清热解毒扶正颗粒抗炎、退热及对C-反应蛋白影响的实验研究

清热解毒扶正颗粒抗炎、退热及对C-反应蛋白影响的实验研究 清热解毒扶正颗粒抗炎、退热及对C-反应蛋 白影响的实验研究 2011年第32卷第3期云南中医中药杂志47 清热解毒扶正颗粒抗炎,退热及对C一反应蛋白影响的实验研究 万启南,曹东,叶勇,李游.,李冰煜.,李映雪,施燎明 (1.云南中医学院第一附属医院,云南昆明650021;2.云南中医学院药理教研室,云南昆明650500; 3.昆明市第二人民医院,云南昆明650200;4.云南中医学院2008级硕士研究生,云南昆明650500) 摘要:目的:观察清热解毒扶正颗粒抗炎,退热及对 C一反应蛋白的影响.方法:(1)建立二甲苯致小鼠耳廓肿胀 模型,用药后分别计算肿胀度,肿胀率,抑制率.(2)建立内毒 素所致高热家兔模型,观察用药后体温变化.(3)了解清热解 毒扶正颗粒对高热家免C一反应蛋白浓度的影响.结果:清 热解毒扶正颗粒对二甲苯致小鼠耳廓肿胀有明显抑制作用; 各剂量组均能明显降低内毒素所致家兔的高热,中剂量组对 内毒素致高热家免的c一反应蛋白有降低作用.结论:清热 解毒扶正颗粒具有抗炎,退热的作用. 关键词:清热解毒扶正颗粒;抗炎;退热;C反应蛋白;实 验研究 中图分类号:R285.5文献标识码:A 文章编号:1007—2349(2011)O3一()()47--03 近年来中医药在外感发热疾病中的作用逐年受到重视, 清热解毒扶正颗粒系云南省中医医院用于治疗外感发热的院 内科研制剂.其处方主要组成为:翼首草,芙蓉叶,鱼腥草,麦 冬,太子参,丹参,生地,丹皮等,具有清热解毒,益气扶正,滋 阴凉血之功效,主治外感发热疗效确切.为进一步及明 确其药理作用,笔者通过该药对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影 响,观察药物的抗炎作用;通过对内毒素致家兔高热模型的影 响,观察该药的解热作用,通过检测内毒素致高热模型家兔 C一反应蛋白浓度的影响,了解该药对炎性介质的影响,旨在 探讨中药清热解毒扶正颗粒的部分药效. 1实验材料 1.1药品清热解毒扶正颗粒:云南省中医医院制剂室提 供,每克颗粒剂含1.26克生药材,批号:20031013;内毒素:天 象一邦定试剂公司产品,批号:1.2880;二甲苯:成都化学试剂 厂,批号:97424;阿司匹林原料药:南京制药厂产品,批号: 910324;阿司匹林:昆明云健制药有限公司生产,批号: 20050765;地塞米松:广东南国药业有限公司提供,批 号:20050506. 1.2实验动物昆明种小自鼠:?级,2O,28g,由昆明生物 制药厂动物科提供,动物合格证号:SCXK滇2005—0010;大 耳白兔:I级,1.8,2.5kg,由昆明生物制药厂动物科提供, 动物合格证号:SCXK滇20050007. 1.3实验器材及设备日本奥林巴斯604全自动生化分析 仪;电子天平:YP3000型电子天平,上海精科天平厂;分析天 平:BS110型分析天平,北京赛多利斯仪器系统有限公司;体 温计;0.8cm打孔器. 2方法与结果 2.1清热解毒扶正颗粒对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响 取小鼠5O只,雄性,体重20~28g,随机分为5组:?对照组, 灌胃给予等体积生理盐水;?阳性对照组,给予阿司匹林原料 药0.5g/kg,灌胃体积0.3mI/10g;?清热解毒扶正颗粒高 剂量组按43.8g(生药)/kg剂量以0.4mI/10g体积灌胃;中 剂量组按26.4g(生药)/kg剂量以0.3mI/lOg体积灌胃;低 剂量组按8.8g(生药)/kg剂量以0.3mI/lOg体积灌胃.连 肺复苏后造成心衰模型形成.千姜水煎液不同剂量组对大鼠 左心室内压最大上升速率,下降速率,左心室内压和心率的影 响无显着性差异.干姜水煎液对急性心衰大鼠心功能的影响 现为:?使心衰大鼠左心室内压最大上升速率和左心室内 压有不同程度提高,与模型对照组比较,个别时间点差异有显 着性意义.提示其有增强心肌收缩性能的作用.?使心衰大 鼠左心室内压最大下降速率有不同程度提高,其中个别时间 点差异有显着性意义.提示其能改善室壁张力,提高左心室 舒张功能,使心肌耗氧量减少,有利于冠脉血流流向易缺血的 心内膜下心肌,从而改善心脏的冠脉循环的作用.?使心衰 大鼠心率次数有不同程度的增加,与模型对照组比较,个别时 间点差异有显着性意义,提示干姜水煎液有加快心率的作用. 结论:干姜水煎液通过增强心肌收缩力,提高左心室舒张功 能,升高左心室内压,加快心率等作用,达到改善大鼠心功能, 缓解心缺血缺氧状态.当心肺功能恢复,血液重新灌注于全 身,即体现为中医的”回阳通脉,温通心阳”作用. 参考文献: [1国家药典编写委员会.中华人民共和国药典(2010版)[M].一部. 北京:化学工业出版社,2010:14. 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(收稿日期:2O1O一1209) 48云南中医中药杂志2011年第32卷第3期 续给药3d,末次给药后1h,于每只小鼠右耳双面涂匀50uL 二甲苯致炎,1h后,处死小鼠,用0.8cm打孔器取下每只小 鼠的左右耳片,用分析天平称重,计算肿胀度,肿胀率,抑制 率.结果见表1. 表1清热解毒扶正颗粒对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响 注:与对照组比较,?P<O.05,?P<O.Ol 试验结果表明,阿司匹林组与对照组比较,差异有非常显 着性意义(P<O.01),说明阿司匹林有非常明显的抑制小鼠耳 廓肿胀作用;清热解毒扶正颗粒高,中剂量组与对照组比较, 差异有显着性意义(P<O.05),说明高,中剂量组均有抑制小 鼠耳廓肿胀作用;低剂量组与对照组比较,差异无显着性 意义. 2.2清热解毒扶正颗粒对内毒素所致高热家兔肛温的影响 取大耳白兔3O只,雌雄兼用,每日测肛温1次,连续2d,使 家兔适应此测量方法并选取合格动物,随机分为5组,即模型 组,阳性对照组,清热解毒扶正颗粒高剂量组,中剂量组,低剂 量组.经预试验测定后,将内毒素致热量定为250ng/kg,取 4mg内毒素,用氯化钠注射液稀释至250ng/mL.试验前1h 测每只家兔的肛温,记为基础肛温T,然后灌胃给药,模型组 灌胃给予等体积的生理盐水;阳性对照组灌胃给予阿司匹林 原料药0.3g/kg,灌胃体积lOmL/kg;清热解毒扶正颗粒高, 中,低剂量组分别灌服21.6g(生药)/kg,14.4g(生药)/kg, 7.2g(生药)/,灌胃体积为10mI/kg.1h后每兔均从耳缘 静脉注射内毒素250ng/kg致热,分别测定内毒素致热后3O, 60,120,180,240,300min时的肛温,将不同时间所测肛温减 去基础肛温t的差值?t作为体温变化的指标.结果见表2. 表2清热解毒扶正颗粒对内毒素所致高热家兔肛温的影响 . 动物/剂量/t/致热岳不目时目段的肛温变化?l/? 绷R. kg-?—?— 一 37,95_+0.182.O3_+O.432.73_ +0.223.03_+0.332.83+_O.462.18?0.491.35~0.39 0.338.92+_0.830.27+_0.22’0.872O.16”0.93+0.39An72_ +O.49An35_ +0.35’O.12+0.12 21.63792_+0.351l23_+0,951.32_+1.17”1.22+1.3O*0. 90+_ 1.23*0.72_ +0.93O.27~O.53 14.437.97+_ O.261.97+_O.352.524_ O.312.50+0.532.08_+0.67”1.67+_0.691.08zO.47 7.23&??n181.70_+0.552.18+_0.44”1.93+O.56*1.78_+0.47?1.37_+0.64?ll27~0.39 注:模型组较,P<o.05,’P<o.O1 试验结果表明,阿司匹林组与模型组比较,差异有非常显 着性意义(P<O.01),说明阿司匹林有非常明显的解热作用,且 解热时问从给药后30min开始持续到300min;清热解毒扶正 颗粒高剂量组与模型组比较,差异有显着性意义(P<O.05), 说明高剂量有解热作用,解热时间从给药后6Omin持续到 300rain;清热解毒扶正颗粒中剂量组与模型组比较,在 180min时间段,差异有显着性意义(P<O.05);清热解毒扶正 颗粒低剂量组与模型组比较,差异有显着性意义(P<O.05), 解热时间从给药后60rain持续到240rain. 2.3对高热家兔c一反应蛋白浓度的影响取家兔36只,随 机分为对照组,模型组,阳性对照组,清热解毒扶正颗粒高, 中,低剂量组,每组6只.空白组和模型组灌胃给予等体积生 理盐水;清热解毒扶正颗粒高,中,低剂量组分别灌胃给予 21.6,14.4,7.2g(生药)/kg,灌胃体积为10mL/kg~阳性对照 组灌胃给予地塞米松1.5mg/kg,体积为10mE/kg.给药1h 后,每兔(空白组除外)均从耳缘静脉注射内毒素250rig/kg致 热,致热30rain后测肛温,肛温升高者于1h后静脉采血,取 静脉血放置于抗凝试管保存,用全自动生化分析仪检测C一反 应蛋白浓度.试验结果见表3. 表3清热解毒扶正颗粒对高热家兔c一反应蛋白浓度的影响 注:与对照组比较,?P<O.Ol 试验结果表明:地塞米松组与对照组比较,差异无显着性 意义(P>o.05),但对c一反应蛋白浓度有一定降低趋势,可 能是样本数较少,有待进一步研究;清热解毒扶正颗粒高剂量 组与对照组比较,差异无显着性意义(P>0.O5),但有一定降 低趋势;清热解毒扶正颗粒中剂量组与对照组比较,差异有非 常显着性意义(P>0.01),说明中剂量有非常明显的降低 C一反应蛋白浓度的作用;清热解毒扶正颗粒低剂量组与对照 组比较,差异无显着性意义(P>O.05). 3小结 清热解毒扶正颗粒高剂量和中剂量组对二甲苯所致小鼠 耳廓肿胀有显着抑制作用,其肿胀抑制率分别达到35.34和 38.91%,说明该药有较好的抗炎作用;清热解毒扶正颗粒高 剂量,中剂量和低剂量组对内毒素所致家兔高热有解热作用, 各剂量组起效时问和持续时间不同,高剂量在给药60min后 开始起效,药效持续到300rain;中剂量组在给药后180min 时间段有一定的解热作用;低剂量组在给药60min后起效, 药效持续到240rain.C一反应蛋白是炎症,感染,组织损伤, 坏死和恶性肿瘤的一个重要标志.c,反应蛋白在正常机体 中浓度很低,其浓度的升高提示炎症,感染事件的发生,清热 解毒扶正颗粒中剂量对内毒素所致高热家兔的c一反应蛋白 浓度的降低有非常明显的作用,但其他剂量组和地塞米松组 对c一反应蛋白浓度只有一定的降低趋势,可能与样本数较 少有关,有待于进一步研究. 4讨论 外感高热是内科急症常见多发病证之一,具有起病急,变 2011年第32卷第3期云南中医中药杂志49 附子总生物碱中乌头碱,新乌头碱,次乌头碱在大鼠体内的药动学研究 陶长戈,李文军,彭成 (成都中医药大学药学院,四川成都610075) 摘要:目的:研究口服附子总生物碱后乌头碱,新乌头 碱,次乌头碱在大鼠体内的药动学特征.方法:口服给予大鼠 附子总生物碱后,断尾取血,采用甲醇沉淀冷冻干燥法处理血 浆样品.采用HPIc—Ms/MS分析方法检测乌头碱,新乌头 碱,次乌头碱的血药浓度.药时数据用中国药理学会3p97药 代动力学程序计算主要药动学参数.结果:本实验建立的用 于检测大鼠血浆的HPIc—MS/MS分析方法,其灵敏度高, 专属性强,稳定性好,能很好的符合生物样品分析的要求.乌 头碱,新乌头碱,次乌头碱的药动学曲线经拟合均符合口服给 药的二室模型.乌头碱主要药动参数:T12.一3.32? 1.56min,%/2B--886.61~242.14min,AUC=86.558--t-_9.462 mg?I一?min,Tk一6.989?1.546min,(一83.549? 10.459ng?mI.新乌头碱主要药动参数:Tl2.一15.4989 ?4.8712min,Tl—l255.808?684.891min,AUC一 297.212?74.642ng?mI_.?rain,Tk一15.782? 7.541min,一202.983?30.781ng?mL.次乌头碱主 要药动参数:Tl一125.482?51.654min,Tl2口一1007.757? 349.485min.AUC一241.206?9.147ng?mI?min, Tk一16.765?5.478min,一164.302?20.891ng? mI.结论:灌胃给予附子总生物碱后乌头碱,新乌头碱,次 乌头碱在大鼠体内的过程符合口服二室模型. 关键词:附子;附子总生物碱;鸟头碱;新乌头碱;次乌头 碱;HPIC—MS/MS;毒代动力学 中图分类号:R285.5文献标识码:A 文章编号:l()()7—2349(2011)03--0049--04 乌头类有毒中药如川乌,草乌,附子等是中医临床常用的 有毒中药.已有研究表明乌头类有毒中药具有强心ll,,抗 化快,传变迅速的特点,多属西医的各种感染性疾病.”六淫” 或”六邪”,是它主要致病因素.其病理特点初时多属邪盛而 正气抗御力亦强形成高热,其后热盛使津液耗损,劫妁营阴, 直至动血,耗血,终至阴伤气耗[.l1J医学认为正气虚是发病 和迁延的内在原凶.正气虚,则邪乘虚而人,正气实,则邪无 自入之理,正气实,则正能敌邪病能自愈,而正气决定于体质, 体质的强弱决定着正气的虚实.所以疾病的发生和发展虽然 与病邪的质与量有关,更取决于患者的体质,即正气的虚 实L2.据此本院研制了清热解毒扶正颗粒,其处方主要组成 为:翼首草,芙蓉叶,鱼腥草,麦冬,太子参,丹参,生地,丹皮 等.清热解毒扶正颗粒治疗外感高热之所以能取得较好疗 效,从中医角度来说,它不仅具有清热解毒功效,更有益气扶 正,滋阴凉血之功能.现代中药学研究其能清除,中和,降解 内毒素,调整炎性介质的失控性释放,提高和保护机体的免疫 功能有关.藏药翼首草具有清热解毒,祛风湿,止痛等作用, 有研究表明对急性炎症的渗出和水肿有明显的抑制作用,因 此具有显着的抗炎活性[={].麦冬中的麦冬皂苷及麦冬多糖可 显着增加小鼠器官胸腺,脾脏重量,并激活小鼠网状内皮系统 的吞噬功能,提高血清溶血素抗体水平,增加机体的免疫 力L4.太子参多糖具有抗疲劳,抗应激和增强机体免疫功能 的作用.丹参有效成分丹参酮,丹酚酸类化合物有改善血 液循环,抗菌和抗炎,抗氧化,抗凝血和细胞保护等作用:. 另外鱼腥草,芙蓉叶等不仅具有抗病毒,抗菌,抗炎等功效,且 均有调节免疫功能的作用.清热解毒扶正颗粒在药效学试验 中证实其具有明显的退热抗炎作用且作用持久,并有一定的 降低c一反应蛋白的作用. 通过本次动物实验结果表明:清热解毒扶正颗粒高,中剂 量组均有抑制小鼠耳廓肿胀作用,有效率较对照组更加显着; 清热解毒扶正颗粒高,中,低剂量的解热作用较对照组均有显 着效果;对于C一反应蛋白浓度的趋势来说,清热解毒扶正颗 粒中剂量组与对照组比较,差异有非常显着性意义,说明中剂 量有降低c一反应蛋白浓度的作用,但高,低剂量与对照组比 较,差异均无显着性意义.综上所论,清热解毒扶正颗粒药效 学作用确切,值得推广应用. 参考文献: [1崔乃杰,石学敏.中西医临床急症学[M].北京:巾国中医药出版 社,1998:200~203. 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