高效液相色谱仪期间核查规程

高效液相色谱仪期间核查方法 一、依据和目的  保证高效液相色谱仪的正常运行，在两次检定/校准之间进行期间核查，验证该设备是否保持检定/校准时的状态，确保其检验数据的有效性和准确性。 二、使用范围  该运行检查方法适用于使用中的1200高效液相色谱仪的期间核查检查方法。  三、基本原理  高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的。 四、仪器工作条件及要求 1、环境温度：15～35℃      环境湿度：≤75RH%  2、室内无强磁场干扰；  3、室内部不存在妨碍仪器正常工作的震动；  4、室内清洁，无腐蚀性气体；  5、稳压器正常，并保持良好接地； 6、供电电源：交流电压220V±10%；  7、排风设备完好，排风量达到实验要求；  8、仪器放置在坚固的实验台上，并避免阳光直射。  五、核查方法  1、通用技术要求 (1) 检查贮液器是否清洁； (2) 检查滤头是否堵塞； (3) 检查仪器电源线、信号线等插接是否紧密； (4) 检查各开关、旋钮、按键等功能是否正常，指示灯是否灵敏； 将仪器各部分连接好，以100%甲醇为流动相，流量为1.0mL/min，启动仪器，待压力平稳后保持10min，用滤纸检查各管路接口应无湿迹 2、泵流量设定值误差SS 、流量稳定性误差的检定SR 分别设定流量为0.5 mL/min 、1.0 mL/min、2.0 mL/min，启动仪器，压力稳定后，在流动相出口处用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒计时，收集5 min流出的流动相，在分析天平上称重，按式（1 ）、式（2 ）计算SS 和SR 。 （1） （2） 式中： ―― , 流量实测值，mL/min； ――容量瓶+流动相的质量，g; ――容量瓶的质量，g； ――试验温度下流动相的密度，g/mL； ――收集流动相的时间，min； ――同一组测量的算术平均值，mL/min； ――流量设定值，mL/min； ――同一组测量中流量最大值，mL/min； ――同一组测量中流量最小值，mL/min； 流量设定值，mL/min 0.5 1.0 1.5 测量次数 3 3 3 收集流动相时间，min 5 5 5 允许误差 SS 5% 3% 2% SR 3% 2% 2%           3、基线噪声和基线漂移 选用C18色谱柱，以甲醇：0.02mol/L乙酸铵=5：95为流动相，流速为1.0 mL/min，紫外检测器的波长选在230nm，检测灵敏度调到最灵敏档，开机预热，待仪器稳定后基线10 min，由检测器的衰减倍数和测得的基线峰-峰高对应标度，计算基线噪声，用检测器自身的物理量（AU）作单位表示。 (3) 式中： ――检测器基线噪声； ――衰减倍数； ――测得的基线峰-峰高对应的记录仪标度，AU。 基线漂移用1小时内基线偏离原点的值（AU/ h）表示。看基线噪声是否不超过5×10-4AU，基线漂移是否不超过5×10-3AU/ h 4、整机性能（定性、定量重复性） 选用C18色谱柱，根据检测器选择流动相和测量参数：以甲醇：0.02mol/L乙酸铵=5：95为流动相，流速为1.0 mL/min，紫外检测器的波长选在230 nm，基线稳定后由进样器注入20 μL的25μg/mL苯甲酸标准溶液，连续测量6次，记录色谱峰的保留时间和峰面积。按式（5）计算相对标准偏差RSD。 （4） 式中：RSD（定性（定量））――定性（定量）测量重复性相对标准偏差； ――第i次测量的保留时间或峰面积； ――6次测量结果的算术平均值； ――测量序号。 六、结果处理 对仪器核查结果，应填写仪器设备期间核查记录。如果该仪器已经偏离校准状态，应查找原因，并采取维修、重新检定或停用、报废等相应，维修后的仪器经检定或核查达到技术性能要求后方能投入使用。