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痰淤通胶囊调脂及对肝肾功能和肝脏病理学的影响

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痰淤通胶囊调脂及对肝肾功能和肝脏病理学的影响痰淤通胶囊调脂及对肝肾功能和肝脏病理学的影响 【摘要】 目的研究痰淤通胶囊对高脂血症大鼠血脂、肝肾功能和肝脏病理学的影响。方法高脂饲料喂养复制高脂血症大鼠模型,用中药前后检测血脂及肝肾功能;采用光镜观察肝组织病理变化。结果痰淤通胶囊能降低模型大鼠血清中TC、TG、LDL-C的含量,升高HDL-C的含量,对ALT、AST、BUN、Cr未见明显影响;从肝组织病理变化可知,痰淤通胶囊组肝细胞脂肪变性和肝脏病理损害明显轻于造模组。结论痰淤通胶囊能够调理血脂,对肝肾功能无明显影响,且能改善肝脏病理损害,具有防治高脂血症及其并发症的作用...
痰淤通胶囊调脂及对肝肾功能和肝脏病理学的影响
痰淤通胶囊调脂及对肝肾功能和肝脏病理学的影响 【摘要】 目的研究痰淤通胶囊对高脂血症大鼠血脂、肝肾功能和肝脏病理学的影响。方法高脂饲料喂养复制高脂血症大鼠模型,用中药前后血脂及肝肾功能;采用光镜观察肝组织病理变化。结果痰淤通胶囊能降低模型大鼠血清中TC、TG、LDL-C的含量,升高HDL-C的含量,对ALT、AST、BUN、Cr未见明显影响;从肝组织病理变化可知,痰淤通胶囊组肝细胞脂肪变性和肝脏病理损害明显轻于造模组。结论痰淤通胶囊能够调理血脂,对肝肾功能无明显影响,且能改善肝脏病理损害,具有防治高脂血症及其并发症的作用。 【关键词】 痰淤通胶囊; 高脂血症; 肝肾功能; 肝脏病理 高脂血症(hyperlipemia,HLP)是临床上的常见病和多发病。大量研究资料明,高脂血症是冠心病、脑卒中、心肌梗塞、心脏猝死等独立而重要的危险因素。中医学认为,高脂血症的发病与痰浊、淤血密切相关,病理关键为痰淤互结,故治疗应以化痰降浊,活血理气为基本大法。本方是全国名老中医、伤寒大家梅国强教授治疗高脂血症、冠心病多年临床实践的经验方,在《伤寒论》小陷胸汤的基础上加清热化痰,活血祛淤的药物组成。前期实验研究证实[1,2],该方能显著降低高脂血症模型大鼠血脂,改善血管内皮功能,增强肝细胞脂质代谢、提高肝细胞过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)的转录水平,具有降脂及调节脂蛋白代谢和预防动脉粥样硬化的作用。为明确剂型改变对机体的影响,笔者从其降脂及对肝肾功能和肝脏病理的影响进行研究,现报道如下。 1 材料与仪器 1.1 动物清洁级健康SD大鼠40只,雄性,体质量180,220 g,合格证号:SCXK(鄂)2004-0007。实验室室温(20?3)?,分笼喂养,自由饮水和进食。 1.2 药物及试剂痰淤通胶囊由武汉市一医院中心实验室制备,每克干燥粉末含生药 2.29g;血脂康胶囊,由北京北大维信生物科技有限公司生产,产品批号:20071016,国药准字号Z10950029;临用前均用阿拉伯胶、甘油及蒸馏水配制成所需浓度的均匀混悬液。血清总胆固醇(TC)试剂盒,批号080631;甘油三酯(TG)试剂盒,批号082401;高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)试剂盒,批号080151;谷丙转氨酶(ALT)试剂盒,批号080961;谷草转氨酶(AST)试剂盒,批号080451;尿素氮(BUN)试剂盒,批号080461;肌酐(Cr)试剂盒,批号081201;以上试剂盒均由中生北控生物科技股份有限公司生产。 处方组成及制备工艺 痰淤通胶囊处方:法半夏、全瓜蒌各100g,黄连60 g,茯苓200 g,当归、川芎、土鳖虫、红花、胆南星、生山楂各100 g。制法:取红花、当归、川芎适当粉碎,采用蒸馏法提取挥发油,分取油层用乙醇稀释成溶液,与水层及药渣备用。取法半夏、黄连、全瓜蒌、胆南星、山楂适当粉碎,以70%乙醇为溶剂采用渗漉法提取,渗漉液回收乙醇至无醇味,浓缩液、药渣备用。取土鳖虫研磨成细粉,过5号筛备用。取茯苓,加入提取 红花等3味药物的水层及药渣、提取法半夏等5味药物的药渣,加适量水煎煮两次,第1次2 h,第2次1h,过滤,滤液浓缩成稠膏,加入土鳖虫细粉混合均匀,60?以下干燥,粉碎成细粉,喷入挥发油溶液,混合均匀,装入胶囊,即得。 1.3 仪器BIO-TEK ELX800全自动酶标仪;光学显微镜PM-10AD:Olympus optical Co. LTD,Japan生产。 2 方法 2.1 分组与模型制备清洁级健康雄性SD大鼠40只,在实验环境下,适应性饲养1周后,按体重相近原则随机分为4组,每组10只:空白对照组,模型组,痰淤通组,血脂康组。空白对照组喂基础饲料,其余3组给与高脂饲料(胆固醇4%,丙基硫氧嘧啶0.2%,胆酸钠0.3%,猪油10%,基础饲料85.5%)[3],直至实验结束。 2.2 给药方法造模4周后开始灌胃给药,1次/d,1 ml/100 g体重,痰淤通组给予痰淤通胶囊混悬液4.5 g?kg?d-1,血脂康组给予血脂康混悬液0.15 g?kg?d-1,空白对照组和造模组给与同体积不同浓度的生理盐水,连续灌胃4周;每3天称重1次,根据体重调整灌胃量。 2.3 标本采取于实验造模第8周结束时处死各组动物。方法:隔夜禁食,次日以2%戊巴比妥钠溶液40 mg/kg体重腹腔内注射麻醉后,从左心耳采血;然后迅速取出肝脏,用手术刀小心分开其左右叶,顺其纹理取肝左叶1块0.5 cm×1 cm×0.3 cm组织,切面朝下放入包埋筐,标记,然后放到4%的多聚甲醛溶液中进行固定。常规HE染色。所采血在30 min内离心取血清待检。 2.4 指标检测将所取血5 ml静置30 min,3 000 r/min离心15 min,取血清用全自动酶标仪检测血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)的含量,并按FLDL-C=TC-(LDC-C+TG/2.2)计算其含量。 肝脏病理:取肝左叶, 4%的多聚甲醛固定肝标本,肝组织石蜡切片HE染色,光镜下观察肝脏病理学改变。 2.5 统计学方法采用SPSS11.5统计软件进行数据。计量资料以?s表示,各组间比较采用两样本均数的t检验,等级资料采用秩和检验,以P<0.05为有统计学意义。 3 结果 3.1 对高脂血症大鼠血脂的影响见表1。 从表1可以看出,高脂血症造模组大鼠血清TG、TC、LDL-C显著高于空白组(P<0.01),HDL-C明显低于空白组(P<0.05),说明造模组大鼠体内存在着脂质代谢紊乱,提示高脂血症模型大鼠复制成功;痰淤通组和血脂康组大鼠血清TG、TC、LDL-C明显低于造模组(P<0.05或P<0.01),HDL-C较造模组也有不同程度的升高(P<0.05或P<0.01),而痰淤通组和血脂康组 比较无显著性差别(P>0.05)。结果显示痰淤通胶囊有显著的调脂作用。表1 痰淤通胶囊对高脂血症大鼠血脂的影响 3.2 对高脂血症大鼠肝肾功能的影响见表2。表2 痰淤通胶囊对高脂血症大鼠肝肾功能的影响从表2可以看出,造模组、痰淤通组和血脂康组大鼠血清ALT,AST,BUN,Cr活性均未见明显升高,与空白组比较,差异无显著性(P>0.05);提示痰淤通胶囊对肝肾功能无明显影响。 3.3 对高脂血症大鼠肝脏病理的影响 3.3.1 各组大鼠肝脏细胞脂肪变性情况统计分析参考肝细胞脂肪变性程度判断标准[4],并结合王泰龄等[5]提出的慢性肝炎炎症活动情况计分方案,根据脂肪变性程度不同分为4级,依病变程度分别计为 0,1,2,3分,每组按等级进行计数并进行统计分析。表3 肝细胞脂肪变性程度判断标准表4 各组肝细胞脂肪变性程度情况分析从表4可以看出,造模组大鼠肝组织均有病理改变,且以中、重度脂肪变性为主,占80%,从病理角度提示造模成功。痰淤通组和血脂康组中、重度脂肪变性明显减少,占22%左右,以基本正常及轻度脂肪变性为主,两组比较,P>0.05,说明二者在病理上无明显差异;两组与造模组比较,P<0.05或P<0.01,提示经治疗后,肝细胞脂肪变性程度减轻,肝脏病理损害得到改善。 3.3.2 光镜观察空白组:正常组大鼠肝小叶结构清晰,肝细胞索排列整齐,呈放射状,肝窦正常,胞核结构清晰。见图1。造模组:肝细胞呈中重度脂肪变性,严重肿胀,细胞核多被挤向一边,体积较正常增大,胞浆内充满脂肪空泡,主要为小泡性脂肪变性,脂滴大小不等,部分融合为大泡性脂肪变性,肝窦狭窄或消失,脂肪变性布满视野。见图 2。痰淤通组:病变程度较模型组减轻,细胞空泡变性明显减少,脂滴少而小 ,肝细胞较模型组缩小。见图3。血脂康组:病变程度较模型组减轻,脂滴少而小,肝窦可见,与痰淤通组大致相似。见图4。 4 讨论 高脂血症是各种原因导致的血浆中胆固醇、甘油三酯和(或)低密度脂蛋白过高和(或)高密度脂蛋白过低的一种全身脂代谢异常。HLP的直接危害就是加速全身动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS),而AS是心脑血管疾病发病的共同病理基础,也是其发展的直接原因[6]。所以从源头上调脂,就可以延缓或减轻动脉粥样硬化病变的发展,从而达到“治未病”的效果。 图1 空白组(400×) 图2 造模组(400×)图3 痰淤通组(400×) 图4 血脂康组(400×) 化痰活血方(现更名为痰淤通胶囊)是在高脂血症多为“痰淤互结”的病理因素的基础上精心化裁的有效方剂,在临床上已取得较好的调脂效果[7]。方中半夏辛温,燥湿化痰,消痞散结,现代药理研究发现半夏具有降血脂、护肝和治疗冠心病等多种重要的作用;黄连苦寒,清热燥湿化痰;全瓜蒌甘寒,清热理气化痰,宽胸散结消痞,现代药理研究表明,瓜蒌有扩张冠状动脉,增加血流量,提高耐缺氧能力,降低血清胆固醇等作用;当归辛甘温,补血活血,现代药理研究证明,其有效成分当归多糖对机体免疫系统、血液系统有明显良性效应;川芎辛 温,活血行气,祛风止痛,其有效成分川芎嗪具有扩张血管、抑制血小板聚集、防止血栓形成、改善脑缺血等多种作用;山楂酸甘温,消食化积、行气活血散淤,近年来多用于高血压病、冠心病及高脂血症的治疗;土鳖咸寒,破血逐淤、推陈出新、消淤通络,现代药理证实,土鳖具有调节血脂、抗缺氧、保护血管内皮细胞等药理作用;红花辛温,活血祛淤止痛,具有降压、降脂、抗炎、抗血栓、抗血凝等作用,广泛应用于心脑血管疾病的治疗;茯苓甘淡,健脾补中,利水渗湿,脾旺痰无由生,现代药理研究表明,茯苓具有抗炎、抗菌、抗病毒、调节免疫、保肝等作用。诸药合用,标本同治,消补兼施,共奏健脾化痰清热、活血理气止痛之功,使痰清淤消,气机条达,气血畅行,疾病得以消除。 实验研究表明,痰淤通胶囊对高脂血症模型大鼠调脂作用明显,使升者得降,降者得升,正是通过药物的作用使机体阴阳调和的结果;肝脏和肾脏分别是药物代谢途径中生物转换和排泄的重要脏器,而痰淤通胶囊对反映肝肾功能的指标无明显影响,这也和本课题的急性毒理实验研究结果是一致的;脂肪变性程度是反映肝脏损害轻重的有效指标,而痰淤通胶囊中祛痰药和活血化淤药在一定程度上可以减少肝细胞的脂肪变性和坏死,加速病灶的吸收和修复,改善肝内微循环障碍,促进肝细胞再生,使肝脏病理损害得以明显减轻。因此,痰淤通胶囊具有调理血脂和防治心脑血管疾病基础病变的作用。 【参考文献】 [1] 叶 勇,梅国强,刘松林.化痰活血方对高脂血症大鼠血脂代谢的影响及其抗氧化作用[J].时珍国医国药,2005,16(10):968. [2] 叶 勇,王家宁,汪道文,等.化痰活血方对高脂血症大鼠肝过氧化物酶体增殖物激活受体及其目标基因表达的影响[J].中医杂志,2006,47(1):533. [3] 李大伟,张 玲,夏作理.建立高脂血症模型的动物选择与常用造模方法分析及改进[J].中国临床康复,2006,10(48):145. [4] DiehlAM, Goodman Z, Ishak KG. Alcohollike disease in nonalcoholics A clinical and histologic comparison with alcohol-induced liverinjury[J]. Gastroenterol,1988,95:1056. [5] 王泰龄,刘 霞,周之平,等. 慢性肝炎炎症活动度及纤维化程度计分方案[J].中华肝脏病杂志,1998,66(4):195. [6] Kuo PT.Treating hyperlipidemia to provide salutary effect on coronary artery disease[J].Chest,1984,85(4):455. [7] 叶 勇,梅国强.梅国强教授运用化痰活血法治疗高脂血症[J].光明中医,2003,18(6):22.
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