结肠腺瘤与腺癌p53,c—erbB2蛋白及CEA的表达和意义

结肠腺瘤与腺癌p53,c—erbB2蛋白及CEA的表达和意义 结肠腺瘤与腺癌p53,c—erbB2蛋白及CEA 的表达和意义 ; 针 ? BUII潞差箍uN1v.1998一Z3(2)129 CEA的表达和意义? 持杨凌奇荷霍继荣林礼茂许淑畦. ——_=附属院清化科长41 R7,药.?2 摄宴应用免疫组化法检测15例正常蛄腑粘膜,40制蛄膀腺瘤覆40制蛄肠癌组壤的p53,c~rbB:和 CEA的表达.结果发现:姑肠癌患者p53,c~rbB:覆CEA的阳性表达丰均量着高于腺痞(P<0.O1).p53 阳性表达在不鼻型增生臃癔忘者中,重度量着高于轻度病例(P<O.01)}在蛄膀腺癌忠者中饿分化显着高 于高分化病例(P<0.05)CEA的新型单克隆抗体col一1对蛄肠癌的敏感性和特异性均高,阳性表达率为 85}三个蛋白的同步桂洲有协同性和互补性. )I.睬走 关键调丝墅韭塞;垂垂璺白类;塞壁垫星}免疫组织化学 中国圈书分娄号R735.351 人类癌症的产生与基因改变密切相关,包 括细胞原癌基因的激活和肿瘤抑制基因失活, 同时伴随着一系列形态学的改变].结肠癌是 我国较常见恶性肿瘤之一L2],本文通过检测结 肠正常组织,腺瘤及腺癌中p53,c—erbB.及 CEA蛋白表达,探讨其在结肠癌发生,发展过 程中的意义,为临床结肠腺瘤,息肉的诊治及预 后判断提供依据. 1与 1.1材科(1)标本:为病倒标本,均来自我院1991, 1995年手术切除或活检组织,其中正常锚肠粘膜15倒 (包括健康人结眄粘膜5倒和结眄癌旁组织经病理证 实正常的粘膜10倒),男8倒,女7例.年龄36~68岁, 平均年龄51.8岁;结肠腺瘤4O倒t男24例,女16倒, 年龄27,74岁.平均年龄55.35岁,组织学检查不典型 增生(AHP)轻度18例,中度10例,重度12倒;结肠腺 癌4O倒.男性25例.女性15例,年龄27,76岁.平均 年龄5O.7岁,组织学检查高分化腺癌12倒.中度分 化腺癌19倒.低分化臃癌6例,粘穰腺癌3铡标本经 10福马林固定+石蜡包埋,切片.(2);主要试剂p53 单克隆抗体DO一7和SP试剂盒购自福州迈新生物技 术公司.c.erbB蛋白p185多克隆抗体为美国Dako公 司产品ICEA单克隆抗体Col一1为美国Zymed实验室 赠送IABc试剂盒购自北京中山生物试剂公司. 1.2方法p53免疫组化染色采用链霉索——生物素 (sP)免疫组化技术,操作按试剂盒上说明书进行,当细 胞接出现红色颗粒时定为p53帑性细胞(囤1)}cfbB! 和CEA蛋白免疫组化染色按ABC方法,当胞浆和咆 膜出现棕黄色颗粒时定为c—erbB和CEA阳性细胞 (图2,图3).若p53和CEA检测切片中.阳性细胞> 5为p53或CEA的阳性病倒,切片中c—erbB2阳性细 胞?20为c—erb阳性病倒. 1.3统计学处理采用卡方检验或直接概率法. 2结果 2.I免疫组化结果40倒结肠癌p53erbB: 和CEA蛋白的阳性表达率分别为55(22/ 40),45%(18/40)和85(3~/40)明显高于腺 瘤组20(8/40),17.5(7/40)和35(14/ 40)(均P<0.01).15倒正常结肠粘膜的阳性 表达分别为0/]5,2/15和l/15. 2.2p53,c—erbB2和CEA表达与临床及病理 特征的关系结果见附表.在结肠腺瘤组,重度 AHP腺瘤p53阳性表达率显着高于轻度AHP (P<0.O1);结肠腺瘤组,中,低分化腺癌的 p53阳性率显着高于高分化腺癌(P<o.05). 1997.04-01收稿作者}扬女37岁副教授0省卫生厅青年基垒资助课蠢@崩理科 湖南医科大学.1998.23(2) 将腺癌组已在我院手术的25例进行Dukes’分 期,从A/B期和C/D期p53,c—erbBz及CEA 的阳性表达率所见,两者差异无显着性(P> 0.05). 围1钴肠低分化腺癌p53蛋白表达阳性,接着色sp免疫组化色AX200嘲2结肠高分化腺癌,c-erbB~蛋 白表达阳性,咆浆,咆赓着色ABC免疫组化染色AXZOO霭3结腑中分化骧囊,CEA蛋白表达阳性.胞浆着 色.ABC免疫组化色AX200 啦.1Poolydifferentiatedadenomaca~inomaofcolon.p53proteinpositiveexpr essionstainiaNude1.spimm~o- histochelniealstainJnEA×200Fig2Welldifferent[atedadenomacarcinoma ofcolon.C-erbB2pmtemposidve expressionstainincytoplasmandcytomembr,a~e.ABC d[fferentiatedadenomaca~inomaDfcolon.CEApr~einposhi~eexpression tochtmi~slstals~ngAXZ00 附衰p53,c-erbB和CEA阳性表达与结肠腺瘤, 腺癌临床病理特征的关系 erbBzCEA p53c— i ?与轻度AHP比较尸<0.01@与高分化癌比较P< 0.05’ 2.3p53,c—erbB2和CEA蛋白表达的相互之 问关系结肠腺瘤组p53阳性8倒,c—erbB:阳 性7例,共同表达阳性者仅2例,2例追踪均发 现癌变}结肠癌组p53阳性22例,c—erb阳性 18例,二种蛋白表达均阳性者仅9例,其中中低 分化腺癌7例(Dukes’C期5例,B期和D期各 staiai~AXZOOn2.3Moderate stainL?cytOphsm.ABCimmunohii一 1例),高分化腺癌2例(均属Dukes’B期). CEA在结肠癌组阳性表达率高,因而与p53或 c—erb同步表达阳性者多,20例与c—erbB2同 步阳性,14例与c-erbB2同步阳性. 24p53,c—erbB2和CEA蛋白表达与结骑腺 瘤损后的关系对结肠腺瘤组中的25例患者 进行了3,18月时间的追踪观察,至1996年4 月止发现9例癌变,其中5例为重度AHP,4例 为中度AHP.恶变腺瘤p53,c—erbB2及CEA的 阳性表达率均为33.3(3/9),其中p53和c— erbB2均阳性2例,p53或c—erbB2阳性各1例, CEA阳性3例,三个蛋白表达均阴性2例. 3讨论 本文结果显示从结肠正常粘膜,腺瘤至腺 癌p53和c—erbB蛋白的阳性表达率逐步增高, 且三种不同性质组织之间表达率有显着性差 异,特别是p53蛋白在重度AHP腺瘤的阳性率 高于轻度AHP者,中低分化腺癌及粘液腺癌的 阳性率高于高分化腺癌,提示从结肠正常组织 发展至腺瘤及最终产生恶变过程中有癌基因C一 结肠腺癯与腺癌3erbB唑蛋白及CEA的表选和意义椽桶,等131 erbB和p53的参与作用,p53与腺瘤良性病变 向恶性转化及腺癌的发展过程有密切关系.众 所周知,癌症的产生与细胞过度增殖及细胞凋 亡机制受损害有关.p53是人类所携带的抑癌 基因,正常p53表达增高时,细胞出现三种表 型:无变化,生长停滞在G.期和细胞凋亡].基 因突变后,其抑癌作用丧失,细胞无遏制地增 殖,助长了良性病变向恶性转变.突变后的p53 蛋白构象发生改变,半衰期延长,在细胞中堆积 并能被检测出口].C—erbB原癌基因定位于人 染色体17q以上,编码分子量为185,000的跨 膜糖蛋白,具有酪氨酪蛋白激酶活性,它可能由 染色体易位激活后通过酪氨酸蛋白激酶活性的 增高而致细胞恶变]. 有关激活的原癌基因与失活的抑癌基因在 癌的形成和发展中作用的相互关系,仍未完全 明了.本文结果显示:腺瘤组不典型增生早期, 即轻度和中度AHP时,c—erbB.的阳性率较p53 的高,而在重度AHP时p53的阳性率高于c一 erbB:,该两种癌基因蛋白表达均阳性者仅2 例;结肠癌组尽管p53与c—erbB.各自阳性率较 高.分别为55和45+但两种蛋白表达均阳 性者仅9例(22.5),多为Dukes’C和D期病 例.由此可推测尽管c—erbB与p53均参与了结 肠癌形成和发展过程,但作用机制有异,在癌前 病变如腺瘤时erbB癌基因的作用可能与促 异型增生密切有关,而p53则可能与重度不典 型增生时恶性转变密切相关l结肠癌时两种癌 基因可能通过各自的途径促使癌的进展. 为探讨如何提高结肠癌的早期诊断率,本 文选用癌胚抗原(CEA)作为观察指标之一,但 所用抗CEA单克隆抗体col一1是一个仅与腺癌 组织中CEA反应的新型单克隆抗体].SHI (1994)已证实单克隆抗体col一1不与CEA家族 中其他相关抗原反应,因而对腺癌组织呈特异 性反应本文结果显示:在腺癌组CEA的阳性 率高达85(34/40),腺瘤组CEA阳性表达率 为35(14/40),明显低于腺癌(P<0.05),但 显着高于正常组织6(1/15),(P<0.05).追 踪25例腺瘤的结果表明9例恶变腺瘤中,3倒 是仅有CEA阳性表达.此外本文结果还显示: p53,c—erbB.和CEA同时检测,有一种蛋白以 上阳性表达者达95(38/40),追踪发现的9例 腺瘤恶变的病例中,有4例为p53和/或c—erbB2 阳性表达.这些结果表明,单克隆抗体col一1检 测结肠组织CEA,是一个早期诊断结肠癌的敏 感性高,有一定特异性的参考指标;p53,c-erbB. 和CEA同时检测在反映结肠癌存在的敏感性, 特异性方面有互补和协同作用,对结肠良恶性 病变的定性诊断提供了—个可检测的客观指标. 参考文献 1WalkerC,RobbertsonLJ.MyskowMW.a/.P53ex— D?ioninilo~alanddysplasticbronchialepitheliumand hatungcarcinomas.BrJCancer,1994.70:297—303 2播国宗.曹世植主编.现代胃肠病学.北京科学出版杜, 1994:1274 3董郡主编.病理学.北京:人民卫生出版杜,第二l扳,1996t 483 4ZaktamanisI一GatterK?MortensenN?et口.P53expre~? sloninco[orectaladenomas.AmJPathol,1993.142|87— 93 5CunnamJ,LustIA,SchaidDJ—ela/.ExpressMnotp53 and17palleliclossincolorectalcarcinoma.CancerRes, 1992,52:1974—1980 6Carl~CCMutationofcycleregulatorsbiologicalandclin- icimplicationsforhumanneoplasia.AmJPathol,1995, 147;545--551. 7ParkJB,RhLrnIS,ParkSC,d,.AmplificationeI_ pressioaandrearrangemeatoftheerbB2protooncogenein primaryhumanstomachcarciilonla$CancerRes,1989, 49:8665—8610 8ShizR.TachaD—ItzkowitzSHMonoclo~lamibndyCol一 1t*eactswithrestrictedephopesoEiearcLaoembryonJcand- tochem, study.JHistochemCy- 132湖南医科大学.1998.23(2) Expressionandsignificanceofp53,c-erbB2,CEAproteins incolorectaladenomaandcarcinoma XuYangLinQiheHuoJiyun (Department.jDien{wIntenmlMedicine,TSecond弧”越dHospital,H吼 矾MedicalUmwrMty,chn血410011) Expressionofp53,c-erh,CEAproteinsin15casesofnormatco[orectalmucosa,40ade— uomaand40carcinomaofcolonwerestudiedwithimmunohistochemistry.Thepositiverateof p53,c—erbB:,CEAincolorectalcarcinomasweresignificantlyhigherthanthoseinadenoma.The positiverateOfp53inadenomawithsevereatypicalhyperplasiawashigherthanthatinthemild (,<0.O1),andwashigherincolorectalcarcinomasofpoordifferentiationthanthatinthewell— differentiatedones(P<0.05).ThenoveItypemonoclonalantibodyofCEACol一1hadahigh sensitivityandspecificityforthetissueofcolorectalcarcinomainwhichthepositiveratewas erbB2areinvolveinthetum 85.TheresultsSuggestedthealterationofp53,c— orgenesisandde— velopmentofcolorectalcarcinoma;anddetectionofp53,c—erbB2andCEA proteinsarehelpfulin distinguishingbenignandmalignantpolypsofcolon.’ Keywordscolonicneoplasma{oneogeneproteins;carcinoembryonicantigen;immuno- histoehemitry (上接第128页) DrugResistancestudyanddetectionofmethieillin-- resistantstaphylococci ShuMingxingLiuShuipingYuPing~ (DepartmentofMic5i’】lo,H吼矾MedicalUnlversicy?Changsha41007 曲 MRSAandMRSEweredentiIiedbydetectingoxacillinresistanceof107strainsofstaphy|o— COCCifromclinicaIsources.ThepositiveratesofMRSAandMRSEWere45.2and16.9,re— spectivelyamongthewholenumberofstaphylococciexamined.Antibiotic—resistantstrainswere detectedwithdisksbyKirby—Bauermethod.Al】 MRSAandMRSEstrainsweremulti—resistant. ResistantratesofMRSAandMRSEwerehigherthanMSSAandMSSE.Thepositiveratesof8. 1actamaseproducinginMRSAandMRSEweresignificantlyhigherthanMSSAandMSSE(P< 0.05andP<0.01)respectively.TheseresultsindicatedthatMRSAandMRSEwerethemain pathogensintheclinica1infection.MRSAandMRSEdetectionareimportantfortheearlydiag— nosisandtreatmentofpatientswithinfectivediseases. Keywordsmethicillin—resistantstaphyl0c.ccusaureus(MRSA);methicillin—resistant staphylococcusepidermidis(MRSE);muhidrug—resistance;methicillin —sensitive ?DepartmentofClinicalMicrobiology