【精品文献】龙牡壮骨冲剂对胃肠动力及胃肠组织VIP的影响

【精品文献】龙牡壮骨冲剂对胃肠动力及胃肠组织VIP的影响 论文范文 题目:龙牡壮骨冲剂对胃肠动力及胃肠组织 VIP的影响 编辑:司马小 作者:黄娟 许慧 罗燕军 杨磊 吴亚斌 【摘要】 ,目的,通过动物实验观察龙牡壮骨冲剂对小鼠胃肠动力和胃肠激素的影响。,方法,将小鼠随机分为对照组、模型组、龙牡壮骨冲剂大剂量组、中剂量组、小剂量组～用胃复安、阿托品、新斯的明、肾上腺素注射液尾静脉注射复制胃肠动力紊乱小鼠模型～以营养性半固体糊灌胃～标记胃肠测量胃残留率和小肠推进比～同时以放免法测胃肠组织中血管活性肠肽,VIP,水平。,结果,胃复安可致胃排空加速～同时可致胃肠组织中VIP水平降低,均为P<0.05,。阿托品可致胃排空减慢并致胃肠组织中VIP水平升高,均为P<0.05,。新斯的明可致小肠推进比增加并致胃肠组织中VIP水平降低,均为P<0.05,。肾上腺素可致小肠推进比降低并可致胃肠组织中VIP水平升高,均为P<0.05,。龙牡状骨冲剂对正常组小鼠胃残留率和小肠推进比无影响～大剂量龙牡状骨冲剂对胃复安所致胃排空加速、阿托品 所致胃排空减慢、新斯的明所致小肠推进比增加、肾上腺素所致小肠 推进比降低有逆转作用,均为P<0.05,～中小剂量龙牡状骨冲剂亦有 一定的逆转作用。龙牡状骨冲剂对各组所致胃肠激素VIP紊乱有逆转 作用～且与剂量有一定的相关性。,结论,龙牡壮骨颗粒可双向调节 胃肠运动～并具有剂量依赖性～其对胃肠动力的调节作用可能是通过 影响局部组织中的VIP水平实现的。 【关键词】 胃肠动力,龙牡状骨冲剂,组织血管活性肠肽,胃肠激 素,小鼠 Abstract:,Objective,To observe the influence of Longmuzhuanggu powder,LMZGP,on gastroenteric movement and gut hormone in mice.,Methods,To establish the mouse of the disorder of gastric depletion and small intestime advancement by using maxolon～atropine～neostigmine and adrenaline.Mice were randomly divided into control group～model group～LMZGP large dose group～LMZGP middle dose group～LMZGP low dose group.Gastric emptying and intestinal progradating rates in model mice were tested with black nutritiou semi solid cataplasm.The expression of vasointestinal polypeptide,VIP, ,Results,Maxolon accelerated gastric depletion and degraded the level of VIP in gastroenteric tissue.Atropine inhibited gastric empty and heightened the level of VIP in gastroenteric tissue.Neostigmine accelerated intestine propagation and degraded the level of VIP in gastroenteric tissue.Adrenaline inhibited intestine propagation and heightened the level of VIP in gastroenteric tissue.LMZGP administrated orally had no significant influence on the gastric depletion and small intestine advancement in normal mice～but improved the gastroenteric movement in animal model of gastroenteric movement disorders which manifested as relieving gastric depletion disorder by atropine and maxolon～antagonizing significantly the acceleration or lowering of small intestine advancement induced by neostigmine and adrenaline.Middle and low dose of LMZGP also had some reverse effect.LMZGP also ,Conclusion,propagation via a mechanism of action mainly on VIP in gastroenteric tissue. Key words:gastroenteric movement,Longmuzhuanggu powder,vasointestinal polypeptide,VIP,,gastroenteric hormone,mouse 小儿胃肠动力性疾病十分常见～中医研究发现小儿胃肠动力性疾病常和脾虚相关～其病理特点为“脾常不足”、“肾气常虚”、“稚阳体～邪易干”。龙牡壮骨冲剂是湖北省中成药大品种～主要用于治疗和预防小儿佝偻病～软骨病,对小儿多汗、夜惊、食欲不振、消化不良、发育迟缓等症也有治疗作用。本研究目的就在于了解龙牡壮骨颗粒对胃肠动力的影响～以利于龙牡壮骨颗粒二次开发利用。 1 对象与方法 1.1 对象 雄性昆明种小鼠～平均18，20g,4，6周,～雌雄兼用～购自湖北省医学科学院实验动物中心。 1.2 实验试剂 放免法测VIP～放免试剂盒购自北京华英生物技术研究所。龙牡壮骨冲剂为武汉健民药业集团生产,胃复安为徐州莱恩药业有限公司生产,阿托品为上海丰禾制药有限公司生产,新斯的明为山东天福制药厂生产,肾上腺素为武汉远大制药集团股份有限公司生产。 1.3 仪器 OHAUS PT200S电子天平～美国出品,Labofug400R离心机～德国Heraeus公司产品。 2 试验方法,1, 2.1 营养性半固体糊制作,2, 取5g羧甲基纤维素溶于25ml蒸馏水中～然后分别加入8g奶粉、4g糖、4g淀粉、3g活性炭～搅拌均匀～配成150ml约150g的半固体糊～臵冰箱中冷藏12h～使用前2h取出恢复常温。 2.2 龙牡壮骨冲剂对正常小鼠胃排空及小肠推进的影响 昆明种小鼠40只～按体重随机分成4组～为对照组,蒸馏水灌胃,、龙牡壮骨冲剂大、中、小剂量组,给药剂量分别为6.3g/kg、3.2g/kg、1.6g/kg～灌胃,～给药75min后给予营养性半固体糊1ml/只～30min后脱颈处死动物～剖开腹腔～结扎胃贲门和幽门。取胃用滤纸试干后称全重～然后沿胃大弯剪开胃体～洗去胃内容物后用滤纸试干～称胃净重～胃全重和胃净重差值为胃内残留物重～以之与所给糊重的百分比为胃内残留率剖腹摘取胃～胃内残留率=,全重-净重,/全重〓100%。自盲肠处取上述小鼠的肠～不加牵引铺平于白纸上～分别量取自幽门括约肌至炭糊最前端及至盲肠的距离。计算小肠推进比,%,=,炭糊移动距离/幽,盲全长,〓100%。 2.3 龙牡壮骨冲剂对胃复安所致小鼠胃排空的影响 昆明种小鼠40只～按体重随机分成4组～为模型组、龙牡壮骨冲剂大、中、小剂量组,剂量同上～灌胃,～模型组小鼠蒸馏水灌胃～后3组小鼠给予相应剂量龙牡壮骨冲剂～60min后各组小鼠均给予胃复安5mg/kg尾静脉注射。15min后给予营养性半固体糊1ml/只～同2.2～计算胃内残留率。 2.4 龙牡壮骨冲剂对阿托品所致胃排空的影响 昆明种小鼠40只～按体重随机分成4组～为模型组、龙牡壮骨冲剂大、中、小剂量组,剂量同上～灌胃,～模型组小鼠蒸馏水灌胃～后3组小鼠给予相应剂量龙牡壮骨冲剂～60min后各组小鼠均给予阿托品15mg/kg尾静脉注射。15min后给予营养性半固体糊1ml/只～同2.2～计算胃内残留率。 2.5 龙牡壮骨冲剂对新斯的明所致小鼠小肠推进的影响 昆明种小鼠50只～按体重随机分成5组～为模型组、龙牡壮骨冲剂大、中、小剂量组,剂量同上～灌胃,～模型组小鼠蒸馏水灌胃～后3组小鼠给予相应剂量龙牡壮骨冲剂～60min后各组小鼠均给予新斯的明0.08mg/kg尾静脉注射。15min后给予营养性半固体糊1ml/只～同2.2～计算小肠推进比,%,。 2.6 龙牡壮骨冲剂对肾上腺素负荷小肠推进的影响 昆明种小鼠40只～按体重随机分成4组～为模型组、龙牡壮骨冲剂大、中、小剂量组,剂量同上～灌胃,～模型组小鼠蒸馏水灌胃～后3组小鼠给予相应剂量龙牡壮骨冲剂～60min后各组小鼠均给予肾上腺素0.4mg/kg尾静脉注射。15min后给予营养性半固体糊1ml/只～同2.2～计算小肠推进比,%,。 2.7 龙牡壮骨颗粒对小鼠胃肠组织血管活性肠肽,VIP,的影响:小鼠处死、开腹～取胃组织及肠组织～洗去胃肠内容物后称重量～于1ml 100?生理盐水中煮沸3min～加入1N冰醋酸0.5ml中于匀浆器中匀浆提取～加入1N的NaOH0.5ml中和～4?条件下～离心,3500r/min,30min～取上清液～-20?下保存。本试验采用放射免疫非平衡法进行测定。 2.8 统计学处理 数据用均数加减差表示,x〒sd,～统计方法采用方差分析～由SPSS13.0统计软件处理。 3 结果 3.1 龙牡壮骨颗粒对小鼠胃排空的影响 见表1。表1 龙牡壮骨颗粒对小鼠胃排空率的影响,略, 3.2 龙牡壮骨颗粒对小鼠小肠推进的影响 见表2。表2 龙牡壮骨颗粒对小鼠小肠推进的影响,略, 3.3 龙牡壮骨颗粒对小鼠胃肠组织VIP的影响 见表3。表3 龙牡壮骨颗粒对小鼠胃肠组织VIP的影响,略, 4 讨论 中医认为小儿生长发育不良多与脾肾亏虚密切相关。临床大量研究已证实龙牡壮骨冲剂具有脾肾双补的作用。龙牡壮骨冲剂含党参、黄芪、麦冬、龟板,醋制,、白术,炒,、山药、五味子,醋制,、龙骨等15味中药～所含黄芪、党参可增强单核巨噬细胞吞噬能力～刺激淋巴细胞吞噬～还能促进NK细胞功能～延长组织细胞在体内的存活～并对抗体形成细胞有双向调节作用～用于脾气虚,白术健运中焦～既可助脾胃升发～又可健脾以绝生湿之源～在胃肠动力紊乱治疗中应用很广,山药、茯苓、大枣、甘草益气健脾～补后天生化之源,麦冬、五味子酸甘化阴～敛汗生津,鸡内金消积化滞使上述诸药补而不滞～并可促进消化吸收相得益彰。全方共奏补钙壮骨、和胃健脾、益气敛阴、解痉止痛之功～龙牡状骨冲剂全方具有健脾、和胃等功效。因此～推测龙牡壮骨冲剂可影响小儿胃肠动力。 本实验参照文献,3,～用胃复安、阿托品、新斯的明、肾上腺素注射液尾静脉注射复制胃肠动力紊乱小鼠模型。结果显示胃复安可致胃排空加速～阿托品可致胃排空减慢～新斯的明可致小肠推进比增加～肾上腺素可致小肠推进比降低～提示造模成功。本实验以胃内残留率及小肠推进比为指标～采用营养性半固体糊为食物～其营养结构更接近动物日常食物～因此能更客观、准确地反映动物胃排空状况及药物的影响,2,。 本研究发现～龙牡状骨冲剂对正常小鼠胃排空和小肠推进比无影响～但对胃复安所致胃排空加速、阿托品所致胃排空减慢,新斯的明所致小肠推进比增加、肾上腺素所致小肠推进比降低有逆转作用～且从量效关系看随剂量增大作用明显。说明本方在胃肠运动偏抑或偏亢机能状态下具有双向调节作用～符合目前中医理论的新学说“霰弹学说”,4,～即该中药复方作用于多靶体～有别于西药单体制剂～作用于单靶体机制～可起到双向调节作用～体现了中药药理作用的优势。 肠道除了分泌经典胃肠激素外～还有胃肠神经肽参与胃肠神经的调节。中医认为脾虚则失健运～近年的研究发现胃肠激素的增多或缺少 也可引起胃肠功能失常～两者在临床表现、胃肠道的机械性消化和化学性消化方面的病理生理改变有许多共同点,5,。 VIP的分泌细胞广泛存在于胃肠道,自食道至直肠,～主要发现在黏膜的内分泌细胞和黏膜下的细微神经纤维、肠肌神经丛。它有使平滑肌松弛和舒血管作用～抑制胃酸分泌～促进HCO,3的分泌～刺激胰和小肠液的产生,6,。最近有研究揭示VIP是神经系统和免疫系统之间相互作用的一种信号分子。在维持胃黏膜完整性、增强胃黏膜对损伤的防御能力和促进胃黏膜对损伤的修复中起着关键作用,7,。 本试验进一步研究发现:胃复安可致胃排空加速的同时可致胃肠组织中VIP水平降低,阿托品可致胃排空减慢的同时可致胃肠组织中VIP水平升高,新斯的明可致小肠推进比增加的同时可致胃肠组织中VIP水平降低,肾上腺素可致小肠推进比降低伴随胃肠组织中VIP水平升高。龙牡状骨冲剂对各组所致胃肠组织局部VIP水平的改变也有逆转作用～且与剂量有一定的相关性。充分证实龙牡壮骨冲剂调节胃肠运动～其机制之一可能通过调节小鼠VIP的合成和释放～调节胃肠平滑肌收缩～扩张血管～改善胃肠黏膜的血液灌流实现的。 【参考文献】 ,1,叶仁群～张光奇.二金汤对实验性功能性消化不良大鼠胃排空和胃肠激素的影响,J,.山东中医药大学学报～2005～29,2,: ,2,白长川.和胃煎剂对小鼠胃排空的影响及机制实验研究,J,.中国中医基础医学杂志～2004～10,6,: ,3,陈奇.中药药理研究方法学,M,.北京:人民卫生出版社～2006: ,4,郭彦清.清热化湿方药对以消化不良为主要表现的湿热证患者血清胃肠激素及细胞因子的影响,J,.中国中医基础医学杂志～2004～10,1,:. ,5,李志.香砂六君颗粒对脾虚大鼠胃肠动力和胃肠激素的影响,J,.泸州医学院学报～2006～29: ,6,赵贤俊.胃肠宁合剂对大鼠胃肠运动的作用及其机制探讨,J,.辽宁中医杂志～2005～32,12,: ,7,张义侠.便秘的肛门直肠动力和血浆活性肠肽变化的研究,J,.中国医科大学学报～2006～35,2,: