:海南省自然科学基金资助项目(30626) 作者简介:陈峰,讲师,硕士通讯作者:张俊清,教授,硕士Tel:(0898)66895337E— mail:junqzhang2004@hotmail.COrll 中国药学杂志2008年2月第43卷第3期 ChinPharmJ,2008February,Vo1.43No.3225?