苏丹红的检测

苏丹红的检测 中华人民共和国国家标准 食品中苏丹红染料的检测方法 高效液相色谱法 1 范围 本标准适用于食品中苏丹红染料的检测。 本标准规定了食品中苏丹红?、苏丹红?、苏丹红?、苏丹红?的高效液相色谱测定方法。 方法最低检测限:苏丹红?、苏丹红?、苏丹红?、苏丹红?均为10ug/kg. 2 术语和定义 2.1 苏丹红 属偶氮系列化工合成染料。 3 方法要点 样品经溶剂提取、固相萃取净化后，用反相高效液相色谱——紫外可见光检测器进行色谱分析，采用外标法定量。 4 试剂与标准品 4.1 乙腈色谱纯 4.2 丙酮 色谱纯、分析纯 4.3 甲酸 分析纯 4.4 乙醚 分析纯 4.5 正己烷 分析纯 4.6 无水硫酸钠 分析纯 4.7 层析柱管:1cm(内径)×5cm(高)的注射器管。 4.8 层析用氧化铝(中性100目~200目):105?干燥2h，与干燥器中冷至室温，每100g中加入2mL水降活，混匀后密封，放置12h后使用。 注:不同厂家和不同批号氧化铝的活度有差异，须根据具体购置的氧化铝产品略做调整，活度的调整采用标准溶液过柱，将1ug/mL的苏丹红的混合标准溶液1mL加到柱中，用5%丙酮正己烷溶液60mL完全洗脱为准，4种苏丹红在层析柱上的流出顺序为苏丹红?、苏丹红?、苏丹红?、苏丹红?，可根据每种苏丹红的回收率作出判断。苏丹红?、苏丹红?的回收率较低表明氧化铝活性偏低，苏丹红?的回收率偏低时表明活性偏高。 4.9 氧化铝层析柱:在层析柱管底部塞入一薄层脱脂棉，干法装入处理过的氧化铝至3cm高，轻敲实后加一薄层脱脂棉，用10mL正己烷预淋洗，洗净柱中杂质后，备用。 4.10 5%丙酮的正己烷液:吸取50mL丙酮用正己烷定容至1L。 4.11 标准物质:苏丹红、苏丹红、苏丹红、苏丹红;纯度?95%/ 4.12 标准储备液:分别称取苏丹红、苏丹红、苏丹红及苏丹红各10mg(按实际含量折算)，用乙醚溶解后用正己烷定容至250mL。 4 仪器与设备 5.1 高效液相色谱仪(配有紫外可见光检测器) 5.2 分析天平:感量0.1mg 5.3 旋转蒸发仪 5.4均质机 5.5 离心机 5.6 0.45um有机滤膜 6 样品制备 将液体、浆状样品混合均匀，固体样品需磨细。 7 操作方法 7.1 样品处理 7.11 红辣椒粉等粉状样品 称取1g~5g(准确至0.001g)样品与三角瓶中，加入10mL~30mL正己烷，超声5min，过滤，用10mL正己烷洗涤残渣数次，至洗出液无色，合并正己烷液，用旋转蒸发仪浓缩至5mL以下，慢慢加入氧化铝层析柱中(4.9)，为保证层析效果，在柱中保持正己烷液面为2mm左右时上样，在全过程的层析过程中不应使柱干涸，用正己烷少量多次淋洗浓缩瓶，一并注入层析柱。控制氧化铝表层吸附的色素带宽宜小于0.5cm，待样液完全流出后，视样品中含油类杂志的多少用10ml~30mL正己烷洗柱，直至流出液无色，弃去全部正己烷淋洗液，用含5%丙酮的正己烷液60mL(4.10)洗脱，收集、浓缩后，用丙酮转移并定容至5mL，经0.45um有机滤膜过滤后待测。 7.1.2红辣椒油、火锅料、奶油等油状样品 称取0.5g~2g(标准至0.001g)样品与小烧杯中，加入适量正己烷溶解(约1mL~10ml)，难溶解的应品可于正己烷中加温溶解。按7.1.1中“慢慢加入到氧化铝层析柱……过滤后待测”操作。 7.1.3辣椒酱、番茄沙司等含水量较大的样品 称取10g~20g (准确至0.01g)样品于离心管中，加10mL~20mL水将其分散成糊状，含增稠剂的样品对加水，加入30mL正己烷:丙酮=3:1，匀浆5min，吸出正己烷层，于下层再加入20mL×2次正己烷匀浆，离心，合并3次正己烷，加入无水硫酸钠5g脱水，过滤后于旋转蒸发仪上蒸干并保持5分钟，用5mL正己烷溶解残渣后，按7.1.1中“慢慢加入到氧化铝层析柱……过滤后待测”操作。 7.1.4香肠等肉制品 称取粉碎样品10g~20g(准确至0.01g)于三角瓶中，加入60mL正己烷充分匀浆