Core苏木素染色液Core苏木素染色液
简介:
苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称HE染色,是病理学和组织学最常用的一种染色方法。苏木精为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的主要成分是DNA,在DNA的双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。
Leagene Core苏木素染色液是一种化学氧化成熟的明矾苏木素,主要由苏木精、硫酸铝钾、甘油等组成。染色液中苏木精含量量小,无氧化膜形成,对细胞核染色很清晰,不着...
Core苏木素染色液
简介:
苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称HE染色,是病理学和组织学最常用的一种染色
。苏木精为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的主要成分是DNA,在DNA的双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。
Leagene Core苏木素染色液是一种化学氧化成熟的明矾苏木素,主要由苏木精、硫酸铝钾、甘油等组成。染色液中苏木精含量量小,无氧化膜形成,对细胞核染色很清晰,不着染胞质和纤维成分,属进行性染色,故染色后可以不用盐酸乙醇分化,主要用于复染细胞核。
染色原理:
1、 细胞核染色的原理:
苏木素为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA,在DNA双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。
2、 细胞浆染色的原理:
伊红是一种化学合成的酸性染料,在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质,为两性化合物,细胞浆的染色与染液的pH值密切相关。当染色液pH值在胞浆蛋白质等电点(4.7~5.0)以下时,胞浆蛋白质以碱式电离,则细胞浆带正电荷,就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子,与胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合,使细胞浆着色,呈现红色。
3、 分化作用:
染色后,用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去,这个过程称为分化作用,所用的溶液称为分化液。在HE染色中常用1%盐酸乙醇作为分化液,因酸能破坏苏木素的醌型结构,使组织与色素分离而退色。大多数组织经苏木素染色后,必须用1%盐酸乙醇分化,使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去,再进行伊红染色,才能保证细胞核与细胞浆染色的分明。
4、 返蓝作用:
分化之后,苏木素在酸性条件下处于红色离子状态,呈红色;在碱性条件下处于蓝色离子状态,呈蓝色。组织切片经酸性乙醇分化后呈红色或粉红色,立即用水除去组织切片上的酸而中止分化,再用弱碱性水使苏木素染上的细胞核呈现蓝色,这个过程称为返蓝作用或蓝化作用。另外用自来水浸洗也可使细胞核返蓝,但所需时间较长。
组成:
编号
名称
DH0007
DH0007
Storage
Core苏木素染色液
100ml
500ml
RT 避光
使用说明书
1份
自备材料:
1、盐酸乙醇分化液
2、蓝化液,如稀氨水、碳酸锂溶液等
3、系列乙醇
4、伊红染色液
5、4%多聚甲醛
操作步骤(仅供参考):
(一)石蜡切片染色
1、 切片脱蜡至水
1 二甲苯作用。
2 (可选)无水乙醇作用。
3 95%的乙醇
4 90%的乙醇
5 80%的乙醇
6 自来水或蒸馏水冲洗
2、染色
1 Core苏木素染色液染色
2 自来水或蒸馏水冲洗
3 (可选)盐酸乙醇分化
4 自来水冲洗
5 (可选)蓝化液返蓝
6 自来水冲洗
7 伊红染色液染色
8 自来水冲洗
2、脱水、透明、封固
1 80%乙醇
2 90%乙醇
3 95%乙醇作用。
4 无水乙醇作用。
5 二甲苯透明。
6 中性树脂封片。
染色结果:细胞核呈蓝色;细胞质、肌纤维、胶原纤维等呈深浅不一的红色;角蛋白、红细胞等呈明亮的橙红色。
注意事项:
1、 切片脱蜡应尽量干净。系列乙醇应经常更换新液。
2、 盐酸乙醇分化时间应根据切片厚薄、组织类别以及新旧而定,另外分化后自来水冲洗时间应该足够,以便彻底清洗酸。
3、 乙醚-乙醇混合固定液是由乙醚和95%乙醇等量混合而得,再加入适量乙酸,密闭保存。
4、 冷冻切片染色时间尽量要短。
5、 蓝化液常使用0.2~1%氨水或Scott促蓝液或0.1~1%碳酸锂溶液。
6、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期: 12个月有效。
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