白芍总苷微孔渗透泵片中芍药苷的含量测定

白芍总苷微孔渗透泵片中芍药苷的含量测定 白芍总苷微孔渗透泵片中芍药苷的含量测定 【摘要】 目的 建立用RP HPLC法测定白芍总苷微孔渗透泵控释片中芍药苷含量的方法。方法 采用Diamonsil C18色谱柱(5 μm,250 mm×4.6 mm) ，以甲醇 水 磷酸(体积比33?67?0.2)为流动相，检测波长230 nm。结果 芍药苷质量浓度在20,100 μg/mL范围内线性关系良好(r,0.9995)，平均加样回收率100.6,(n,6)。结论 本法准确、简便、专属性强，可用于白芍总苷微孔渗透泵控释片的质量控制。 【关键词】 高效液相色谱法 白芍总苷 芍药苷 微孔渗透泵控释片 Abstract:Objective To establish a RP HPL method for determination of paeoniflorin in controlled porosity osmotic pump tablets of total glucosides of paeony. Methods A Diamonsil C18 colum (5 μm, 250 mm×4.6 mm) was used by using methanol water phosphate(33?67?0.2), as mobile phase. The detection wavelength was 230 nm. Results The linear range was 20,100 μg/mL (r=0.9995). Conclusion The method is convenient, accurate and specific, which could be used for the quality control of total glucosides of paeony controlled porosity osmotic pump tablets. Key words: paeoniflorin; total glucosides of paeony; controlled porosity osmotic pump tablets; HPLC 白芍总苷(total glucosides of paeony ，TGP)为白芍干燥根中提取的有效成分,1-2,，芍药苷是其中的主要有效成分，占总苷的70,以上。白芍总苷具有多种生理及药理作用，能多途径抑制自身免疫反应，对炎症免疫性疾病疗效很好，还具有保肝、止痛功效,3-4,。市售白芍总苷胶囊主要用于治疗风湿性关节炎，系统性红斑狼疮，效果好，副作用小，但每日需服2,3次，每次2粒，长期使用剂量大，还具有腹泻的副作用。将白芍总苷制成12 h控制释放的微孔渗透泵控释片，可以减少病人服用剂量，降低副作用发生率，提高药物的安全性和稳定性，获得良好的治疗效果,5,。TGP微孔渗透泵控释片国内尚无报道，为有效的控制产品质量，本文用RP HPLC法测定该制剂中芍药苷的含量，本方法专属性强、准确、简便。 1 仪器与试药 高效液相色谱仪: LC 10ATVP 泵，SPD 10AVP紫外检测器(日本SHIMADZU公司);色谱工作站: HW 2017(南京千谱软件有限公司)。芍药苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号110736-201727);甲醇为色谱纯，水为超纯水;其他试剂均为分析纯;TGP微孔渗透泵控释片(广东药学院药剂教研室提供，批号070622，070626，070627，规格 150 mg/片)。 2 方法与结果 2.1 色谱条件 色谱柱: Diamonsiol C18色谱柱(5 μm,250 mm×4.6 mm);流动相: 甲醇 水 磷酸(体积比33?67?0.2);流速: 1 mL?min-1;温度: 室温;检测波长: 230 nm;进样量: 10 μL。 2.2 溶液的制备 2.2.1 对照品溶液 称取经五氧化二磷减压干燥24 h的芍药苷对照品5 mg，精密称定，置25 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。 2.2.2 供试品溶液 取本品10片，除去薄膜衣，精密称定，研细，取约0.1 g，精密称定，置100 mL量瓶中，加甲醇适量，超声处理20 min，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液2 mL, 置10 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。 2.2.3 阴性样品溶液 按处方组成，取除白芍总苷外的其他成分，按工艺要求，制成不含白芍总苷得微孔渗透泵控释片，按“2.2.2”项下的要求操作，即得。 2.3 系统适用性及专属性试验 按“2.1”项下色谱条件，取对照品溶液，重复进样6次，RSD为0.9,，供试品溶液进样，芍药苷的保留时间约为13 min，理论塔板数不低于3 500，与最近峰的分离度为3.3，拖尾因子 1.05，从图1可以看出，TGP微孔渗透泵控释片和其他组分分离良好，且无阴性干扰，专属性好。 图1 空白辅料(A)、芍药苷对照品(B)和白芍总苷(C)的色谱图(略) Fig.1 HPLC chromatograms of negative control (A), paeoniflorin standard substance (B) and total glucosides(C) 2.4 线性关系考察 取经五氧化二磷减压干燥24 h的芍药苷对照品约10 mg，精密称定，置50 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，分别吸取 1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL于10 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，配制浓度分别为20，40，60，80，100 μg/mL，按“2.1”项下的色谱条件，依次进样10 μL，测定峰面积，以峰面积(A)为纵坐标，对照液质量浓度(ρ)为横坐标绘制标准曲线，回归方程为A, 1.25×10-4ρ- 1.2567，r,0.9995。结果表明在20,100 μg/mL范围内呈良好的线性关系。