高效液相色谱法测定断血流胶囊中醉鱼草皂苷Ⅳb的含量

高效液相色谱法测定断血流胶囊中醉鱼草皂苷Ⅳb的含量 高效液相色谱法测定断血流胶囊中醉鱼草皂苷?b的含量 【摘要】 目的建立高效液相色谱(HPLC)法测定断血流胶囊中醉鱼草皂苷?b的含量。方法采用反相高效液相色谱法，色谱柱为Hypersil BDS C18(4.6 mm×200 mm，5 μm)，流动相为甲醇-水(80?20)，检测波长为250 nm，流速为1 ml?min-1。结果醉鱼草皂苷?b在3.17,3 1.7 μg/ml范围内峰面积与其浓度呈良好的线性关系，平均回收率为99.4%(RSD= 1.2%)。结论此法简便、准确，可作为断血流胶囊含量测定的方法。 【关键词】 断血流胶囊; 醉鱼草皂苷?b; 高效液相色谱法 Abstract:ObjectiveTo establish a method of HPLC for determination of Buddlejasaponins ?b in Duan Xueliu Capsules.MethodsThe RP HPLC method was used.The Sim pack was Hypersil BDS C18(4.6 mm×200 mm,5μm).The mobile phase was methanol water(80?20) and the detection wavelength was 250 nm. The flow rate was 1.0 ml?min- 1.ResultsThe calibration curves were linear in the range of 3.17,3 1.7 μg/ml for Buddlejasaponins ?b .The average recovery of Buddlejasaponins ?b was 99.4%(RSD= 1.2%).ConclusionThe method is simple ,accurate and can be used for determination of Duan Xueliu Capsules. Key words:Duan Xue Liu Capsules; Buddlejasaponins ?b ; HPLC 醉鱼草皂苷?b又名断血流皂苷A，断血流胶囊原质量中采用薄层扫描法测定其在制剂中含量,1,，此法由于杂质干扰，薄层色带颜色深，结果重现性差,2,。本文作者尝试采用文献方法,2,4,测定断血流胶囊中的醉鱼皂苷?b的含量，并进行方法学验证。 1 仪器与试药 高效液相色谱仪(岛津LC 10AT，检测器SPD 10A，浙大N 2017软件)，数控超声波清洗器(KQ 300DE型，昆山市超声仪器有限公司)，分析天平(德国塞多利斯GENIUS210型);断血流胶囊(江苏晨牌药业有限公司生产，规格: 0.35 g/粒，批号050529，050610;自制，规格: 0.35 g/粒，批号050901，050902，050903)，醉鱼草皂苷?b .(断血流皂苷A)对照品(中国药品生物制品检定所提供，含量测定用，批号110782 201701)，甲醇(色谱纯)，其他试剂均为分析纯。水为重蒸水。 2 方法与结果 2.1 色谱条件色谱柱为C18(大连依利特Hypersil BDS C18，4.6 mm×200 mm，5 μm);流动相为甲醇-水(80?20);检测波长为250 nm;流速1 ml/min;柱温为室温;灵敏度0.04 AUFS。 2.2 系统适用性实验在上述色谱条件下，精密吸取醉鱼草皂苷?b 对照品溶液及供试品溶液各20 μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图(见图1,2)。在该色谱条件下，供试品色谱中在与醉鱼草皂苷?b 对照品色谱相应的保留时间位置上有相应的色谱峰，理论板数按醉鱼草皂苷?b 峰计算，对照品为2619，供试品为4737，主峰和杂峰之间的分离度均大于 1.5，符合《中国药典》要求，规定理论板数按醉鱼草皂苷?b 峰计算不得低于2017。 在上述色谱条件下，精密吸取线性验证中序号为4的对照品溶液20 μl，注入液相色谱仪，连续进样操作5次，醉鱼草皂苷?b 峰面积RSD值 1.9%，对照品进样重复性符合《中国药典》要求。 2.3 专属性验证按照工艺，制成不含断血流的阴性样品，同供试品溶液制备法制备得阴性样溶液。在上述色谱条件下，精密吸取阴性样品溶液20 μl，注入液相色谱仪，记录色谱图(见图3)。在该色谱条件下，在与醉鱼草皂苷?b 保留时间相同的位置未出现色谱峰，表明其它成分对醉鱼草皂苷?b 的测定无干扰，方法的专属性符合要求。