星形细胞瘤脑血容量与RhoA表达相关性研究

星形细胞瘤脑血容量与RhoA表达相关性研究 星形细胞瘤脑血容量与RhoA表达相关性研 究 蚌埠医学院学报2009年8月第34卷第8期721 [文章编号]1000_22oo(20o9)08721_o3-影像I,N学- 星形细胞瘤脑血容量与RhoA表达相关性研究 马宜传,付凯,陈岩,丁强,孙景秋 [摘要]目的:探讨星形细胞瘤cT灌注参数——脑血容量(CBV)与Ras相似物 A(RashomologueA,RhoA)表达的相关性.方 法:测量17例高级别(?,?级)星形细胞瘤及14例低级别(I,?级)星形细胞瘤的CBV值,免疫 组织化学法测定瘤组织 RhoA表达,比较CBV与RhoA表达的相关性.结果:低级别星形细胞瘤CBV值及RhoA的 表达免疫反应评分显着低于高级别 星形细胞瘤(P<0.01).星形细胞瘤CBV值与RhoA之间呈明显的正相关关系(P<0.01). 结论:灌注成像对星形细胞瘤术 前分级有较高的临床应用价值.CBV灌注图是活体检测肿瘤侵袭性的较好工具. [关键词]脑肿瘤;星形细胞瘤;灌注成像;体层摄影术,x线计算机;Ras相似物A;脑血容量 [中国图书资料分类法分类号]R739.41;R730.264[文献标识码]A CTperfusionimagingofastrocytomaanditscorrelationwith theexpressionofIShomologueA MAYi—chuan,FUKai,CHENYan,DINGQiang,SUNJing—qiu (1.D印 nmeofRadiology,TheFirstAffiliatedHospitalofBeagbuMedicalCollege,BengbuAnhui233004; 2.DepartmentofRadiology,SwhuanProvincialPeopleSHospital,ChengduSichuan610072,China) [Abstract]Objective:Toinvestigatetherelationshipbetweenthevalueofcerebralbloodvolume(CBV)andRashomologueA(RhoA) expression.Methods:CTperfusionimagingwasperformedinthirty—onecasesofastrocytomas(14cas esoflowgradeastrocytomasand 17casesofhighgradeastrocytomas).TheCBVandRhoAexpressionweredeterminedbyimmunohistochemicalmethod,andtherelation betweenthemwasanalyzed.Results:TheCBVvalueandimmunoeactivityscoreinhighgradeastrocytomatumorswerehigherthanthat inlowgradeastrocytomatumors(P<0.01).TherewasapositivecorrelationbetweenCBVvalueandRhoAexpression(P<0.01). Conclusions:CTperfusionimagingisvaluableinpreoperativegradingofastrocytoma,andCBVisadvantageousinevaluatingthe invasionofastrocytomas. [Keywords]brainneoplasms;astr0cytoma;perfusionimaging;tomography,X—raycomputed;Rasho mologueA;cerebralbloodvolume 星形细胞瘤的侵袭程度与其诱导的Ras相似物 (Rashomologue,Rho)表达密切相关,其中RhoA表 达随星形细胞瘤恶性度的增高而升高,可作为评价 星形细胞瘤侵袭性的指标….本研究通过对星形 细胞瘤灌注参数j——脑血容量(cerebralblood volume,CBV)测定与免疫组化检测RhoA表达作对 照研究,旨在探讨CBV与肿瘤侵袭性的相关性,进 一 步阐明CT灌注成像在活体评价星形细胞瘤侵袭 性的临床应用价值. 1资料与方法 1.1一般资料本文收集经手术病理证实的星形 细胞瘤患者3l例,为笔者在四川省人民医院学习期 间的病例资料.男17例,女l4例;年龄14,69岁. 按WHO神经系统肿瘤分类(2000年)进行病 理分级,由于本组星形细胞瘤I级和?级例数较少, [收稿日期]2008-12-05 [作者单位]1.蚌埠医学院第一附属医院放射科,安徽蚌埠 233004;2.四川省人民医院放射科,四川成都610072 [作者简介]马宜传(1970一),男,硕士,主治医师. 故将I级和?级,?级和?级分别合并为低级别组, 高级别组.其中,低级别组14例:I级3例,?级 11例;高级别组17例:?级13例,?级4例. 1.2CT检查方法16排Siemenssomatom sensation型螺旋机,应用MSCT”PerfusionCT”技术 对脑肿瘤进行包括中心层面的灌注扫描.先行常规 平扫,确定病变范围,以病变最大层面为中心行CT 灌注检查.采用CT电影扫描技术,层厚5mm.患 者仰卧位,灌注扫描参数:120kV/200mA,扫描矩 阵512×512,球管旋转1周采集2层,1周扫描时间 40S,共得到80帧图像,高压注射器经前臂静脉注 射碘海醇(300mgI/m1),按1ml/kg体重给药,注射 流速4ml/s,延迟时间5S. 1.3图像分析及观察指标用Perfusion.2软件中 的脑肿瘤灌注分析软件,选取流入动脉和流出静脉, 然后计算得到反映组织灌注功能状态的伪彩功能 图:CBV图.用20,30mm的小测量病变区,在 4个扫描层面,分别取6,8个测量区,然后取平均 值,测量时避开血管和坏死组织. 1.4免疫组织化学方法检测RhoA表达标本高 压抗原修复后,RhoA单克隆抗体1:200ABC法进 722 行免疫组化染色.苏木素复染,树胶封固,以正常羊 血清代替一抗作阴性对照. 1.5RhoA表达评价方法RhoA阳性染色以胞质 出现棕黄色或棕褐色均质颗粒物质为准.RhoA半 定量分析法采用Friedrich等的免疫反应评分 (immunoreactivityscore,IRS)进行评定,IRS由阳性 细胞的百分数(percentofpositivecells,PP)计分与 染色强度(stainingintensity,SI)计分相乘所得.PP 计分如下:0分,<1%;1分,1%,25%;2分,26% , 50%;3分,5l%,75%;4分,>75%.SI计分如 JBengbuMedCoil,August2009,Vo1.34,No.8 下:0分,不着色;1分,着色弱;2分,中等着色;3分, 强着色.染色的程度分级:阴性,0分;弱阳性,1,3 分;中等阳性,4,6分;强阳性,8,12分. 1.6统计学方法采用t检验和等级相关分析. 2结果 低级别组CBV值低于高级别组(P<0.01)(见 图1,2);低级别组IRS值明显低于高级别组(P< 0.01)(见表1).星形细胞瘤CBV值与肿瘤RhoA 表达呈正相关关系(:0.721,P<0.01). A:CT平扫右顶叶片状稍低密度影;B:CT增强,病灶未见强化征象;C:CBV图,病灶CBV轻度 升高 图1低级别星形细胞瘤 A:CT平扫,左侧顶枕交界区肿块;B:CT增强,病灶强化;C:CBV图,病灶CBV明显升高 图2高级别星形细胞瘤 表1低级别组和高级别组细胞瘤CBV值与RhoAt较 3讨论 3.1CBV值在低级别与高级别星形细胞瘤中的特 点及意义既往获得星形细胞瘤组织学信息主要是 通过活检,但是活检是有创性检查,对脑星形细胞瘤 不具有临床可行性,而且活检取样有明显的抽样误 差.因此无创伤的功能性CT灌注成像可以提供活 体局部微循环信息,从而揭示肿瘤的生物学行为及 预后情况.研究表明I4J,灌注成像的测量值与肿 瘤血管组织病理新生血管的测量相关性好,可为临 床提供诊断信息.Sugahara等认为,胶质瘤分级 和血管分布程度等与CBV存在明显相关性,其中 CBV值的升高与胶质瘤存在特异性相关,血管的数 量和密集程度与CBV有关,CBV反映肿瘤血管增生 的程度,随着星形细胞瘤病理级别的增加,肿瘤血供 越丰富,CBV值也相应升高.脑星形细胞瘤活检一 般是在CT导引下进行的,常规CT检查只能显示肿 瘤的大概轮廓,所以在活检中可能低估星形细胞瘤 蚌埠医学院学报2009年8月第34卷第8期 的级别,甚至会造成假阴性.CT灌注成像可以显示 最有活性的肿瘤部分,不仅可使肿瘤轮廓显示更清 楚,而且由于肿瘤活性与肿瘤血管增殖密切相关, CBV值最高区表示肿瘤血供最丰富部位,也即肿瘤 恶性程度最高区,故CBV图可以测量出术前活检的 最佳区,从而用来指导术前穿刺活检.本研究结 果显示,高级别星形细胞瘤CBV值较低级别星形细 胞瘤明显升高,提示低级别及高级别星形细胞瘤的 本质差别是新生血管的增殖程度和血容量的不同, 随着星形细胞瘤恶性程度的提高,其微血管密度也 在提高.星形细胞瘤的形态学表现并不能完全反映 其病理改变,有i例病变占位征象及水肿明显,CT 平扫及增强图像,考虑诊断为?级星形细胞瘤.但 CT灌注图像提示,CBV值只有轻度升高,说明肿瘤 血管生成程度比较低,且血脑屏障破坏轻微.所以 依据CT灌注图像诊断为低级别星形细胞瘤,术后 病理证实为?级星形细胞瘤.另1例CT图像见病 变只有轻度占位征象,提示低级别星形细胞瘤,但 CT灌注图像提示,CBV值有较明显地升高,说明肿 瘤周边血管增生程度高,提示恶性征象,术后病理证 实为高级别星形细胞瘤. 3.2不同级别星形细胞瘤RhoA表达与CBV值的 相关性Rho蛋白家族最主要的功能是调节肌动蛋 白细胞骨架,调控细胞运动,增殖,凋亡,细胞周期. RhoA蛋白是Rho蛋白家族中重要成员之一.研究 表明,RhoA蛋白和肿瘤细胞迁移,侵袭密切相 关J.肿瘤的侵袭性是评价肿瘤分级与恶性度的 重要参数,也是肿瘤复发,治疗失败和死亡的重要原 因.本研究发现,RhoA蛋白在星形细胞瘤患者中呈 高度表达,RhoA与病理组织分级呈正相关关系,随 分级增高,表达呈逐渐增高的趋势.提示RhoA信 号在星形细胞瘤侵袭和转移中发挥重要作用.另外 . 有研究表明,使用RhoA抑制剂可以抑制肿瘤细 胞增殖,提示RhoA蛋白有可能成为肿瘤治疗的新 靶点.因此该肿瘤标志物检测可以对星形细胞瘤的 生物学行为预测,对预后进行评估.cT灌注成像的 CBV值被认为是与免疫学RhoA相对应的一种活体 评价肿瘤侵袭力的指标.CBV图能较准确地量化 反映星形细胞瘤病变区的血管生成程度,血管生成 活性与肿瘤侵袭性在星形细胞瘤生长中是相互关联 的因素.Lee等H..利用MR灌注成像对星形细胞瘤 的肿瘤分级进行研究,认为星形细胞瘤的组织分级 723 和血管分布程度均与相对CBV存在良好的相关关 系,CBV图可更精确地显示肿瘤侵袭范围和轮廓, 测量病变区CBV值可预测星形细胞瘤侵袭力.本 研究就不同级别的星形细胞瘤的CT灌注CBV值与 其肿瘤组织的RhoA进行了相关性分析,得出CBV 与RhoA之间具有明显的正相关关系,说明CBV可 以很好地反映星形细胞瘤的RhoA表达. 本研究还表明,星形细胞瘤CBV值与其病理分 级相关,CBV图能较准确地量化反映星形细胞瘤病 变区的血管生成程度,从而更确切地反映肿瘤的病 理级别.临床检测RhoA表达程度对星形细胞瘤侵 袭性的评价,治疗的选择具有重要的指导意义. 因此,利用灌注参数CBV可活体预测星形细胞瘤 RhoA表达,为临床评价肿瘤侵袭性,评估预后,制定 科学的治疗方案提供一定依据. [参考文献] [I]WatanabeN,KatoT,FujitaA,eta1.CooperationbetweenmDial andROCKinRho—inducedactinreorganization[J].NatCell Biol,1999,1(3):136—143. 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