【doc】血浆雌二醇,孕酮与外周血白细胞雌激素受体的相关性研究

【doc】血浆雌二醇,孕酮与外周血白细胞雌激素受体的相关性研究 血浆雌二醇,孕酮与外周血白细胞雌激素受 体的相关性研究 .AcadJSlg97Fr18(1) 勺—7 血浆雌二醇,孕酮与外周血白细胞雌激素受体的相关性研究 隋龙张令浩杨云纺刘志民V谭雯林朗己7,7,—一—_——一 摘要目的:探讨外周血白细胞雌激素受体(ER)在月经周期的变化规律以及与血浆 雌二醇(E),孕酮(P)的相关性.方藩: 应用放射配体结合法测定了18例月经周期正常的育龄妇女外周血白细胞ER台 量的变化并与血浆E,P浓度变化进行相关 性分析.瞎果:外周血白细胞ER含量与子宫内膜细胞ER含量及血浆E浓度在月 经周期中的变化规律一致血浆E对白 细胞ER有正向调节作用,呈显着正相关(0789,P<0.001);血浆P对白细胞ER有 反向调节作用,呈显着负相关(r一 0.347,P<O.O1)瞎论:血浆E,P对外周血白细胞ER及于宫内膜细胞ER的调节规 律一致;外周血白细胞ER测定可间接 反映子宫内膜细胞ER的变化,具有临床应用价值. 关键词受体,雌激素,白细胞;雌二醇{孕酮 中国图书资料分类法分类号R71l_51 Thestudyofcorrelativitybetweenserumestradiol,progesteroneand estrogenreceptorofperipheralbloodwhitecells SuiLong.ZhangLinghao?YangYunfang,LiuZhimin,TanWen,LinLang(Departmentof ObstetricsandGynecology,ChangzhengHospital,SecondMilitaryMedicalUniversity. Shanghai.200003) AbstractObjective:Tostudythechangeofestrogenreceptor(ER)contentinhumanperiphera lblood whitecells(PBWC)duringdifferentphasesofmenstrualcycleandthecorrelativitybetweenconcentrations ofserumestradiol(E,),progesterone(P)andERcontentinPBWC.Methods:ERcontentinPBWCwas measuredbyradioligandbindingassayin18fertilewomenwithnormalmenstrualcycle.Theanalysisof correlativitywascarriedOutbetweenconcentrationsofserumE2,PandERcontentinPBWCduringfollic ular,periovulationandmid— lutealphases.Results:ThechangeofERcontentinPBWCinnormalmenstru— alcycleparalleledtoERcontentinendometriumandserumE2concentration.ThecapacityofERinPBWC wasup— regulatedbyserumE2,andthecorrelativitybetweenthecapacityofERinPBWCandserumE: wassignificantlypositive(r0.789,P<O.001).InContrast,thecapacityofERinPBWCwasdown—regu latedbyserumPinlutealphase,andserumPwasnegativelycorrelatedwithERcontentinPBWC(r一 一 0.347.P<0.01).Conclusion:ThechangeofthecapacityofERinPBWCcansignificantlyindicatethe changeofERcontentinendometrium.ThemethodformeasurementofERcontentnPBWChasbeeni- dentifiedtobebetterthanthatintraditionalway. Keywordsreceptors,estrogen—whitebloodcells;estradiol;progesterone 子宫,阴道等靶组织均存在雌激素受体(ER), 其含量变化受卵巢内分泌调节.8o年代以来.人们 发现许多传统概念的非靶细胞"内也存在ER.如 白细胞,胸腺细胞等【,这些非靶细胞内ER是否 也和靶组织中ER一样受卵巢内分泌的周期性调 节,尚未见报道.本研究以放射配体结合法测定正常 月经周期妇女外周血白细胞ER含量的变化规律并 分析了血浆雌二醇(E),孕酮(P)与白细胞ER的相 关性. 1材料和 1.1试剂6,7_sH—E.一17fl(.HE.,英国放化中心 产品).比活度173TBq/mmol,放化纯度>97. 17~-E.P(天津九鼎生物医学制品有限公司).Dex— tranT一500,TritonX一100(英国放免中心产品). 1.2主要试剂配制磷酸盐缓冲液(PBS):6.7 mmol/LKH2PO{.6.7mmol/LK2HPo{.150 作者单位第=军医大学长征医院妇产科.海.200003;? 第二军医大学长征医院内分珏辩 一—T—T—?不一 第军医大学1997Febl18-73? mmol/LNaCl,pH7.4.Tris—NH'CI{Tris2.06g, NaC17.47g,加水溶解,用2mo1./LHC1调节至 pH7.4,定容至1000ml.闪烁液:2,5-二苯基恶唑4 g,1.4一双一5苯基恶唑基2]苯0.4g,TritonX一 1O0200ml,二甲苯800ml. 1.3研究对象与标本收集受试对象18名,均为 健康育龄妇女.年龄24,43岁,平均(31.8士7.8) 岁,月经周期正常,B超检查无子宫,附件器质性病 变并证实排卵.分别于滤泡期(7,8d),围排卵期 (13,16d)和黄体期(21,22d)晨6:30,8:30 抽血检测外周血自细胞ER含量及血浆E,P浓度. l_4人外周血自细胞悬液的制备按文献[33法回 收白细胞.以pH7.4PBS将白细胞调成(0.6, 3.o)×10/ml悬液.分离结果检验:自细胞回收率 (61.2?5.8);自细胞存活率(96.3?2.2);悬液 内红:白细胞比例为(0.034?0.007):1. 1.5白细胞与H—特异结合的测定测试管和 非特异结合管中各加入.H—E5gl(--点分析法用1 nmol/'L),非特异结合管中另加非标记E5pl(为 HE的500倍)后,于两管中分别加入白细胞悬液 500l,37C孵育1h;用0,4CPBS中止反应,离 心2000r/rain×5min,沉淀以0,4?PBS2ml冲 洗3次并混匀,再次离心后弃上清以去除游离甾体, 试管倒嚣30min,然后加0.1ml无水甲酸.沸水煮 10min,待细胞消化后加4ml闪烁渡,用美国Beck— maI1公司LS5000CE液闪仪计数.Scatchard公式 计算.H特异结台量(Rs.位点/细胞)方法学分 分成4份同时测 析:(1)方法准确性:同一份血样品, 定,其变异系数(cV)为(3.9?1.9),表明检测结 果重复性好.(2)相关分析:在(0.6,3..)×10/ml 细胞浓度时,.H?特异结合量与自细胞数量间呈 非常显着的正相关(r:0.89,P<0.01). 1.6E.,P测定采用放免法,天津九鼎生物医学 制品有限公司提供药盒.批内CV:E为4.0.P为 5.5;批间CV:E,P分别为8.5,9.5和 9.0,9.5. I.7统计学处理测定数据以t检验,方差分析和 直线相关分析进行处理. 2结果 2.1白细胞ER及血浆E和P的含量变化外周 血白细胞ER含量在滤泡期,围排卵期,黄体期均有 规律性变化(附表).血浆E浓度于围排卵期形成高 峰,依次为:围排卵期>黄体中期>滤泡期;血浆P 浓度于黄体中期达峰值,依次为:黄体中期>雨排卵 期>滤泡期,各期差异显着(P<O.01);外周血白细 胞ER含量的变化规律为:围排卵期(508,878位 点/细胞)>黄体中期(502~760位点/细胞)>滤泡 期(496~606位点/细胞),各期差异显着;与围排卵 期相比P<0.o1;但黄体中期与滤泡期相比P< 0.05. 附表血浆E,P浓度与白细胞ER含量 TabConcentrationsof~ernlllE,PandERcontentInPBWC (n一18,;?) Phase s…岛SePER (/pg-mr)(/~/ng?ml)(site/cel1) …P<0.001ER0.789I??P<0.o15ER 一0.347;??P<0.O1ER一0691 2.2血浆E:与P浓度和白细胞ER含量的相关分 析血浆E,P浓度和白细胞ER含量于滤泡期,围 排卵期,黄体期的均值分别作相关分析,发现血浆 E,P浓度分别与自细胞ER含量间呈线性相关关 系.血浆E浓度与白细胞ER含量间呈非常显着正 相关(r=0.789,P<0.001),血浆P浓度与白细胞 ER含量间呈显着负相关(r一一0.347,P<0.01). 3讨论 Jensen等于1962年首先证实子宫,阴道中存 在ER.此后大量实验证实雌激素的许多生理作用 都是由ER介导的.ER在动物体内的分布远远超出 经典靶组织"的范围,几乎所有被研究过的各种组 织中都检出ER的存在.具有抗核辐射和升 高自细胞的作用_6],它还能直接影响自细胞的某些 生理功能[,参与人体免疫系统的调节[8,93等.传统 组织ER的检测方法均不同程度地具有创伤性,如 手术标本,活检,诊刮等,重复性差,不利于临床应 用. 组织受体研究已经证实女性子宫内膜细胞 ER,孕酮受体(PR)含量随月经周期的不同阶段而 改变.排卵前血浆E.浓度和子宫内膜细胞中 ER,PR含量的变化是同步的.ER,PR含量于黄体 期逐渐下降,可能是由于黄体期血浆P浓度较高, 有对抗E的生理作用,呈反向调节,降低ER的合 成.故血浆与靶组织中ER,PR呈正相关,黄体 期血浆P与ER,PR呈负相关.但血浆E,P浓度与 "非靶细胞"白细胞内ER的相关性尚未见报道. ?74?第军大学1997Feb;I8(1) 本研究结果首次证实月经周期正常的育龄妇女 血浆E与外周血白细胞ER(Rs,位点/细胞)呈非 常显着正相关(r一0.789,P<0.001);黄体期血浆P 浓度与白细胞ER含量呈显着负相关(r一一0.347. P<O.01),提示"非靶细胞外周血白细胞ER对血 浆E:,P的调节反应与"靶细胞"一子宫内膜细胞 ER一致;而白细胞ER含量与子宫内膜细胞ER含 量及血浆E浓度的周期性变化规律亦一致,故认为 外周血白细胞ER含量同样受卵巢内分泌的周期性 调节.可间接反映子宫内膜细胞ER含量的变化. 研究结果还显示白细胞ER含量在滤泡期处于 一 定水平,排卵前随卵巢分泌增多,白细胞ER 含量开始上升.于近排卵期(血浆峰值时)迅速上 升而形成高峰;黄体期因血浆E:浓度下降及血浆P 的反向调节作用+白细胞ER含量逐渐减少. 外周血白细胞ER测定具有检测结果可靠,取 材方便,无刨伤,重复性好等优越性,可作为子宫内 膜诊刮,活检等具有创伤性组织学ER检测的替代 方法运用于临床生殖医学研究. 参考文献 WeustenJJAM.B[ankensteinMA.Gmefig—MeytingFHJ"d 第二军医上学I997FebI】s【1):74 Presenceofestrogenreceptorsinhu】】IanMoodmononuclearcells andtbymoeytesActaEndocrino[(Copenh).1g86;112f2)l409 2Dane[L,SouwelneG,Monlerjc"a1.Specificestre~genbinding sitesinhumanlymphoidceilsandthymicce【【日JSteroidgioebem, 19g3I18(2):559 3田英,棣仁宝^白细胞糖皮质触素受体的测定方法和临床研 究中华核医学杂志,1983;3(1)27 4JensenEV,JacobsenHI.BasicguidesIothemechanismofestr0_ genactionRece~tProcHormRes,1962I18(1)}387 5WadaK.hohT,NakagawaM".Estrogenbindingsitesinpe riphera[b【【x】dmonocytesandeffectsofdana.[.ntheirsitesrn ~4troGenPharmaco1.1992I23(4)693 6吴增树,李国光,朱蔚精等.D高雌酚勇Il一3,醋酸醋对急性放射病的 防治.中华放射医学与防护杂志,1982}2'6)1 7FujtmotoJ,HorlMtItohT"alDanazo[decreasestranscription ofeslrogenreceplorgeneinhuman…0cvtes.GenPharmaco[. 1995I26(3)}507 8FoxHSrB0ndBL.ParslowTGEstrogenregulatestheIFN7pro motor*Jlmmuno/,1991;146f2)4362 9AthreyaBH,RaffertyJH,Sehga【GS,a1.Ad?hyp0physeaI andsexhormonesinpediatricrheumaticdiseases.JRheumato[. 1903?20(4):725 10牛恩美.蔡根生.唐振华.116例正常月经厨期妇女宫内膜咆浆 雌孕融翥受悻古量的研究生殖避孕,1984;4(2):33 (1996—05—3O收稽.1996一10—30修回) (车史编辑沈志超) 应用PCR检测原发性肝癌患者外周血中CD44vmRNA的临床意义 刘鹏飞吴孟超陈汉钱光相傅继梁 我们通过台理的PCR引物设计,采用套式PCR方法检 测丁l5例原发性肝癌患者术晨外周静脉血液中游离肿瘤细 胞CD44vmRNA表达情况(此15例患者的新鲜肝癌切除 标本CD44vmRNA表达均为阳性),并检查了与侵袭转移相 关的病理指标(肿瘤包膜穿破,踺乏;门静脉瘟挂;瘤周卫星 灶),同时结台近2年(20~22十月)随访的13例病例情况, 研究了检测外周血CD44vmRNA表达的I1缶床意义结果发 ,阴性表达4例,前 现13例随访回报的病例中阳性表达9例 者侵袭转移病理指标重于后者:复发率前者(100)高于后 者(25,P<0.005);生存率前者(儿.1l)低于后者 (75,P<0.05).表明检测外周血液中CD44vmRNA的表 达能够作为原发性肝癌患者的鉴别诊断及预测.监洌其复 发的辅助手段. 关键词聚合酶链反应;肝肿瘤;细胞粘附分子 中国圉书资料分类法分类号R735.704 (1996—07—19收穑.1996—1'3--12修同) (本文编辑刘跃) 作者单位第_=军医大学东疗肝胆补科医院.『悔.200433;? 第二年医上学基础医学部生物学教研室 我校长海医院刘青乐主治医生赴意参加国际高气压医学大会 第十二届国际高气压医学大会,欧洲水下暨高气压医学大会于l996年9月4日至8日在意大利米兰召开我校长海医院 高压氧舱刘青乐主治医生赴意参加台议,其撰写的论文《高压氧对荷瘤鼠免疫功能的作用》是国内唯一一篇大会发言的论文. 通过交流.各国与会代表对我校30多年来在高气压医学和高压氧治疗方面所取得的成绩表示出极大的兴趣 (长海医院心血管内科供稿)